Мы описываем разработке худой модели мыши СПКЯ как с дигидротестостерон гранулы для изучения патофизиологии СПКЯ и потомство от этих плотин СПКЯ как.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Мы описываем разработке худой модели мыши СПКЯ как с дигидротестостерон гранулы для изучения патофизиологии СПКЯ и потомство от этих плотин СПКЯ как.
Hyperandrogenemia играет решающую роль в репродуктивной и метаболические функции женщин и является отличительной чертой polycystic синдром завязи. Разработка худой СПКЯ как мыши модели, которая имитирует женщин с СПКЯ клинически значимым. В этом протоколе мы описываем такой модели. Вставив длиной 4 мм гранулы порошка DHT (дигидротестостерон) кристалл (Общая длина гранул составляет 8 мм), и заменив его ежемесячно, мы в состоянии производить СПКЯ как модель мыши с сыворотка DHT уровней 2 раза выше, чем мышей, не имплантируются с DHT (без Дигидротестостерон). Мы наблюдали репродуктивного и метаболической дисфункцией без изменения веса тела и состава тела. В то время как выставке высокую степень бесплодия, небольшое подмножество этих самок мышей СПКЯ как можно получить супоросыми и их потомство Показать задержка полового созревания и увеличение тестостерона как взрослые. Эта модель СПКЯ как худой мыши является полезным инструментом для изучения патофизиологии СПКЯ и потомство от этих плотин СПКЯ как.
Гиперандрогении является отличительной чертой синдром поликистозных яичников (СПКЯ) критериев NIH и избыток андрогенов и СПКЯ (AE-СПКЯ) общества. Женщин с СПКЯ иметь затруднение получить супоросы и имеют повышенный риск осложнений беременности1. Даже если они забеременеть, потомства женщины имеют неблагоприятные последствия для здоровья по результатам2,3. Животные модели были разработаны с использованием различных стратегий4,5,6,,7....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Здесь мы представляем подробные протоколы для подготовки Пелле DHT и вставки и репродуктивного и метаболических тестирования. Мышей, используемые в данном исследовании были смешанного происхождения (C57/B6, CD1, 129Sv) и поддерживались с пищей и водой ad libitum в цикле свет/темно 14/10 h при 24 ° C в объекте животных Broadway здание исследований в школе университета Джонса Хопкинса Медицины. Все процедуры были утверждены Комитетом использование и уход животных университета Джонса Хопкинса.
1. Создайте модель СПКЯ как мыши
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Сывороточные уровни DHT и тест на переносимость глюкозы
Уровни DHT были измерены от собранных сыворотки обоих ELISA и LC-MS согласно протоколу 1,24 – 1,25 и 2,9, 3.0. DHT абсолютные значения отличаются между масс-спектрометрии и ELISA, однако относительная лоно (около 2 раза) vs DHT без Дигидротестостерон вставки схож с обеих анализов и через эксперименты15,23,
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Гиперандрогении является ключевой особенностью СПКЯ. Уровни DHT сыворотки (два раза выше в DHT мышей чем без Дигидротестостерон мышей), используемые в настоящем Протоколе ниже, чем те, которые сообщили другие следователи в предыдущих исследованиях и калибруются пропорционально имитировать женщин с СПКЯ5,19, 20,21. В отличие от других моделей эта модель 2 раза DHT не изменяет вес тела и тело со.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Ничего не разглашать.
Эта работа была поддержана национальных институтов здравоохранения (гранты R00-HD068130 по с.в.) и исследовательский центр в Балтимор диабет: пилотов и осуществимость Грант (чтобы с.в.).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Кристаллический порошок 5α-DHT | Sigma-Aldrich | A8380-1G | |
| Dow Corning Силастическая трубка | Fisher | Scientific 11-189-15D | 0,04 дюйма/1 мм внутренний диаметр x0,085 дюйма / 2,15 мм внешний диаметр |
| медицинский клей силиконовый | фактор II, InC. | А-100 | |
| Очки, лабораторные халаты, перчатки и маски. | |||
| 10 & микро; L наконечники для пипеток без фильтра | США Scientific | 11113700 | |
| Предметное стекло для микроскопа | Fisher Scientific | 12-550-003 | |
| Diff Quik для окрашивания клеток | Fisher Scientific | NC9979740 | |
| Lancet | Fisher Scientific | NC9416572 | |
| 3 мл Шприц | Becton, Dickinson and Company (BD), | 30985 | |
| прилагаемая игла: 20 G | BD | 305176 | |
| Линейка: любая длина более 10 см с миллиметровой шкалой. | |||
| Xylazine | Vet one AnnSeA LA, MWI, Boise | NDC13985-704-10 | 100 мг/мл |
| Кетамина гидрохлорид | Hospira, Inc | NDC 0409-2051-05 | 100 мг/мл |
| Хирургическая скоба | AutoClip® Система, Fine Science Tool | 12020-00 | |
| Инсулиновый шприц | BD | 329461 | 1/2 CC, низкая доза U-100 инсулиновый шприц |
| Trocar | Innovative Research of America | MP-182 | |
| Микроскоп | Carl Zeiss Primo Star | 415500-0010-001 | |
| Германия Ухопроб | Fisher Scientific | 13-812-201 | |
| Тестостерон крыса/мыши ИФА набор | IBL | B79174 | |
| DHT ELISA kit Alpha | Diagnostic International | 1940 | |
| Ультраглюкометр в одно касание Life | Scan, Inc. | ||
| Тест-полоски One touch ultra Life | Scan, Inc. | ||
| Eppendorf tube | Fisher Scientific | 05-402-18 | |
| Лезвие бритвы | Fisher Scientific | 12-640 | |
| Clidox | Fisher Scientific | NC0089321 | |
| хирургическая пеленка | Fisher Scientific | 50587953 | Производитель: Andwin Scientific 56616018 |
| Бетадиновый антисептический раствор | Walgreens | ||
| 3М Ветбонд (н-бутилцианоакрилат) | 3М Наука. Применение в жизни |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.