Резка и плавающий метод для парафин врезанных тканей для разрезания

Summary

Здесь мы представляем протокол для улучшения парафин секционирование. Этот метод сочетает в себе резки и плавающие, используя простую термостатический камеру чтобы избежать процесса передачи требуется обычным методом. В результате эффективность и количество нетронутыми парафиновых срезах были значительно улучшены.

Abstract

Секционирование парафин врезанных тканей широко используется в гистологии и патологии. Однако это утомительно. Чтобы улучшить этот метод, несколько коммерческих компаний разработали сложные Секции систем перевода с помощью жидкости воды. Для упрощения этой технологии, мы создали простой метод, с помощью домашнего оборудования, которое сочетает в себе резки и плавающей внутри простой термостатический камеры; Таким образом разделы автоматически ввести ванну водой на поверхности воды. Гиппокамп от взрослых мыши мозги, Взрослый мыши почки, мозги эмбриона мыши и взрослых рыбок данио глаза были сокращены с помощью обычных парафин секционирование и представленный метод для сравнения. Статистический анализ показывает, что наш усовершенствованный метод сэкономить время и выше качество секций. Кроме того парафин секционирование всего образца в короткое время легко для младших операторов.

Introduction

Морфологическое исследование имеет важное значение в биологических исследованиях. Хотя новая технология позволила исследователи соблюдать их целей непосредственно из цельной ткани или организмов^1,2,3, резка образца в шлифов, следуют окрашивание, остается основным метод fornot только ткани морфологии, но и белка, ориентации непосредственно в ткани. Световой микроскопии использует три типа раздела: парафин, замороженные и полутонкая. Хотя cryosectioning является общим для защиты ткани антигенностью, и подготовка образца простой, морфология сохранить ткани бедных и непригодна дл....

Protocol

Все методы, описанные здесь были одобрены животное уход и использование комитета университета Наньчан.

1. Монтаж оборудования и подключение микротома

1. Дизайн параметр согласно требованиям (Дополнительные рис. 1).
2. Представляет параметр для местной фабрике для производства акриловой доски.
3. Собрать все части в последовательности: используйте хлороформ объединить 7 коммерческих Акриловые плиты в бак с раздел канала и водой ванну (рис. 1).
   Предупреждение: Хлороформ производит токсичных веществ, когда он встречает света и кислорода. Собери....

Results

Улучшенный метод увеличилось количество нетронутыми парафиновых срезах. Мы протестировали этот новый метод на взрослых мыши гиппокампа ткани, взрослых мыши почки, мозги эмбриона мыши и данио рерио глаза. Вода была добавлена в бак, и температура воды поддерживался между 38,0 ° C до 40.0 ° C. После серийно подготовки образцов тканей, они были секционного и по сравнению с обычными секционирование. Новый метод избегать потери секции и увеличению доли нетронутыми секций в взрослых мыши гиппока.......

Discussion

Для улучшения парафин раздела морфология и решить проблему потери времени при резании обычных парафин, мы создали более парафин, секционирование метод, который сочетает в себе резки и разворачивается. Этот улучшенный метод основывается на простой оборудования, которое включает раздел канала, на водяной бане и подогреватель с переключателем обнаружения температуры. На ленте в разделе входит водяной бане через канал раздела и автоматически разворачивается во время резки. Таким образом этот метод улучшает парафин, секционир.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Инкубатор	Boekel Scientific	133000-2
Этанол	Sinopharm Chemical Reagent Co., крышка	64-17-5
ксилол	Sinopharm Chemical Reagent Co., Крышка	1330-20-7
Paraplast	Leica	39601006
Модуль встраивания парафина с подогревом	Leica
Коммерческая акриловая плита
Трихлорметан	Sinopharm Chemical Reagent Co., Крышка	67-66-3
Трубчатый электрический нагревательный элемент (12 В 200 Вт)
Регулятор температуры (12 В 120 Вт)	Mingsuo	XH-W3002
Ротационный микротом	Leica
Нейтральный силиконовый герметик			Свяжите водяной канал с микротомным держателем ножа
Трансформатор напряжения	Dearll	S-250-12
Одноразовое лезвие	Accu-Edge	4689
Гематоксилин	Baso Diagnostics Inc.	BA-4025
Эозин	Басо Диагностик Инк.	BA-4025
Microslide	Sail Brand	7105
Нейтральный бальзам	Sinopharm Chemical Reagent Co., Крышка	10004160
Coverslip	Citoglas	10212424C
Микроскоп	Carl Zeiss
Соляная кислота	Xilong Chemical	7647-01-0
Водяная баня для парафиновых срезов	Leica
HistoCore Arcadia C - Холодная пластина	Leica
для парафинового спрея	Thermo Scientific	9990420