Настоящим мы представляем протокол для измерения у постели эндотоксинной активности образцов крови человека. Эндотоксин активность анализ простой тест для выполнения и может быть полезным биомаркером в критически больных пациентов с сепсисом.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Эндотоксин деятельности Анализ для обнаружения эндотоксемии всей крови у критически больных пациентов
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Липополисахарид, также известный как эндотоксин, является фундаментальным компонентом грамотрицательных бактерий и играет решающую роль в развитии сепсиса и септического шока. Раннее выявление инфекционного процесса, который быстро превращается в критическое заболевание, может привести к более быстрому и интенсивному лечению, что потенциально может привести к улучшению исходов для пациентов. Эндотоксинная активность (ЕА) можно использовать у постели в качестве надежного биомаркера системной эндотоксемии. Обнаружение повышенных уровней эндотоксинной активности неоднократно было показано, что связано с повышенной тяжести заболевания у пациентов с сепсисом и септическим шоком. Ассес быстро и легко выполнить. Кратко, после отбора проб, аликвот цельной крови смешивается с антиэндотоксином антитела и с добавлением LPS. Эндотоксинная активность измеряется как относительный окислительный всплеск загрунтованных нейтрофилов, обнаруженный хемиолюминесценцией. Выход асссея выражается по шкале от 0 (отсутствует) до 1 (максимальный) и классифицируется как "низкий" (0,4 единицы), "промежуточный" (0,4-0,59 единицы) или "высокий" (0,6 единицы). Подробная методология и обоснование реализации асссеа Е.А. представлены в данной рукописи.
Введение
Липополисахарид (LPS), также известный как эндотоксин, является ключевым компонентом мембранной структуры грамположительных (GN) бактерий. Он составляет около 10% клеточной стенки, будучи жизненно важным для внешней целостности мембраны и гомеостаза. Кроме того, это мощный активатор врожденнойиммунной системы хозяина 1,2.
В пробирке воздействие врожденных клеток иммунной системына LPS приводит к изменениям в экспрессии нескольких генов 3. Введение очень небольших количеств ЛПС у здоровых добровольцев человека вызывает каскад острого системного воспаления, в т....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Протокол проводится в соответствии с институциональными руководящими принципами, касающимися обработки биопроб человека и в соответствии с действующими стандартными оперативными процедурами нашей клинической лаборатории. Использование данных ЕА и клинической информации о пациентах, тестируемых в соответствии с руководящими принципами комитета по этике исследований человека нашего учреждения.
1. Лабораторное оборудование и содержимое набора ассса
- Храните комплект EA при 2-8 градусах по Цельсию, когда он не используется.
- Каждый тест EA состоит из 5 различных видов труб; использовать каждый из них для другой части ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
72-летний мужчина был госпитализирован в отделение неотложной помощи (ЭД) академической городской больницы. Несколькими днями ранее он представил своему лечащему врачу жалобу на жжение при мочеиспускании. Была рекомендована кратковременная терапия с оральным фосфомицином. Его история болезни включала гипертонию, неосложненный диабет 2 типа и доброкачественную гиперплазию предстательной железы. Его лекарства включали эналаприл, аторвастатин, тамсулозин и метформин.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Септический шок по-прежнему в настоящее время связано со смертностью выше, чем 40%, хотя этот показатель варьируется в соответствии с рассмотренными докладами16. Необходимость новых и лучших биомаркеров пропагандируется большинством экспертов в области, с тем чтобы помочь врачам в ранней диагностике, лучшее управление, и прогнозирование пациентов с септическим шоком6.
Выполнение теста EA не требует предыдущих технических знаний или сложного лабор.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Estor SpA покрыла расходы на публикацию и видеопродукцию журнала. Авторы не имеют конфликта интересов раскрыть.
Благодарности
Мы благодарим Паоло Брагане и Лизу Матиасен, доктор скую степень, за их обзор методологии протокола анализа. Дарио Уинтертон, MD, оказал существенную помощь в просмотре рукописи для владения английским языком.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Комплект EAA | Spectral Medical Inc. | EAAST-20 | Пакет с 20 тестами + 1 контролем качества |
| Smart Line TL | Berthold | EAASL | Люминометр |
| Инкубатор Шейкер | GRANT | ES-20 | Мини-инкубатор |
| шейкер Vortexer | VWR | 444-2790 | Вихревой прибор |
Ссылки
- Akira, S., Takeda, K. Toll-like receptor signalling. Nature Reviews Immunology. 4 (7), 499-511 (2004).
- Takeda, K. Evolution and integration of innate immune recognition systems: the Toll-like receptors. Journal of Endotoxin Research. 11 (1....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
