Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Каталитической очистки растений реактивнооксигенных видов в естественных условиях наночастицами оксида церия анионные

8.8K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/58373

⸱

26 августа 2018 г.

 ,  ,  , 
1Department of Botany and Plant Sciences, University of California, 2Department of Microbiology and Plant Pathology, University of California

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы представляем собой протокол для синтеза и характеристика наночастиц оксида церия (nanoceria) для ROS (реактивнооксигенных видов) очистки в естественных условиях, nanoceria изображений в тканях растений confocal микроскопии, и в естественных условиях мониторинг nanoceria Рось очистки от конфокальной микроскопии.

Аннотация

Накопление реактивнооксигенных видов (ров) является отличительной чертой реакцию растений абиотического стресса. ROS играть двойную роль в растениях, действуя в качестве сигнальных молекул на низком уровне и повреждения молекул на высоком уровне. Накопление рос в стресс растений могут повредить метаболиты, ферменты, липиды и ДНК, вызывая сокращение роста растений и урожай. Способность наночастиц оксида церия (nanoceria) каталитически Мусоробот рос в естественных условиях дает уникальный инструмент для понимания и биоинженер завод абиотическому стрессу. Здесь мы представляем протокол синтезировать и характеризуют поли (акрил) кислоты с покрытием nanoceria (НГП), интерфейс наночастиц с растениями через листовой пластинки инфильтрации и следить за их распределения и очистки в естественных условиях с помощью конфокальной ROS микроскопия. Текущий молекулярной инструменты для манипулирования ROS накопления в растениях ограничиваются модель видов и требуют кропотливого преобразования методов. Этот протокол в естественных условиях рос очистки имеет потенциал для применения к дикого типа растения с широким листьями и структура листьев как Arabidopsis thaliana.

Введение

Наночастицы оксида церия (nanoceria) широко используются в живых организмов, от фундаментальных исследований к биоинженерии, из-за их собственный каталитического реактивнооксигенных видов (ров) очистки способность1,2,3. Nanoceria имеют ROS очистки способности из-за большого числа вакансий поверхности кислорода, которые чередуются между двумя окисления государств (Ce3 + и Ce4 +) 4,5,6. Ce3 + оборванных связей эффективно собирать рос в то время как решетка штаммов на наноуровне способствуют регенерации этих дефектов сайтов через окислительно-восстановительные реакции7Велоспорт. Nanoceria недавно использовались также для изучения и инженерии растений функция8,9. Растения абиотическому стрессу опыт накопление ROS, оксидативного повреждения липидов, белков и ДНК10. В A. thaliana растений nanoceria каталитическую очистку рос в vivo приводит к улучшение завод фотосинтеза под высокие света, тепла и охлаждения подчеркивает8. Применение nanoceria почв также увеличивает стрелять биомассы и зерна урожая пшеницы (Triticum aestivum)11; растения рапса (Brassica napus), лечение с nanoceria имеют выше биомассы растений под соль стресс12.

Nanoceria предлагают биогенетики и растений биологи средство на основе нанотехнологий понять ответы абиотического стресса и улучшения завод абиотическому стрессу. Nanoceria в в естественных условиях рос очистки возможности не зависят от видов растений, и поверхностным доставки в тканях растений имеет потенциал для включения широкого применения вне модели организмов. В отличие от других методов, основанных на генетически nanoceria не требуют генерации линий завода с гиперэкспрессия антиоксидантных ферментов для высших ROS, очистки способность13. Листовой пластинки проникновения nanoceria для растений является практический подход на основе лабораторных исследований.

Общая цель настоящего Протокола заключается в описать 1) синтез и характеристика отрицательно заряженных поли (акрил) кислоты nanoceria (НГП), 2) доставки и отслеживания НГП всей ячейки листа и 3) мониторинг очистки НГП с поддержкой рос в VIVO. В этом протоколе отрицательно заряженных поли (акрил) кислоты nanoceria (НГП) синтезируется и характеризуется их спектр поглощения, гидродинамические диаметр и Зета потенциал. Мы опишем простой лист пластинки инфильтрации способ доставить НГП в завод листовой ткани. Для изображений в vivo наночастиц распределения внутри клетки мезофилл, флуоресцентные краски (дии) был использован ярлык НГП (дии-НГП) и соблюдать наночастиц через конфокальный флуоресцентной микроскопии. Наконец мы объясним, как контролировать в vivo НГП ROS очистку через confocal микроскопии.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

1. A. thaliana растения

  1. Сеять семена A. thaliana в 5 х 5 см одноразовые горшки, заполнены с стандартным почвенной смеси. Положите 32 эти горшки в пластиковый лоток с водой (~ 0,5 см Глубина) и передачи пластиковый лоток с растениями в камере роста растений.
    1. Настройки рост палата следующим образом: 200 мкмоль/ms фотосинтетической активного излучения (PAR), день 24 ± 1 ° C и 21 ± 1 ° C ночью, влажность 60% и светового режима день/ночь 14/10 h, соответственно.
  2. Тонкий каждый банк, чтобы оставить только один отдельных растений после одной недели прорастания. Принять к сведению держать саженцев с одинаковой в каждом банке.
  3. Воды горшки, поливая водопроводной водой непосредственно на пластиковый лоток каждые два дня. Растут растения в течение четырех недель. A. thaliana растений, пригодных для дальнейшего использования.

2. Синтез и характеристика КНП

  1. Весят 1.08 г нитрата церия (III) и растворить его в 2,5 мл воды класса молекулярной биологии в 50 мл Конические трубки.
  2. Вес 4,5 г кислоты поли (акрил) и растворяют в 5 мл воды класса молекулярной биологии в 50 мл Конические трубки.
  3. Смешайте эти два решения тщательно при 2000 об/мин, 15 мин, с использованием цифровой вихревой смеситель.
  4. Перенести стакан стекла 50 мл 15 мл раствора гидроксида аммония (7,2 М).
  5. Во время перемешивания на 500 об/мин, добавить смесь из шаг 2.3 каплям раствора гидроксида аммония и перемешать в 500 об/мин при комнатной температуре на 24 hr в зонта.
  6. Обложка стакан с куском бумаги, чтобы избежать существенные потери раствора во время ночи реакции.
  7. После 24 часов передать полученный раствор 50 мл Конические трубки и центрифуги на 3900 x g за 1 ч до удаления любых возможных мусора и крупных агломератов.
  8. Перевести этот 22,5 мл супернатанта раствора на три 15 мл 10 кДа фильтры и заполнить оставшуюся часть фильтра с молекулярного уровня воды, чтобы сделать общее ослабление 45 мл.
  9. Очистить супернатанта решение от свободного полимеров и других реагентов с настольная центрифуга, добавив супернатант 15 мл 10 кДа фильтрации и центрифугирования при 3900 x g 15 мин повторить этот шаг по крайней мере шесть раз.
  10. Измерьте absorbance элюента в каждом цикле с Спектрофотометр UV-VIS от 220-700 Нм для обеспечения нет свободного полимеры и другие реагенты присутствуют в окончательном решении НГП.
  11. Берут собранных НГП раствор в шприц 5 мл и фильтровать его против фильтр шприц поры размер 20 Нм. Сбор, отфильтрованный раствор НГП в 50 мл Конические трубки.
  12. Разбавленный раствор окончательный НГП в пластиковых кювет и измерить его поглощения с Спектрофотометр UV-VIS от 220-700 Нм. Пик поглощения НГП находится в 271 Нм.
  13. Рассчитать его концентрации с использованием пиво-Lambert закон: A = εCL. A это поглощение пикового значения для данного образца, ɛ коэффициент молярной абсорбции НГП (см-1 M-1), L-Длина оптического пути (кювет ширина, 1 см в этом методе), и C Молярная концентрация измеряемых наночастиц.
  14. Измерьте гидродинамические диаметр и Зета потенциал синтезированных НГП, используя размер и Зета потенциальных анализатора частиц (рис. 1).
  15. Храните окончательное решение НГП в холодильнике (4 ° C) до дальнейшего использования.
    Примечание: Обратитесь к Ву и др. 8 протокол, Подробнее о характеристике НГП.

3. Маркировка НГП с флуоресцентных красителей DiI

  1. Смешать 0,4 мл 5 мм (58 мг/Л) НГП с 3,6 мл молекулярной биологии класса воды в стеклянный флакон 20 мл и размешать в 500 об/мин.
  2. Добавить 24 мкл 1, 1'-dioctadecyl-3,3, 3, 3'-tetramethylindocarbocyanine перхлората раствор красителя (дии, 2,5 мг/мл; разбавляют в ДМСО) в 176 мкл ДМСО (диметилсульфоксид) чтобы сделать раствор красителя DiI.
  3. Добавьте красителя DiI каплям решение НГП, помешивая на 1000 об/мин за 1 мин при комнатной температуре.
  4. Перевести этот полученную смесь в 15 мл 10 кДа фильтр и заполнить трубу в верхней с молекулярной биологии класса воды, чтобы сделать общее разрежения 15 мл.
  5. Очищайте DiI помечены НГП (дии-НГП) решение от ДМСО и любые возможные бесплатные красителя DiI центрифугированием benchtop 15 мл 10 кДа фильтра на 3900 x g за 5 мин.
    1. Повторите шаг 3.5 по крайней мере пять раз.
  6. Фильтр окончательного решения DiI НГП через фильтр шприц поры размер 20 Нм.
  7. Измерьте absorbance окончательного DiI-НГП UV-VIS спектрофотометрии и вычислить его концентрация согласно закону пиво-Ламбер (рис. 2). Для получения более подробной информации смотрите 2.13 шаг.
  8. Храните его в холодильнике при температуре 4 ° C для дальнейшего использования.

4. проникновение растений листья с ЧПУ

  1. Добавить 0,1 мл инфильтрация буфера (100 мм TES, 100 MgCl2, pH 7.5, регулируется HCl) в 0,9 мл 0,5 мм НГП или DiI-НГП решения и вихревой его. Используйте решение 10 мм TES проникновения буфера как отрицательный контроль.
  2. Передать 0,2 мл НГП или DiI-НГП проникновения раствора 1 мл стерильного безыгольной шприц. Нажмите, чтобы удалить любые возможные воздушные пузыри.
  3. Извлечь растение из рост палата незадолго до проникновения с наночастицами, чтобы избежать возможных устьиц закрытие номер легких условиях.
  4. До проникновения Измерьте содержание хлорофилла от A. thaliana листья с аналогичного размера, с помощью хлорофилла метр. Измерить каждый лист с тремя реплицирует (каждый реплицировать, состоящий из по крайней мере три измерения)14. Выберите A. thaliana листья с аналогичным содержанием хлорофилла для проникновения эксперимента.
  5. Проникновения листья медленно с недавно приготовленный раствор НГП или DiI-НГП, осторожно нажав кончик безыгольной шприца против нижней части листовой пластинки (abaxial сторона) и угнетают Плунжер (рисA).
  6. Осторожно протрите избыточное решение, которое остается на поверхности листовой пластинки (рис. 3B) используя деликатную задачу стеклоочистителя (рис. 3C) и этикетки завода. Используйте новые деликатную задачу салфетки для каждой группы листьев.
  7. Держите проникли A. thaliana растений на скамейке лист адаптации и инкубации с КНП или DiI-НГП за 3 ч.
    Примечание: Проникли A. thaliana растения готовы затем для дальнейшего использования (рис. 3D).

5. подготовка проб листьев для Confocal микроскопии

  1. Roll гороха размер, количество наблюдений гель о радиусе 1 см (рис. 4A) и затем разложил его, до тех пор, пока это 1 мм толщиной на слайде стекла (рис. 4B).
  2. Используйте сверло Корк (диаметром 0,3 см) вырезать круглого сечения в центре наблюдения геля на слайде стекла (рис. 4C).
  3. Заполните срез хорошо полностью с Перфтордекалин (ПФО) для глубже и лучше конфокальный разрешающей в тканях листа.
  4. Используйте сверло Корк (диаметр 0,2 см) для сбора листьев диски от адаптированы DiI-НГП проникли A. thaliana растений (рис. 4D).
  5. Смонтировать диск листьев в ПФО, заполнены хорошо; противостоять проникли (abaxial) стороне листа.
  6. Поместите квадратные coverslip поверх листа диска и аккуратно нажмите на слайд coverslip равномерно, чтобы запечатать его с хорошо наблюдения геля и убедитесь, что нет пузырьков воздуха остаются захваченных (Рисунок 4E).

6. Визуализация DiI НГП в ткани листьев, конфокальная микроскопия

  1. Используйте 40 X объектив в Перевернутый лазерный Сканирующий конфокальный микроскоп.
  2. Перетащите два-три капли ddH2O на вершине 40 X объектив.
  3. Поместите подготовленные DiI-НГП проникли лист образец слайда на вершине Перевернутый 40 X объективные линзы.
    1. Убедитесь, что на стороне coverslip но не стекло слайд контакт непосредственно с ddH2O на объективе.
  4. Найти область интереса в образце под микроскопом с лазерный свет или яркие области.
  5. Запустите программу микроскоп и включите Аргонового лазера (устанавливается на уровне 20%).
  6. Установите обскуры собирать оптических срез менее 2 мкм и среднюю линию из 4.
  7. Изображение образца с параметрами конфокального микроскопа: 514 Нм лазер возбуждения (30%); Z-стека в разделе Толщина: 2 мкм; PMT1: 550-615 Нм (для ДИИ-НГП изображений); PMT2: 700-800 Нм (для хлоропластов воображения).
  8. Принять представителя конфокальный изображения образцов листьев от разных людей, как минимум, три биологических реплицирует.

7. imaging НГП в естественных условиях рос очистки, конфокальная микроскопия

  1. Подготовка 25 µM 2', 7'-dichlorodihydrofluorescein диацетата (H2DCFDA, краситель для указания общего ROS) и 10 мкм dihydroethidium (DHE, краситель для индикации супероксид анион) красители в TES проникновения буфере (рН 7,5) в 1,5 мл microcentrifuge трубы, отдельно.
  2. Используйте сверло Корк (диаметр 0,2 см) для сбора листьев диски из адаптированных НГП проникли A. thaliana растений.
    1. Используйте острый кончик щипцы сделать три-четыре отверстия на лист диски для ускорения краситель, процесс загрузки.
  3. Передача лист диски microcentrifuge трубы с H2DCFDA и DHE отдельно и Инкубируйте 30 мин в темноте.
  4. После инкубации промыть листья диски с ddH2O 3 раза и горе его в стакан слайд с замечанием гель (см. раздел 5 протокола).
  5. Поместите слайд на confocal микроскопа и вручную фокус в область ячеек мезофилл листа. Подробнее смотрите раздел 6 протокола.
  6. Разоблачить листьев диски к UV-A (405 нм) лазер для 3 мин для создания рос и записывать изменения интенсивности сигнала рос в ряды («xyt») в конечный диск.
  7. Изображение листа диска с параметрами конфокального микроскопа: 40 X воды цели; 496 Нм лазер возбуждения; PMT1: 500-600 Нм (для DHE DCFDA краситель обнаружения и); PMT2: 700-800 Нм (для обнаружения хлоропластов). Использование растений, проникли с только проникновение буферного раствора как отрицательный контроль.

8. НГП очистки H2O2в пробирке

  1. Поведения кошки (каталаза) подражательный деятельность синтезированных НГП в пробирке , следуя методы в предыдущих публикациях3,8,15
  2. Добавить 45,4 мкл 1 x TES инфильтрации буфера (10 мм TES, MgCl 10 мм2, pH 7.5, регулируется HCl), НГП (60 Нм, 3 мкл) и H2O2 (2 мкм, 1 мкл) в колодец (белая круглая 96 хорошо днище) и осторожно перемешать, закупорить.
  3. Добавить 10-ацетил-3,7-dihydroxyphenoxazine (рабочие концентрации 100 мкм, 0.5 мкл) и пероксидазы (HRP; рабочие концентрации 0,2 ед/мл, 0.1 мкл) в колодец, осторожно смешать его, закупорить и Инкубируйте 30 мин 10-ацетил-3,7-dihydroxyphenoxazine реагирует с H2O2 и превращается в resorufin присутствии пх.
    1. Оберните тарелку с алюминиевой фольгой, чтобы избежать свет во время инкубации.
    2. Подготовьте отрицательный контроль с помощью реакции буфер или воды для замены H2O2.
    3. За исключением Стоковый раствор Подготовьте все другие решения при комнатной температуре.
  4. После инкубации, с читателем пластины, контролировать поглощения на 560 Нм использовать resorufin для индикации уровня H2O2. Задать время режима на 0, 2, 5, 10, 20 и 30 мин.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Синтез НГП и характеристика .
НГП были синтезированы, очищенной и характеризуется ниже метода описано в разделе 2 протокола. Рисунок 1 A показывает окраски растворов церий азотнокислый, ПАА, смесь церий азотнокислый и ПАА и НГП. Изменение цвета от белого до светло-желтого рассматривается после синтезируется НГП. После очистки с помощью фильтра 10 кДа Спектрофотометр UV-VIS характеризовались НГП. П...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

В этом протоколе мы описываем НГП синтеза, характеристика, Флюоресцентная краска маркировки и конфокальная томография наночастиц в клетки растений мезофилл выставить их в естественных условиях рос очистки деятельности. НГП синтезируются из смеси нитрата церия и ПАА раствор гидроксида аммония. НГП характеризуются spectrophotomery поглощения и концентрация определяется с помощью законодательства Lamberts пиво. Измерение потенциала Зета подтвердил отрицательно заряженной поверхности КНП для повышения эффективности ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют ничего сообщать.

Благодарности

Эта работа была поддержана университет Калифорнии, Риверсайд и USDA национального института продовольствия и сельского хозяйства, Люк проекта 1009710 J.P.G. Этот материал основан на работе, поддержке Национального научного фонда под Грант № 1817363 для J.P.G.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Гексагидрат нитрата церия (III)Sigma-Aldrich238538-100G
Молекулярная биология Класс воды, CorningVWR45001-044 
Falcon 50 мл конические центрифужные пробиркиVWR14-959-49A
Poly (акриловая кислота) 1,800 МВтSigma-Aldrich323667-100G
Fisherbrand Цифровой вихревой миксер FisherScientific02-215-370
Fisherbrand Цифровой вихревой миксер аксессуар, вставка фиксатораFisher Scientific02-215-391
Аксессуары для цифрового вихревого миксера Fisherbrand: набор пенопластовых вставокFisher Scientific02-215-395
раствор гидроксида аммонияSigma-Aldrich05002-1L
PYREX Стаканы грифона, градуированные, CorningVWR13912-149 
RCT basicIKA3810001
Eppendorf Микроцентрифуга 5424VWR80094-126
Amicon Ultra-15 Центробежные фильтрующие блокиMillipore-SigmaUFC901024
Allegra X-30 Series Настольная центрифугаBeckman CoulterB06314
UV-2600 СптекрофотометрShimadzuUV-2600 120V
Ватман Анотоп 10 шприцевой фильтрSigma-AldrichWHA68091102
BD Одноразовые шприцы с наконечниками Luer-LokFisher Scientific14-829-45
Zetasizer Nano SMalvern PanalyticalZen 1600
1,1′-Диоктадецил-3,3,3′,3′-тетраметилиндокарбоцианина перхлоратSigma-Aldrich42364-100MG
Диметилсульфоксид, ACSVWRBDH1115-1LP
Sunshine Mix #1 LC1 GreenIsland Distributors, Inc5212601.CFL080P
Adaptis 1000ConvironA1000
TES, >99% (титрованиеSigma-AldrichT1375-100G
Магния хлоридSigma-AldrichM8266-1KG
Air-Tite Цельнопластиковый шприц Norm-Ject FisherScientific14-817-25
Kimberly-Clark Professional Kimtech Science Kimwipes Delicate Task WipersFisher Scientific06-666A
Carolina Observation GelCarolina132700
Предметные стекла микроскопа Corning, матовые с одной стороны, с одного концаSigma-AldrichCLS294875X25-72EA
Cork Borer Наборы с ручкамиFisher ScientificS50166A
перфтордекалиномSigma-AldrichP9900-25G
микро чехол для очков, квадратный, No 1VWR48366-045
Leica Лазерный сканирующий конфокальный микроскоп TCS SP5Leica MicrosystemsTCS SP5
2′,7′-дихлорфлуоресцина диацетатSigma-AldrichD6883-250MG
ДигидроэтидийSigma-AldrichD7008-10MG
Микроцентрифуга премиум-класса Fisherbrand Пробирки: 1,5 млFisher Scientific05-408-129
Eppendorf Uvette кюветыSigma-AldrichZ605050-80EA
Хлорофилл метр Коника МинолтаSPAD-502

Ссылки

  1. Xu, C., Qu, X. Cerium oxide nanoparticle: A remarkably versatile rare earth nanomaterial for biological applications. NPG Asia Materials. 6 (3), 90-116 (2014).
  2. Nelson, B., Johnson, M., Walker, M., Riley, K., Sims, C. Antioxidant cerium oxide nanoparticles in biology and medicine. Antioxidants. 5 (2), 15(2016).
  3. Gupta, A., Das, S., Neal, C. J., Seal, S. Controlling the surface chemistry of cerium oxide nanoparticles for biological applications. Journal of Materials Chemistry B. 4 (19), 3195-3202 (2016).
  4. Walkey, C., et al. Catalytic properties and biomedical applications of cerium oxide nanoparticles. Environ. Sci.: Nano. 2 (1), 33-53 (2015).
  5. Pulido-Reyes, G., et al. Untangling the biological effects of cerium oxide nanoparticles: the role of surface valence states. Scientific reports. 5, 15613(2015).
  6. Dutta, P., et al. Concentration of Ce3+ and oxygen vacancies in cerium oxide nanoparticles. Chemistry of Materials. 18 (21), 5144-5146 (2006).
  7. Boghossian, A. A., et al. Application of nanoparticle antioxidants to enable hyperstable chloroplasts for solar energy harvesting. Advanced Energy Materials. 3, 881-893 (2013).
  8. Wu, H., Tito, N., Giraldo, J. P. Anionic cerium oxide nanoparticles protect plant photosynthesis from abiotic stress by scavenging reactive oxygen species. ACS Nano. 11 (11), 11283-11297 (2017).
  9. Giraldo, J. P., et al. Plant nanobionics approach to augment photosynthesis and biochemical sensing. Nature Materials. 13 (4), 400-408 (2014).
  10. Demidchik, V. Mechanisms of oxidative stress in plants: From classical chemistry to cell biology. Environmental and Experimental Botany. 109, 212-228 (2015).
  11. Rico, C. M., et al. Cerium oxide nanoparticles impact yield and modify nutritional parameters in wheat (Triticum aestivum L.). Journal of Agricultural and Food Chemistry. 62 (40), 9669-9675 (2014).
  12. Rossi, L., Zhang, W., Lombardini, L., Ma, X. The impact of cerium oxide nanoparticles on the salt stress responses of Brassica napus L. Environmental Pollution. 219, 28-36 (2016).
  13. Xu, J., Duan, X., Yang, J., Beeching, J. R., Zhang, P. Enhanced reactive oxygen species scavenging by overproduction of superoxide dismutase and catalase delays postharvest physiological deterioration of cassava storage roots. Plant Physiology. 161 (3), 1517-1528 (2013).
  14. Wu, H., et al. Developing and validating a high-throughput assay for salinity tissue tolerance in wheat and barley. Planta. , (2015).
  15. Pirmohamed, T., et al. Nanoceria exhibit redox state-dependent catalase mimetic activity. Chemical communications. 46 (16), Cambridge, England. 2736-2738 (2010).
  16. Asati, A., Santra, S., Kaittanis, C., Perez, J. M. Surface-charge-dependent cell localization and cytotoxicity of cerium oxide nanoparticles. ACS nano. 4, 5321-5331 (2010).
  17. Li, J., Wu, H., Santana, I., Fahlgren, M., Giraldo, J. P. Standoff optical glucose sensing in photosynthetic organisms by a quantum dot fluorescent probe. ACS Applied Materials & Interfaces. , (2018).
  18. Wu, H., Shabala, L., Shabala, S., Giraldo, J. P. Hydroxyl radical scavenging by cerium oxide nanoparticles improves Arabidopsis salinity tolerance by enhancing leaf mesophyll potassium retention. Environmental Science: Nano. 5 (7), 1567-1583 (2018).
  19. Merad-Boudia, M., Nicole, A., Santiard-Baron, D., Saillé, C., Ceballos-Picot, I. Mitochondrial impairment as an early event in the process of apoptosis induced by glutathione depletion in neuronal cells: Relevance to Parkinson's disease. Biochemical Pharmacology. 56 (5), 645-655 (1998).
  20. Zhao, H., et al. Detection and characterization of the product of hydroethidine and intracellular superoxide by HPLC and limitations of fluorescence. Proceedings of the National Academy of Sciences. 102 (16), 5727-5732 (2005).
  21. Sun, C., Li, H., Chen, L. Nanostructured ceria-based materials: synthesis, properties, and applications. Energy & Environmental Science. 5 (9), 8475(2012).
  22. Hirano, M., Inagaki, M. Preparation of monodispersed cerium(iv) oxide particles by thermal hydrolysis: influence of the presence of urea and Gd doping on their morphology and growth. Journal of Materials Chemistry. 10 (2), 473-477 (2000).
  23. Xi, D. M., Liu, W. S., Yang, G. D., Wu, C. A., Zheng, C. C. Seed-specific overexpression of antioxidant genes in Arabidopsis enhances oxidative stress tolerance during germination and early seedling growth. Plant Biotechnology Journal. 8 (7), 796-806 (2010).
  24. Wu, H., Santana, I., Dansie, J., Vivo Giraldo, J. P. In Vivo delivery of nanoparticles into plant leaves. Current Protocols in Chemical Biology. 9 (4), 269-284 (2017).
  25. Fukushima, K., Hasebe, M. Adaxial-abaxial polarity: The developmental basis of leaf shape diversity. Genesis. 52 (1), 1-18 (2014).
  26. Monda, K., et al. Enhanced stomatal conductance by a spontaneous Arabidopsis tetraploid, Me-o, results from increased stomatal size and greater stomatal aperture. Plant physiology. 170 (3), 1435-1444 (2016).
  27. Petrov, V., Hille, J., Mueller-Roeber, B., Gechev, T. S. ROS-mediated abiotic stress-induced programmed cell death in plants. Frontiers in Plant Science. 6, 1-16 (2015).
  28. Chaves, M. M., Flexas, J., Pinheiro, C. Photosynthesis under drought and salt stress: regulation mechanisms from whole plant to cell. Annals of Botany. 103 (4), 551-560 (2009).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Абиотический стресс растенийконфокальная микроскопияинфильтрация листовой пластинкиУФ-видимый спектрофотометранализатор размера частицгидродинамический диаметрфлуоресцентный краситель DiIпоглощение АФК
Каталитической очистки растений реактивнооксигенных видов в естественных условиях наночастицами оксида церия анионные
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.