Легковесные протокол для синтеза самостоятельной сборки на основе амидов кислых пептидные Amphiphiles (ППД) и связанных с ними биоматериалов

Mehdi Bin Samad; Krishnaiah Maddeboina; Nathalia Rodrigues de Almeida; Martin Conda-Sheridan

doi:10.3791/57908

Method Article

Легковесные протокол для синтеза самостоятельной сборки на основе амидов кислых пептидные Amphiphiles (ППД) и связанных с ними биоматериалов

DOI:

10.3791/57908

⸱

June 25th, 2018

Mehdi Bin Samad¹ , Krishnaiah Maddeboina¹ , Nathalia Rodrigues de Almeida¹ , Martin Conda-Sheridan¹

¹Department of Pharmaceutical Sciences, University of Nebraska Medical Center

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Синтез amphiphiles на основе амидов кислых пептида (ППД) является важной задачей благодаря наличию нескольких Амин nitrogens, который требует разумного использования защиты групп, чтобы замаскировать этим реактивного функций. В настоящем документе мы описываем снисходительный метод для подготовки этих новых класса самостоятельной сборки молекул.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

На основе амидов кислых пептидные Amphiphiles (ППД) являются новый класс самостоятельной сборки амфифильных биоматериалов, относящиеся к amphiphiles пептид (ССА). Традиционные PAs обладают заряженные аминокислоты как растворяющие групп (лизин, аргинин), которые подключены непосредственно к сегменту липидов или может содержать область компоновщик из нейтральных аминокислот. Тюнинг пептид последовательность PAs может принести различные морфологии. Аналогично ППД обладают сегмент гидрофобных и нейтральных аминокислот, но также содержат полиаминовых молекулы воды, растворяющие (гидрофильных) групп. Как и в случае с PAs, ППД могут также самостоятельно собрать в разнообразных морфологии, в том числе малые стержни, витой нано ленты и плавленого нано листы, при растворении в воде. Однако наличие первичных и вторичных аминов на молекуле одного полиаминовых представляет значительную проблему при синтезировать ППД. В этой статье мы покажем простой протокол, основанный на прецеденты литературы, для достижения снисходительный синтез энергомощностей с использованием твердой фазы пептидного синтеза (ППУ). Этот протокол может быть продлен для синтеза PAs и других подобных систем. Мы также иллюстрируют шаги, которые необходимы для расщепления от смолы, идентификации и очистки.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Самостоятельной сборки пептидные amphiphiles (ССА) являются класс биоматериалов, обычно состоит из следующих сегментов: () гидрофильные голова, (b) компоновщика региона и (c) гидрофобная хвост. Большинство описанных в литературе PAs обладают гидрофильные голова состоит из заряженных или полярных аминокислотных остатков¹^,²^,³^,⁴. ССА нашли широкий спектр приложений в биомедицине, в том числе Доставка лекарств, диагностики заболеваний, восстановительной медицины, и т.д.⁵. На основе их аминокислотных последователь....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. общий протокол для синтеза ППД

Рассчитайте шкалу синтеза (обычно ммоль). Эта шкала основана на массы целевой суммы PPA. Имейте в виду, что эффективность реакции ППУ постепенно уменьшается с увеличением аминокислотной последовательности. Таким образом эффективность точное реакции трудно вычислить.
Рассчитайте вес использоваться согласно загрузки смолы смолы. Загрузка на контейнере или протокол анализа смолы и выражена в ммоль/г. Следующая формула может использоваться для расчета веса смолы:
Тщательно взвесить, 2-chlorotrityl хлорид смолы (в нашем случае загрузка является ~0.85 ммоль)
Место смолы в фриттированных синтез сосуд с....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

После очистки и синтеза и до оценки физико-химических или биологических рекомендуется массы ППД вновь зарегистрированного и чистоту установлено с помощью аналитических ВЭЖХ. Характеризация материалов или биологических оценки, ППД нужно иметь чистоты > 95%. Рисунок 2 показывает ВЭЖХ трассировки (вверху) и MALDI спектров (внизу) подтверждающий наличие продукта. ВЭЖХ аналитических систем будет интегрировать площадь под кривой (AUC)) и AUC > 95% может быть .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Протоколы, описанные здесь может использоваться для синтеза ППД скважин как PAs и связанных пептидной основе молекул (таких, как гибридные PA-peptoids). Хотя синтез пептидов, используя ППУ является простой процедурой, синтез пептидов, содержащие биологические молекулы самонаведения может быть особенно сложным. Полиамины как Спермин, спермидина, diethyelenetriamine, и т.д., может функционировать как самонаведения молекул для ориентации клетки рака¹³. ППАС могут самостоятельно собрать в нан.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы не имеют никакого конфликта интересов объявить

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Этот проект финансировался медицинский центр университета штата Небраска (Запуск средства, MC-S); НИЗ КОБРЕ, 5P20GM103480 (т. Бронич) и американского химического общества, PRF # 57434-DNI7(MC-S).

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
Name	Company	Catalog Number	Comments
2-Хлортритилхлоридная смола	Сосуд для синтеза AappTec	RTZ001
SynthwareTM	Олдрич	SYNP120050M
Дихлорметан	Acros	AC406920250	Fisher Sci. Каталог #
Wrist Shaker	Boekel Scientific	401000-2
Кайзер тест-набор	Sigma-Aldrich	60017
2-[(4,4-диметил-2,6-диоксоциклогекс-1-илиден)этил-амино]-этанол	Sigma-Aldrich	CDS004772
Безводный метанол	Acros	AC610981000	Fisher Sci. Каталог #
Набор для тестирования хлоранила	TCI	TCC1771-KIT	VWR Каталог #
Di-tert бутилдикарбонат	Каталог Acros	AC194670250	Fisher Sci. #
Dimethylformamide	Fisher Scientific	BP1160-4
гидразин	Acros	AC296815000	FIsher Sci. Catalogue #
(2-(1H-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат)	p3biosystems	31001
4-метилпиперидин	Каталог Acros	AC127515000	FIsher Sci. #
Трифторуксусная кислота	AappTec	CXZ035
Триизопропилсилан	Sigma-Aldrich	233781
Ether Fisher	Scientific	E138-1
α-Циано-4-гидроксикоричная кислота	Sigma-Aldrich	C8982
9-Аминоакридин	Sigma-Aldrich	92817
Fisherbrand Шприцевые фильтры: мембрана из фторопласта	Fisher Scientific	09-730-21

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Cui, H., Pashuck, E. T., Velichko, Y. S., Weigand, S. J., Cheetham, A. G., Newcomb, C. J., Stupp, S. I. Spontaneous and x-ray-triggered crystallization at long range in self-assembling filament networks. Science. 327, 555-559 (2010).
Pashuck, E. T., Cui, H., Stupp, S. I.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Легковесные протокол для синтеза самостоятельной сборки на основе амидов кислых пептидные Amphiphiles (ППД) и связанных с ними биоматериалов

In This Article

Summary

Abstract

Introduction

Protocol

Results

Discussion

Disclosures

Acknowledgements

Materials

References

Reprints and Permissions

Tags

Related Articles