Постоянного тока транскраниальной стимуляции (ЦТД) является лечебный метод предложил для лечения психических заболеваний. Животную модель имеет важное значение для понимания конкретных биологические изменения, вызываемые ЦТД. Этот протокол описывает модель мыши ЦТД, использующая хронически имплантированных электродов.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Постоянного тока транскраниальной стимуляции (ЦТД) у мышей
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Постоянного тока транскраниальной стимуляции (ЦТД) является методом неинвазивной neuromodulation, предложил в качестве альтернативного или дополнительного лечения для нескольких психоневрологических заболеваний. Биологические эффекты ЦТД полностью не поняты, которые отчасти объясняется из-за трудностей в получении ткани человеческого мозга. Этот протокол описывает модель мыши ЦТД, использующая хронически имплантированных электродов, позволяя изучение долгосрочных биологических эффектов ЦТД. В этой экспериментальной модели ЦТД изменения экспрессии генов корковых и предлагает выдающийся вклад в понимание обоснование для терапевтического использования.
Введение
Постоянного тока транскраниальной стимуляции (ЦТД) является неинвазивным, лоу кост, терапевтический метод, который фокусируется на нейрональных модуляция с помощью малой интенсивности непрерывное токов1. Есть в настоящее время двух установок (одна и cathodal) для ЦТД. Хотя одна стимуляция оказывает текущее электрическое поле слишком слабы, чтобы вызвать потенциалы действия, электрофизиологии исследования показали, что этот метод производит изменения в синаптической пластичности2. Например доказательств показывает, что ЦТД индуцирует долгосрочные потенцирование (LTP) эффекты, такие как увеличение пиковых амплитудно возбуж....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Отдельно расположенный взрослых мужчин (8-12 недель) мышей C57BL/6 были использованы в этом эксперименте. Животные получили должного ухода до, во время и после экспериментальных процедур с пищей и водой ad libitum. Все процедуры были утверждены Комитетом животных этики из федерального университета Минас-Жерайс (протокол № 59/2014).
1. электрод размещение
-
Седативным и фиксирующий животное на стереотаксического аппарата
- Стерилизуйте всех хирургических инструментов.
Роман Хирургические инструменты были стерилизуют в течение 3 минут на 440 ° C. Ватные палочки были газобетона в 20 psi (п....
- Стерилизуйте всех хирургических инструментов.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Хирургический протокол представлен долгосрочной стабильности имплантата для по крайней мере один месяц, без воспалительных сигналы на объекте стимулируется, ни любой другой нежелательный эффект. Все животные выжили хирургические процедуры и ЦТД сессий (n = 8). В этом эксперименте ЦТД имплантаты были размещены над М1 и м2 коре (+ 1.0 мм передней задней и боковых 0.0 мм для bregma). Неделю спустя, ЦТД (n = 3-4) и Шам (n = 3) мышей были стимулировали пять дней подряд в течение 10 мин на 0,35.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
В последние годы нейростимуляция методы ввода клинической практике как перспективный процедура для лечения нервно-психиатрическими расстройствами23. Чтобы уменьшить ограничения, налагаемые отсутствие знаний о механизмах нейростимуляция, мы представили здесь модель мыши ЦТД, перевозящих электрод, который может целевых регионах мозга. Так как электрод хронически имплантируемые, животных модель позволяет расследование долгосрочные биологические эффекты, вызываемые ЦТД (для по крайней мере 1 месяц) в .......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Благодарности
Мы благодарим г-н Родриго де Соуза за помощь в поддержании мыши колоний. L.A.V.M-Докторантура научный накидки. Эта работа была поддержана Грант PRONEX (FAPEMIG: APQ-00476-14).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| BD Ultra-Fine 50U Шприц | BD | 10033430026 | для внутрибрюшинных инъекций. |
| Бритва (Philips Multigroom) | Philips (Бразилия) | QG3340/16 | Для обрезки места операции. |
| Surgical Equipment | |||
| Модель 940 Стереотаксический инструмент для мелких животных с цифровой консолью | дисплея KOPF | 940 | Для хирургического ограничения и позиционирования животных. |
| Модель 922 Неразрывные ушные накладки с углом наклона 60 градусов | KOPF | 922 | Для хирургического ограничения и позиционирования животных. |
| Держатель канюли | KOPF | 1766-AP | Для установки имплантата. |
| Прецизионный стерео зум-бинокулярный микроскоп (III) на штанге | WPI | PZMIII-BS | Для локализации брегмы и позиционирования имплантатов. |
| Модель системы термостатирования | KOPF | TCAT-2LV | Для термоконтроля животных. |
| Источник холодного света | WPI | WA-12633 | Для фокусной яркости |
| Настольная система анестезии лабораторных животных с очисткой | VetEquip | 901820 | Для доставки изофлурана и безопасности. |
| Адсорбционный фильтр с активированным углем VaporGuard | VetEquip | 931401 | Меры безопасности системы доставки. |
| Модель 923-B Держатель головки для газовой анестезии мыши | KOPF | 923-B | Для ограничения животных и доставки O2 и изофлурана. |
| Кислородный регулятор, Е-баллон | VetEquip | 901305 | для регулирования и доставки O2. |
| Кислородный шланг – green | VetEquip | 931503 | для доставки O2 и изофлурана. |
| Инфракрасный стерилизатор 800 º C | Marconi | MA1201 | Для стерилизации инструментов. |
| Surgical Tools | |||
| Fine Scissors - ToughCut | Fine Science Tools | 14058-11 | Для разреза. |
| Хирургические крючки | INJEX | 1636 | собственного производства - используются для очистки места операции от кожи и шерсти. |
| Стандартный пинцет или щипцы | - | для захвата кожи. | |
| Surgical Consumables | |||
| Vetbond | 3M | SC-361931 | Для закрытия разреза. |
| Набор цемента и катализатора (Duralay) | Reliance | 2OZ | Для фиксации имплантатов. |
| Стерильные ватные тампоны (автоклавные) | JnJ | 75U | Для антисептики в области хирургического вмешательства. |
| 24-луночная пластина (Tissue Culture Plate) | SARSTEDT | 831,836 | Для приготовления цемента. |
| Применение Щетка | parkell | S286 | Для замешивания и нанесения цемента. |
| Pharmaceutics | |||
| Xylazin (ANASEDAN 2%) | Ceva Pharmaceutical (Brazil) | P10160 | Для индукции анестезии. |
| Кетамин (ДОПАЛЕН 10%) | Ceva Pharmaceutical (Бразилия) | P30101 | Для индукции анестезии. |
| Изофлуран (100%) | Кристá lia (Бразилия) | 100 мл | Для поддержания анестезии. |
| Лидокаин (КСИЛЕСТЕЗИН 5%) | Cristal | Pharma-Для | послеоперационного ухода. |
| Кетопрофен (ПРОФЕНИД 100 мг) | Санофи Авентис | 20мл | Для послеоперационного ухода. |
| Раствор лактата Ringer's | SANOBIOL LAB 7898153652145 | для послеоперационного ухода. | |
| TobraDex (Дексаметазон 1 мг/г) | Alcon | 631 | Для смазки и защиты глаз. |
| Stimulation | |||
| Animal Transcranial Stimulator | Soterix Medical | 2100 | Для текущего поколения. |
| Держатель электродов штифтового типа (цилиндрическое основание держателя) | Опора для электродов | Soterix Medical | 2100 |
| Электрод штифтового типа (Ag/AgCl) | Soterix Medical | 2100 | Для подачи тока (электрод). |
| Штифтовый электродный колпачок | Soterix Medical | 2100 | Для защиты имплантатов. |
| Корпусной электрод (с покрытием Ag/AgCl) | Soterix Medical | 2100 | для подачи тока (электрод). |
| Солевой раствор (0.9%) | FarmaX | 7896902206441 | Проводящая среда для подачи тока. |
| Стандартный пинцет или щипцы | - | для настройки tDCS. | |
| Real Time Polymerase Chain Reaction | |||
| BioRad CFX96 Real Time System | BioRad | C1000 | Для количественной ПЦР |
| SsoAdvancedTM Universal SYBR Green Supermix (5 X 1 мл) | BioRad | 1725271 | для qPCR |
| Hard Shell PCR Plates PCT COM 50 p/ CFX96 | BioRad | HSP9601 | Для qPCR |
| Microseal "B" seal pct c/ 100 | BioRad | MSB1001 | для количественной ПЦР |
Ссылки
- Filmer, H. L., Dux, P. E., Mattingley, J. B. Applications of transcranial direct current stimulation for understanding brain function. Trends in Neurosciences. 37 (12), 742-753 (2014).
- Nitsche, M. A., Paulus, W. Sustained exci....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
