Методическая статья

Двухмерных рентгеновских ангиографии для изучения тонкой сосудистые структуры с использованием силиконовых инъекций резиновой смеси

DOI:

10.3791/57732

⸱

7 января 2019 г.

 ,  , 
1Department of Plastic and Reconstructive Surgery, Seoul National University College of Medicine, 2Department of Plastic and Reconstructive Surgery, Hanyang University Medical Center, Hanyang University College of Medicine

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Это исследование представляет простой двухмерной ангиографические метод для изучения тонкой сосудистых структур с помощью силиконовой резины инъекции составных и мягких тканей рентгеновской системы.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ангиография является важным инструментом для исследования сосудистых структур в различных областях исследований. Цель этого исследования – познакомить ангиографические простой метод для изучения тонкой сосудистые структуры нефиксированных, свежие ткани, с помощью силиконовой резины инъекции составных и мягких тканей рентгеновской системы. Это исследование особенно сосредоточена на территориях заслонки используется в реконструктивной хирургии. Это исследование использует ангиографии с силиконовой резины инъекции в различных экспериментальных условиях, с использованием крысах Sprague-Dawley. Во-первых 15 мл MV составные и 15 мл разбавителя смешанные. Затем готовится 1,5 мл полимеризации агента, и катетер 24G является канюлированной в общей сонной артерии крысы. Трехходовой кран затем подключен к катетер, и рентгеноконтрастных агент, после затворения с подготовленной отвердителя, вводят немедленно без утечки. Наконец агент затвердевает, собирают образца, а ангиографические изображение получается с помощью мягких тканей рентгеновской системы. Этот метод указывает, что высокое качество ангиографии, показаны прекрасные сосудистых структур можно легко и просто получить в течение в течение короткого времени.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Изучения сосудистых структур, таких как артерий и вен является важной областью интересов, особенно в реконструктивной хирургии. В этой области лоскут хирургии широко выполняется. Таким образом ангиографические изображений активно используется для изучения территории лоскут, angiosome и кровоснабжения тканей свежие1. В частности были постоянные усилия для наблюдения тонкой сосудистую, включая тонкие сосуды такие перфораторы (судов, выходящих из глубоких сосудов кожи) и душить судов (подключение судов между смежными angiosomes)2 . Эти два типа судов имеют важное значение в области реконструкции лоскут перфораторы и являются основным направлением научных исследований3,4.

Ангиография используются различные материалы. Во-первых есть чернила Индии, которая полезна в наблюдении за анатомии кровеносных сосудов. Однако это radiolucent, поэтому ангиографические изображения не могут быть получены. Более часто используемые рентгеноконтрастных материалы являются Окись свинца и барий. Однако токсичности является важнейшим недостатком оксида свинца, и это неудобно для использования при смешивании с водой из-за его сухой форме. Барий является свободным от токсичности; Однако это не очень целесообразно, как он должен быть использован после разбавления. Оба этих рентгеноконтрастных материалов не может пересекать капилляров; Таким образом если необходимо проанализировать структуру всей сосудистой, необходимо внедрить их в артерии и Вены отдельно5. Кроме того два материала вызвать красителя утечки при анатомическое рассечение, поэтому они должны быть объединены с желатином. Свинец оксид желатин и бария желатин смеси принять по крайней мере один день, чтобы затвердеть1,6,7.

Ангиография, компьютерная томография (КТ) является еще одним широко используемым методом и может помочь в просмотра трехмерной (3D) структуры8. Однако, Вены не может быть эффективно визуализировать5. В этот механизм трудно четкой визуализации тонкой сосудистую как дроссель вен, за исключением тех случаев, когда с помощью специального оборудования. Потребность в более дорогостоящее оборудование может быть недостатком, поэтому КТ ангиография не могут быть использованы во всех лабораториях. В отличие от мягких тканей рентгеновская система является относительно дешевым и может работать более легко. Эта система является оптимальным для просмотра мягких тканей и может обеспечить более высокое качество изображения мягких тканей, чем простая система рентгеновского. Хотя мягких тканей рентгеновской системы, сама не могу показать 3D изображения, это может помочь визуализировать более четко, чем КТ ангиография тонкой сосудистых структур. Таким образом мы использовали мягких тканей рентгеновской системы многих экспериментов, особенно в различных моделях лоскут и основными анатомии2,9.

Наконец использование силиконовой резины инъекций составные ангиографии имеет многочисленные преимущества. Потому что различные цвета агенты готовы, можно вводить и отображать различимых цветов, таких как чернила Индии. Таким образом одновременно изучая анатомии и ангиографии возможен. Он может пройти через капилляры и позволяют вен быть визуализированы, делая возможным экзаменов тонкой сосудистых структур. В отличие от желатина смесь силиконовая резина инъекции составные затвердевает в течение короткого периода времени, примерно 15 минут, без каких-либо дополнительных процедур. В схематическое изображение на рисунке 1приводится весь процесс.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Все процедуры, включая животных темы, были одобрены институциональный уход животных и использование комитетов из Сеула Национальной университетской больницы (IACUC № 10-0184). Этот протокол оптимизирован для исследований на сосудистую лоскут. Этот пример основан на модели 4 территория лоскут в наших предыдущих докладах.

1. Установление состояния клапана

Примечание: Важно сформировать сосудистые изменения в модели лоскут крыса 4 до 5 дней до видимых оценки6,7.

  1. Использование 7-недельных Sprague-Dawley самцах массой 200-250 г.
  2. Анестезировать крыс, используя изофлюрановая в 3-5% для индукции и 2-2,5% на эксплуатационные расходы. Выполните мыс щепотку вывода отражение тест для подтверждения, что глубина анестезии является достаточным.  Придать Мелоксикам 5 мг/кг подкожно для облегчения боли.
  3. Бритье ствола с помощью машинки для стрижки животных волос и удаления волос крем (тиогликолевой кислоты, 80%). Подготовьте стерильные хирургические поле с 10% повидон йода и стерильные Пелерина поддерживать стерильные условия всей процедуры. Применять мазь ветеринара для предотвращения сухости в глазах. Сохранение всех документов в стерильных условиях.
  4. Установить соответствующее состояние заслонки.
    1. Марк продольных кожи заслонки дизайн из нижней части живота к спине, измерение 4 x 12 см. Найдите в центре щитка, на полпути между мечевидного отростка и полового члена (рис. 1).
    2. Сделайте надрез, помеченные с помощью хирургического ножа.
    3. Вскрыть щиток с помощью ножниц, включая кожи и подкожной carnosus.
    4. Вскрыть вокруг сосудистой ножке [двусторонних глубоко диакритический подвздошных (DCI) и двусторонних поверхностных нижней эпигастральной (SIE) суда] в нижней части живота и разоблачить сосудистой ножке, с помощью хирургического лупа и микрохирургических инструментов.
    5. Поддержание или перевязать судов в зависимости от желаемых условий.
    6. Разделите лоскут вдоль наспинная срединной линии, с помощью хирургического ножа или ножниц.
    7. Положите лоскут в свое первоначальное положение и исправить ее с степлер кожи.
    8. Применение мази к хирургической раны на 3 дня и обеспечить послеоперационное обезболивание устно управляющими мелоксикам в дозе 5 мг/кг один раз в день в течение 3 дней.
    9. Подтвердите, что крыса восстанавливает достаточно сознания для поддержания грудной recumbency. Возвращение крыса в клетку и переместить его в области жилищного строительства. Применить елизаветинской воротник каждый крыс.

2. Подготовка документов

  1. Подготовка 24G катетер и трехходовой кран.
  2. Подготовьте комаров щипцы, маленькие ножницы, хирургический скальпель и хирургическое лезвие.
  3. Подготовьте ангиографические агент (Силиконовая резина инъекций составные).
    1. Смесь соединение с разбавителя в чашке стерильных образец коллекции цвет агента. Обеспечения равного количества по весу: 15 мл цвет агента составных и 15 мл разбавителя МВ в одном крыса (Крыса Sprague-Dawley, 200-250 g).
    2. Добавление отвердителя на 5% веса или объема раствора смеси непосредственно перед инъекцией: 1,5 мл Вулканизирующий агент в одном крыса (Крыса Sprague-Dawley, 200-250 g).

3. крыса артерии подготовка

  1. Используйте изофлюрановая чтобы анестезировать крысы (3-5% для индукции) и 2-2,5% на эксплуатационные расходы. Выполните мыс щепотку вывода отражение тест для подтверждения, что глубина анестезии является достаточным.
  2. Бритье шеи, с помощью машинки для стрижки животных волос и удаления волос крем (тиогликолевой кислоты, 80%).
  3. Разоблачить общей сонной артерии10.
    1. Сделайте надрез 2 см срединной линии между лопатку.
    2. Проанализируем, более глубоко с использованием комаров щипцы и тупыми ножницами до тех пор, пока комплекс слюнная железа подвергается.
    3. Убрать слюнной железы и тупо рассечь мышцы omohyoid продольно.
    4. Вскрыть вокруг общей сонной артерии.
  4. Подключить головной и хвостовой части общей сонной артерии с черным шелком и прикрепить его.
    1. Сделать галстук на проксимальной шовные и держать тяги для поддержания нагрубание артерии.
    2. Подготовьте один Шелковый шов в хвостовой части для обеспечения 24G катетера.

4. катетеризации

  1. Иглу подготовленный сонной артерии, используя 24G катетер.
  2. Затяните готовых галстук в хвостовой части и будьте осторожны, чтобы не удалить катетер во время инъекции.
  3. Подготовьте отвердителя (шаг 1.3.2).
  4. Кран трехходовой безопасно подключаться к вставленной катетер.
    1. Подтвердите выплюнул крови в катетер, добавив отрицательное давление, используя пустой шприц.

5. инъекции

  1. Придать силиконовые резины инъекции соединения до цвет глаза и ноги изменилась.
    Примечание: Изменение цвета должен появиться по ходу закачиваемой жидкости (инъекции составляет примерно 25-30 мл для каждого крысы).
  2. Зафиксируйте трехходовой кран и подождать, пока агент затвердевает.
    1. Будьте осторожны, чтобы не загрязнить с агентом, особенно при удалении шприц из трехходовой кран. Используйте защитный барьер, например марлей или винил для разделения пространства в инъекции из его окружения.
      Предупреждение: Любое загрязнение делает его трудно проанализировать ангиографические изображение, потому что соединения радио непрозрачный.
    2. Подтверждение прекращения сердцебиения и дыхания. Остановите анестезии.
    3. Уровень жесткости с оставшихся агента наблюдать как ссылка (примерно 15 минут, необходимых).

6. сбор образцов

  1. Сделайте надрез с помощью хирургическое лезвие для подкожной carnosus 1 см вне клапан для предотвращения повреждения любой сосудистые структуры внутри заслонки.
  2. Вскрыть вдоль плоскости ранее иссеченную от шага 1.4 (в плоскости carnosus подкожной) и урожай ткани, включая клапаном и сосудистой ножке, с помощью ножниц (сосудистые структуры входит в щиток).
  3. Перевязать ножке щиток с помощью 5-0 Шелковый шов и отдельные заслонки от тела. Будьте осторожны, чтобы не повредить структуру сосудистой.

7. Ангиографическая образа

  1. Разложить образца, обеспечивая его не сложить и осторожно поместите его на хирургические пелерина, используя пинцет.
  2. Возьмите изображения рентгенография.
    1. Передача образцов, лежа на кассету фильм в пример загрузки пространства.
    2. Набор мягких тканей рентгеновская система для 60 kVp, 5 мА и 5 s воздействия.
  3. Разработка фильм в темной комнате с помощью автоматического развития машины.
  4. Проверьте фильм высоким разрешением.

8. Анализ изображения6,7,11

  1. Отличить артерий и вен, основанные на непрерывность потока и диаметра.
    1. Начать от притока ножке артерии и сосредоточиться на целевых судна рассматривается.
    2. Измерьте диаметр с программным обеспечением первого открытия изображения.
      1. Нажмите кнопку « прямой » и нарисуйте линию на панели шкалы, которая является той же длины.
      2. Открытые анализировать | Задать масштаб меню и введите значение масштаба бар в известно расстояние.
      3. Нажмите кнопку « прямой » и нарисуйте линию на судно, из которых необходимо измерять диаметр.
      4. Открытые анализировать | Мера меню и подтверждения длины.
  2. Анализируйте сосудистого рисунка, учитывая области выживания лоскут.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Через следующие этот протокол, было рассмотрено лоскут кровоснабжения Sprague-Dawley крысы. Окружная кожного лоскута из нижней части живота на задний план, который измеряется 4 x 12 см был отмечен основаны на наших предыдущих докладов. Каждый образец был в различных сосудистых состоянии.

Все клапаны были подняты на основе глубоких диакритический подвздошных артерии (УДГМ) и вен и затем наддувом с артерии из различных мест. Групп...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Силиконовая резина инъекции составные ангиографии может осуществляться легко, не требует дорогостоящего оборудования и предлагает множество преимуществ. В отличие от предоперационного и интраоперационной оценки пациентов эксперименты с использованием животных и трупов может представить подробную информацию о конкретных условиях, позволяя более разнообразных и углубленных исследований. Лоскут модель с использованием крысы особенно ценными для клиницистов, потому, что изменения в различных контекстах может наблюдаться до

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы не имеют ничего сообщать.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта работа (2017R1A2B1006403) было поддержано середине карьеры исследователь программы через Национальный исследовательский фонд грантов, финансируемая корейское правительство (Министерство науки и ИКТ).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
MICROFIL Силиконовый каучук для литья под давлением FlowTech Inc.MV-112Белый краситель
MICROFIL Силиконовый каучук для литья под давлениемFlow Tech Inc.MV-117Средство для
инъекций оранжевого цвета MICROFIL Силиконовый каучук для литья под давлениемFlow Tech Inc.MV-120Синий краситель
MICROFIL Силиконовый каучук для литья под давлениемFlow Tech Inc.MV-122Желтый краситель
MICROFIL Силиконовый каучук для литья под давлениемFlow Tech Inc.MV-130Красное красящее средство
MICROFIL Силиконовый каучук для литья под давлениемFlow Tech Inc.MV-132Прозрачный агент
MICROFIL Силиконовый каучук для литья под давлением FlowTech Inc.MV-разбавитель
MICROFIL CP-101 для литейных коррозионных препаратовFlow Tech Inc.CP-101Отвердитель
SOFTEX Рентгеновская пленка фотографирование инспекционное оборудованиеSOFTEXCMB-2Рентгеновская система мягких тканей
Film Промышленнаярентгеновская пленка Fujifilm (FR 12x16.5см)
Автоматическая проявочная машинаFujifilmFPM 2800
Rat Крыса Спрэг-Доули весом 200-250 г
Трехходовой запорный кран
24-го калибра катетер
Изображение JНациональные институты здравоохранения https://imagej.nih.gov/ij/

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Taylor, G. I., Minabe, T. The Angiosomes of the Mammals and Other Vertebrates. Plastic and Reconstructive Surgery. 89 (2), 181-215 (1992).
  2. Taylor, G. I., Palmer, J. H. The vascular territories (angiosomes) of the body: experimental study and clinical applications. British Journal of Plastic Surgery. 40 (2), 113-141 (1987).
  3. Geddes, C. R., Morris, S. F., Neligan, P. C. Perforator flaps: evolution, classification, and applications. Annals of Plastic Surgery. 50 (1), 90-99 (2003).
  4. Saint-Cyr, M., Schaverien, M. V., Rohrich, R. J. Perforator Flaps: History, Controversies, Physiology, Anatomy, and Use in Reconstruction. Plastic and Reconstructive Surgery. 123 (4), 132-145 (2009).
  5. Lie, K. H., Taylor, G. I., Ashton, M. W. Hydrogen peroxide priming of the venous architecture: a new technique that reveals the underlying anatomical basis for venous complications of DIEP, TRAM, and other abdominal flaps. Plastic and Reconstructive Surgery. 133 (6), 790-804 (2014).
  6. Chang, H., Nobuaki, I., Minabe, T., Nakajima, H. Comparison of Three Different Supercharging Procedures in a Rat Skin Flap Model. Plastic and Reconstructive Surgery. 113 (1), 277-283 (2004).
  7. Chang, H., Minn, K. W., Imanishi, N., Minabe, T., Nakajima, H. Effect of Venous Superdrainage on a Four-Territory Skin Flap Survival in Rats. Plastic and Reconstructive Surgery. 119 (7), 2046-2051 (2007).
  8. Rozen, W. M., Stella, D. L., Ashton, M. W., Phillips, T. J., Taylor, G. I. Three-dimensional CT angiography: a new technique for imaging microvascular anatomy. Clinical Anatomy. 20 (8), 1001-1003 (2007).
  9. Taylor, G. I., Chubb, D. P., Ashton, M. W. True and "choke" anastomoses between perforator angiosomes: part i. anatomical location. Plastic and Reconstructive Surgery. 132 (6), 1447-1456 (2013).
  10. Feng, J., Fitz, Y., et al. Catheterization of the carotid artery and jugular vein to perform hemodynamic measures, infusions and blood sampling in a conscious rat model. Journal of Visualized Experiments. (95), e51881(2015).
  11. Park, S. O., Cho, J., Imanishi, N., Chang, H. Effect of distal venous drainage on the survival of four-territory flaps with no pedicle vein: Results from a rat model. Journal of Plastic, Reconstructive & Aesthetic Surgery. 71 (3), 410-415 (2018).
  12. Park, S. O., Chang, H., Imanishi, N. The free serratus anterior artery perforator flap-A case report and anatomic study. Microsurgery. 36 (4), 339-344 (2016).
  13. Imanishi, N., Nakajima, H., Minabe, T., Chang, H., Aiso, S. Anatomical relationship between arteries and veins in the paraumbilical region. British Journal of Plastic Surgery. 56 (6), 552-556 (2003).
  14. Schaverien, M., Saint-Cyr, M., Arbique, G., Rohrich, R. J. Three- and four-dimensional arterial and venous anatomies of the thoracodorsal artery perforator flap. Plastic and Reconstructive Surgery. 121 (5), 1578-1587 (2008).
  15. Schaverien, M., Saint-Cyr, M., Arbique, G., Hatef, D., Brown, S. A., Rohrich, R. J. Three- and Four-Dimensional Computed Tomographic Angiography and Venography of the Anterolateral Thigh Perforator Flap. Plastic and Reconstructive Surgery. 121 (5), 1685-1696 (2008).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Sprague Dawley

Похожие статьи