Подготовка, процедур и оценки тромбоцитов богатые плазмы инъекций для лечения коленного остеоартрита

Краткое содержание

Гонартроз часто видели в отделе ортопедические. Мы представляем в деталях процесс лечения остеоартрита весь колена с впрыском тромбоцитов богатые плазмы, включая подготовку, процедур и оценки.

Аннотация

Коленного остеоартрита (КОА) является одним из наиболее часто встречающихся заболеваний в отделе ортопедические. Существующих не хирургического лечения имеют ограниченное воздействие на восстановление хрящевой и костной регенерации. Тромбоциты богатые плазмы (PRP) является аутологичной биоактивное вещество, которое можно отремонтировать повреждения хряща и эффективно ускоряет регенерацию костной ткани. Однако отчетности ОТР подготовку протоколов в клинических исследованиях весьма непоследовательно, с большинством исследований, предоставление достаточной информации для того чтобы протокол быть воспроизведены. Мы описываем повторяемые метод подготовки PRP визуально, лечение Коа, используя PRP внутрисуставные инъекции и методов оценки результатов. ОТР был подготовлен с использованием ручной двойной центрифугирования. Слой ОТР был извлечены из периферической крови и используется для инъекций совместных полость коленного сустава. Оценки включали оценки концентрации крови тромбоцитов и клинические исходы. Подготовка PRP вручную центрифугированием требует меньше аппарат и является менее дорогостоящим, чем фильтрация плазмы или центрифугирования, с использованием оборудования. Время центрифугирования нашего метода двойной центрифугирования было 6 и 5 минут для соответствующих centrifugations сил 800 и 1400 x g, соответственно, чтобы обеспечить последовательную подготовку стандартизированных ОТР. Однако ручной метод подвержен ошибка оператора, и подготовка пакета ОТР не доступен. Внутрисуставные инъекции ОТР оказались эффективным средством лечения для коленного остеоартрита. Вся процедура занимает менее 30 минут, можно было бы стандартизировать тромбоцитов крови концентрацию ОТР, и лечение было доказано, чтобы быть эффективным при оценке последующих мер.

Введение

Коленного остеоартрита (КОА) является одним из наиболее часто видели заболеваний в ортопедическое отделение; 30% - 50% людей в возрасте старше 65 лет опыт этой болезни¹. В настоящее время консервативное управление KOA главным образом включает орального применения нестероидных противовоспалительных препаратов и хряща питательных препаратов, Внутрисуставных инъекций гиалуронат натрия и физиотерапии. Однако эти методы не могут остановить процесс колена совместного дегенерации². Дефектов суставного хряща может вызвать суставной поверхности износа, совместной нестабильности и метаболические изменения, которые являются частью патогенеза KOA³. Однако из-за отсутствия кровеносных сосудов, нервов и лимфоидной ткани суставного хряща, восстановление после повреждения трудно. Эффективный метод восстановления хряща особенно важно для лечения KOA. Лечение osteoclasia также является одним из ключевых направлений в лечении KOA.

Тромбоциты богатые плазмы (PRP) является аутологичной биоактивные вещества, и применение PRP для костей и суставов проблемы изучается все более. Биологическое обоснование клинического применения ОТР включает в себя его влияние на местные поставки факторов роста и модификации воспалительной реакции и его позитивного воздействия на клетки пролиферации и дифференцировки⁴. После активации внутрисуставные инъекции, ОТР выпускает α-блок через дегрануляция и выделяет различные факторы роста, в том числе тромбоцитарный фактор роста, преобразовывая фактор роста β, инсулин подобный фактор роста, эпидермального фактора роста, Сосудистый эндотелиальный фактор роста и фактор роста фибробластов. Эти поощрять остеобластов и хондроцитов распространения, подавляют дегенерации хряща, укрепить стабильность хряща и субхондральной кости, регулировать ген выражение ткани ингибитор металлопротеиназ и поддерживать баланс синтеза и деградация протеогликаны^5,6. Таким образом ОТР может восстанавливать хряща травму и ускоряет регенерацию костной ткани.

Итоги внедрения ОТР находится под влиянием различных факторов, включая сайт выборки⁷, тип центрифуги подготовка метод⁸и применение антикоагулянтов активаторы⁹ и¹⁰. Есть примерно 3 типа центробежные методы для подготовки ОТР. Ручной центрифугирования, на основе оборудования центрифугирования или методы фильтрации плазмы доступны, хотя наиболее часто используются методы ручной и на основе оборудования. Ручной метод требует наименее оборудования, удобно, является низкая стоимость и простой для выполнения (рис. 1). PRP подготовленный производительности ручного центрифугирования дважды. Смешанные периферической крови и антикоагулянта центрифугировали отделить hemocytes от плазмы и тромбоцитов. После отмены красные кровяные клетки на нижнем слое, супернатанта жидкость является центрифугировали для повторного разделения, разделив его на супернатанта тромбоцитов плохой плазмы, средней PRP и subnatant остаточной красных кровяных клеток. Средний слой используется для инъекций совместных полость коленного сустава (если количество является недостаточным, частью супернатант можно сделать). Оценки метода, включают в себя оценки концентрации крови тромбоцитов и клинические исходы.

Весьма несовместимо отчетности ОТР подготовку протоколов в клинических исследованиях, и большинство исследований не обеспечивают достаточной информации, чтобы разрешить протокол быть воспроизведены¹¹. Здесь мы описываем воспроизводимый метод подготовки PRP и лечения KOA с ОТР Внутрисуставных инъекций, с оценкой результатов. Критерии включения были пациенты с коленного остеоартрита у бедных боли для простых болеутоляющие лекарства (например, парацетамол) и консервативного лечения. Критерии исключения были включены пациенты с расстройства венозного возврата или лимфатический дренаж; у больных с колена совместной инфекции; Пациенты с дерматозов или инфекции в области инъекций; у больных с лихорадкой; у больных с коагулянта функция аномалий; пациентам с серьезными сердечно-сосудистых заболеваний. Вся процедура занимает менее 30 минут, и тромбоцитов крови концентрацию ОТР доказано до стандартных измерений. Доказывается, что его эффективность оценки результатов во время непосредственной последующей деятельности.

Протокол

Описанные методы были утверждены этики Комитет Гуандун больницы.

1. получить PRP вручную центрифугированием

1. Подготовка пациента в лежачем положении в операционной комнате стерильной ламинарного потока с удобной комнатной температуры и влажности: комнатной температуре 22 ° C и влажности 60%.
2. Используйте 1 мл шприц рисовать 0,2 мл гепарина натрия (2 мл = 12500 U), и затем смачивают 50 мл шприц.
   Примечание: 3 мл раствора натрия цитрата также является типичным в этот шаг, чтобы заменить гепарина натрия.
3. Буровой установки жгут, стерилизовать локоть 2 - 3 раза и использовать влажные 50 мл шприц рисовать 30 мл периферической крови из вен локтевого.
4. Выполните первый центрифугирования.
   1. Разделите периферической крови не менее двух 50 мл стерильного пробирок.
   2. Положите две трубы в горизонтальные роторы и затем в центрифуге, в асептических условиях.
   3. Центрифуги для 6 минут на 800 x g.
   4. Возьмите горизонтальные роторы, износ стерильные перчатки и вывезти пробирок.
   5. Наблюдать за наслоениями чтобы убедиться, что периферической крови разбиты на два слоя.
   6. Используйте чистый 10-мл шприц для сбора супернатанта жидкости от этих двух пробирок в чистых пластиковых пробирок.
5. Выполните второй центрифугирования.
   1. Используйте чистый 10-мл шприц добавить эквивалентную сумму стерильной водой или физиологическим в другой чистых пластиковых пробирок для баланса. Положите трубы в горизонтальные роторы. Пометьте один с супернатанта слой жидкости, лейкопластырь.
   2. Центрифуги для 5 минут при 1400 x g.
   3. Возьмите горизонтальные роторы вне, и, наблюдая за наслоениями проверьте, что жидкость заметное трубки разделено на три слоя.
   4. Для рисования 4 мл жидкости из среднего гранулированных клетки слоя (лейкоцит богатых, ОТР) и нижний слой супернатант используйте шприц 10 мл. Если количество среднего слоя достаточно, просто нарисуйте 4 мл от этого.
   5. Положите 0,4 мл жидкости в стерильную пробирку Антисвертывающая (ЭДТА₂K, 3,6 мг) для оценки, оставляя 3,6 мл жидкости, остающихся в шприц.
      Примечание: Протокол может быть приостановлена здесь.

2. внутрисуставное администрация ОТР

1. Пусть пациента лежа на операционном столе лежат и согнуть колено 90 градусов.
2. Найдите на сайте проколов на нижний край надколенника и 1 см от боковых связок коленного. Используйте маркер ручка для обозначения сайта.
3. Выполнения стерилизации кожи на месте прокола три раза с anerdian III, стерильные перчатки и накрыть асептических отверстие полотенце.
4. Поместите шприц параллельно плато большеберцовой кости, а затем выполните пункция под углом 45 градусов. Полностью Вставьте иглу в кожу.
5. Inject 3,6 мл ОТР из шприца в полости коленного сустава.
6. Покрытия прокол позиции стерильной марлей и исправить ее с лейкопластырь.
7. Давление в рану на 10 минут. Наблюдать за любые тяжелые неблагоприятные реакции на 30 минут.
8. Администрирование в общей сложности три инъекции ежемесячной периодичностью.
   Примечание: Протокол может быть приостановлена здесь.

3. послеоперационной оценки внедрения ОТР

1. Оцените концентрацию крови тромбоцитов в НРП.
   1. Используйте 0,4 мл PRP от Антисвертывающая трубки (K₂ЭДТА, 3,6 мг).
   2. Анализ крови тромбоцитов концентрация ОТР, используя анализатор автоматический клеток крови.
2. Оцените итоги послеоперационного введения ОТР.
   1. С консультации за 1 день до каждого из трех видов лечения провести дальнейшие пациента последующей после каждого лечения, через 3 дня после каждого лечения, 1 неделю после каждого лечения, 1 месяц после третьего обращения, через 3 месяца после третьего обращения и 6 месяцев 1 день После третьего обращения.
   2. Используйте для оценки послеоперационный эффект визуального аналоговой шкале (VAS), Западного Онтарио и индекс артроз МакМастер университетов (WOMAC), Оценка общества колена (ВНК) и Lysholm колена функциональных масштаба.

Результаты

В результате тромбоцитов граф ОТР, достиг стандартной концентрации уровня µл 1121 x 10³. Мы провели 15 последующие обследования, указанные в настоящем Протоколе на 55-летний мужчина пациента с раннего KOA. Было очевидно, что ранних клинических исходов было удовлетворительным после внутрисуставные введения ОТР (рис. 2). Однако эффективность средне-был немного уступает. Заметно значительное обезболивающий эффект было отмечено (ри...

Обсуждение

Концентрация тромбоцитов в нормальной человеческой крови между 150,000/мкл и 350 000/мкл, и широко распространено мнение, что концентрация тромбоцитов ОТР должен достичь 1,000,000/мкл, который является 3-5 раз нормальной концентрации⁹. Согласно системе иерархии ЛАПОЙ считается, что PRP имеет не очевидный эффект при концентрации тромбоцитов менее чем три раза нормальной концентрации, в то время как ОТР имеет тормозящее влияние, когда его концентрация в крови тромбоцитов более чем шести время нормал...

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Центрифуга	Eppendorf	5702
Центрифуга Пробирка	CORNING	430828
Горизонтальный ротор	Eppendorf	LL080
Anerdian III	Shanghai Likang Disinfectant HiTech Co., LTD	310173	Дезинфекция кожи
1мл Шприц	KDL  Medical Equipment Co., LTD	0,4*13 RWLB
10мл Шприц	KDL  Медицинское оборудование Ко., ЛТД	1,2 * 38 TWSB
50мл Шприц	KDL  Medical Equipment Co., Ltd	0,7 * 32 TWLB
Медицинский жгут	Changzhou Jinli Latex Products Co., LTD	0087-2011
Одноразовые стерильные резиновые хирургические перчатки	Shanghai jinxiang Latex Products Co., LTD	17060
Одноразовая игла для забора крови	KDL  Medical Equipment Co., Ltd	0,55 * 20 л(ii) RWLB
гепарин натрия для инъекций	SPH No.1 биохимический и Pharmaceutical Co., Ltd	1706101	2мл: 12500U
Антисептик для рук Jifro Ополаскиватель без геля	Shanghai Likang Disinfectant HiTech Co., Ltd	311793
Медицинский ватный тампон	Foshan Kangzheng Medical Supplies Co., LTD	KZ3-12	Дезинфицировать кожу
10мл Нормальный физиологический раствор	Jiangxi Shuangshi Pharmecutical Co., LTD	140211458
Автоматический анализатор клеток крови	Beckman Coulter	LH-750
Отверстие для			стерильных
антикоагулянтных пробирок (Пробирки для сбора крови, K2E 3,6 мг)	Becton, Dickinson and Company	CNL17-COO56	Хранить в сухом прохладном месте в пределах от 4 до 25 градусов Цельсия
Пинцет	RWD LIFE SCIENCE	F12006-10
Стерильная марля	Guangdong Ze Chang Trade Co., Ltd	170915
Лейкопластырь	3M Transpore	1527C-0
Маркер для кожи	Guangzhou Mingjia Medical Device Manufacturing Co., Ltd	10110