Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Подавление роста клетки множественной миеломы в Vivo, одностенные углеродные нанотрубки (ОУНТ)-доставлены антисмысловых Oligos MALAT1

5.9K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/58598

⸱

13 декабря 2018 г.

 ,  , 
1Department of Cancer Biology, Lerner Research Institute, Cleveland Clinic, 2Department of Medical Oncology, Dana-Farber Cancer Institute, Harvard Medical School

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Эта рукопись описывает синтез одностенных углеродных нанотрубок (ОУНТ)-конъюгированных MALAT1 антисмысловых gapmer ДНК олигонуклеотида (ОУНТ анти MALAT1), который демонстрирует надежную доставку ОУНТ и мощный терапевтический эффект анти MALAT1 в vitro и in vivo. Методы, используемые для синтеза, модификация, спряжение, и описаны инъекции ОУНТ анти MALAT1.

Аннотация

Одностенные углеродные нанотрубки (ОУНТ) является новый тип наночастиц, который был использован для доставки нескольких видов наркотиков в клетки, такие как белки, олигонуклеотиды и синтетических наркотиков мелкомолекулярных. ОУНТ имеет настраиваемые размеры, большой поверхностный площади и можно гибко привязать с наркотиками через различные модификации на его поверхности; Таким образом это идеальная система для транспортировки наркотиков в клетки. Длиной некодирующих РНК (lncRNAs) являются кластер некодирующей РНК больше чем 200 nt, который нельзя преобразовать в белок, но играют важную роль в биологических и патофизиологических процессов. Стенограмма аденокарциномы легкого с метастазами связанные 1 (MALAT1) является весьма сохраняется lncRNA. Было продемонстрировано, что более высокие уровни MALAT1 связаны с плохим прогнозом различные виды рака, в том числе множественной миеломы (мм). Мы показали, что MALAT1 регулирует ДНК клеток и ремонт смерти в мм; Таким образом MALAT1 может рассматриваться как терапевтические мишенью для мм. Однако эффективной доставки антисмысловых oligo подавляют/нокдаун MALAT1 в естественных условиях по-прежнему является проблемой. В этом исследовании мы изменить ОУНТ с ПЭГ-2000 и спряжения oligo анти MALAT1 к нему, проверить доставку этого соединения в пробирке, вставляют его внутривенно распространение модель мыши мм и наблюдать значительное торможение прогрессирования мм, который указывает что ОУНТ является идеальным доставки Трансфер для анти MALAT1 gapmer ДНК.

Введение

ОУНТ является роман Наноматериал, которые могут доставить различные виды наркотиков, таких как белки, малые молекулы и нуклеиновые кислоты, стабильно и эффективно с идеальной переносимость и минимальная токсичность в пробирке1 и в естественных условиях2. Функционализированных ОУНТ имеет большой биосовместимость и растворимость в воде, может использоваться как трансфер для небольших молекул и может нести их проникнуть в клеточной мембраны3,4,5.

lncRNAs-группа РНК (> 200 nt), трансляции из генома к мРНК, но не могут быть переведены с белками. Увеличения доказательств показал, что lncRNAs участвуют в регуляции генов выражение6 и участвуют в инициации и прогрессирования большинства видов рака, включая мм7,8,9. MALAT1 это-обогащенный некодирующей Стенограмма 2 (NEAT2) и весьма сохранены lncRNA10. MALAT1 первоначально отражаются в метастатических не небольшие клеток легких рака легкого (НМРЛ)11, но был оверэкспрессировали в многочисленных опухолей5,12,13; Это один из наиболее сильно выраженным lncRNAs и коррелирует с плохим прогнозом в мм8,14. Уровень экспрессии MALAT1 значительно выше в роковой курс интрамедуллярный мм пациентов по сравнению с теми только диагнозом15мм.

В предыдущем исследовании, мы подтвердили, что анти MALAT1 oligos энергично привести к повреждение ДНК и апоптоз в16 мм с помощью gapmer антисмысловых олигонуклеотидов ДНК ориентации MALAT1 (анти MALAT1) в клетках мм. Gapmer ДНК состоит из антисмысловых ДНК и соединены 2'-OMe-РНК, которые могли бы побудить MALAT1 расщепление H РНКазы раз связана деятельность17. В естественных условиях доставки эффективность антисмысловых oligos по-прежнему ограничивает его клинического использования.

Чтобы проверить доставку эффект ОУНТ для анти MALAT1 gapmer oligos, gapmer анти MALAT1, что ДНК конъюгированных с DSPE-PEG2000-Амин функционализированных ОУНТ. ОУНТ анти MALAT1 затем вводят внутривенно в модель распространения мыши мм; поразительное ингибирование наблюдается после четырех сеансов.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все эксперименты с участием животных были предварительно одобренных IACUC клиники Кливленда (институциональный уход животных и использование Комитета).

1. Синтез функционализированных SWCNTs

  1. Смешайте 1 мг SWCNTs, 5 мг DSPE-PEG2000-Амин и 5 мл стерилизованные нуклеиназы свободной воды в пузырек сцинтилляционные стекла (20 мл). Встряхните его хорошо, чтобы полностью растворить все реагенты.
  2. Sonicate флакон в ванной sonicator воды на уровень мощности 40 Вт на 1 ч при комнатной температуре (RT, 20 мин x 3, изменить воды каждые 20 минут во избежание перегрева). Затем центрифуги на 24000 g x 6 ч и собирать супернатанта решения. Этот функциональный ОУНТ раствор может храниться при температуре 4 ° C на 2 месяца.
  3. Добавьте 1 мл раствора ОУНТ с шагом 1,2 до 100 кДа MWCO центробежного фильтра устройства, следуют 4 мл стерилизованные нуклеиназы свободной воды. Центрифуги для 10 мин на 4000 x g на RT для удаления дополнительных DSPE-PEG2000-Амин. Повторить добавление 4 мл воды и центрифугирования 5 x. Более чем 0,5 мл раствора оставшихся ОУНТ останется в фильтр после каждого центрифугирования.
  4. Измерить концентрацию ОУНТ решения оставшихся в фильтре с помощью УФ-Вид спектрометр 808 нм после окончательной стирки. Конечная концентрация обычно около 50 мг/Л (рассчитывается согласно метод, разработанный Кам et al.18).
    Примечание: Обеспечьте, чтобы DSPE-PEG-функционализированных SWCNTs водорастворимый после шага 1.4 и стабильны в различных биологических решений без видимых агрегации через несколько недель.

2. спряжение анти MALAT1 Gapmer ДНК, обрамленная 2'-O изменение РНК к функционализированных ОУНТ

  1. Добавьте 0,5 мг сульфогруппу-LC-SPDP в 450 мкл DSPE-PEG2000-Амин функционализированных ОУНТ. Добавьте 50 мкл 10 x PBS и затем Проинкубируйте втечение 2 ч на RT.
  2. Чтобы удалить дополнительные сульфогруппу-LC-SPDP, добавьте реакции от шаг 2.1 100 кДа MWCO центробежного фильтра устройства, следуют 4 мл воды, свободной от нуклеиназы. Центрифуга для 10 мин на 4000 x g на RT. повторить добавление 4 мл воды и центрифугирования 5 x.
  3. Добавить 200 Нм тиоловых модифицированные анти MALAT1-Cy3 gapmer ДНК в 1,5 мл раствора коммерческих DTT и проинкубируйте 90 мин на RT. очистить продукт со столбцом НПД-5, после производителя протокол. Элюировать анти MALAT1-Cy3 с 500 мкл стерилизованные нуклеиназы бесплатно 1 x PBS.
    Примечание: Функционализированных ОУНТ может храниться с добавил DTT, который может расколоть дисульфидными облигаций сформирован во время хранения thiolated анти MALAT1 gapmer ДНК. Добавлено DTT могут быть удалены по столбцу Анапчи-5 перед конъюгации с ОУНТ.
  4. Собирать сульфогруппу LC-SPDP-лечение DSPE-PEG2000-Амин ОУНТ решение оставлено в фильтре и разбавить его с 500 мкл раствора анти MALAT1-Cy3. Затем проинкубируйте ее на 4 ° C в течение 24 ч. Конъюгированные ОУНТ анти MALAT1 может храниться при температуре 4 ° C в течение 3 недель. Следуя той же процедуре конъюгированных ОУНТ с антисмысловых oligo схватка может синтезируется и используется как ОУНТ управления.

3. хвост инъекции Вену ОУНТ анти MALAT1

  1. Создать модель распространения мыши мм.
    1. Для достижения наилучших результатов сравнения, случайным образом организовать 14 КИВНУЛ. CB17-Prkdcscid/J мышей (8 недель) на суда или управления группы (семь в каждой группе) с же соотношение мужчин и женщин.
    2. Очистить операции скамейке и стерилизовать его с 70% спирта.
    3. Используйте лампы Отопление теплый мыши, чтобы помочь хвост вен появляться. Должным образом сдерживать мышь с фиксатор инъекции хвост.
    4. Придать 5 x 10-6 MM.1S-Люк mCherry клеток в 50 мкл PBS через Вену хвост без анестезии. Нажмите узел впрыска с спиртом за 30 с. Марк вводят мыши и вернуть его в клетку чистой.
  2. Начало лечения на 7 день после инъекции клеток MM.1S.
    1. Придать 50 мкл PBS, содержащих ОУНТ анти MALAT1 в Вену хвост мыши. Используйте PBS, содержащие ОУНТ-элемент управления как элемент управления.
    2. Нажмите узел впрыска с спиртом для 30 s.
    3. Соблюдать местные кровотечение на хвост и общее поведение мыши за 1 мин, а затем вернуться к чистой клетке. Соблюдайте все вводят мышей снова перед возвращением в клетку к стойке, чтобы убедиться, что инъекции переносится хорошо.
  3. Повторяйте инъекции каждые 7 дней до окончания эксперимента.
    1. Прекратить эксперимент, когда ухудшает общее состояние здоровья мыши: когда не еды или питья, внешний вид бледно лапы, подкожные кровотечения, одышка, снижение активности, параличом нижних конечностей, и/или осязаемый массы в наблюдается живота.

4. Оценка прогрессирования заболевания

  1. Оценить общее состояние мышей каждый день после инъекции клеток MM.1S-Люк mCherry. Уделять особое внимание, если у мышей парализует нижних конечностей.
  2. Оцените с помощью в естественных условиях тепловизионные системы 1 раз в неделю, перед инъекцией ОУНТ анти MALAT1 рост опухоли.
    1. Подготовьте свежие 15 мг/мл D-люциферин с ПБС.
    2. Анестезировать мышей с изофлюрановая испарителем (3 – 5% для индукции и 1 – 3% за обслуживание, в зависимости от статуса мышей).
    3. Придать 150 мг/кг D-люциферин в каждой мыши, внутрибрюшинно, 5 мин до изображений; затем изображение мышей в положении лежа с спектром изображений системы.
    4. Соберите последовательные изображения мышей каждые 2 мин, пока не будет достигнут насыщения люминесценции. Настройка интервала времени по D-люциферин поглощения/сигнал.
  3. Использование CO2 в жертву мышей при достижении окончания эксперимента.
  4. Поскольку это модель распространения мм, процесс мышей следующим образом.
    1. Вес мыши перед рассечение.
    2. Соберите периферической крови из сердца для assay полный анализ крови (CBC), выполняемые машиной счетчик клеток крови. Количество белых кровяных клеток и красных кровяных клеток, а также отношение лимфоцитов, являются основным индексы.
    3. Изолировать селезенки и взвесить его. Рассчитать отношение массы селезенки/тела; Рассмотрим > 0,5% как расширения селезенки.
    4. Соберите ткани из костного мозга, селезенки, лимфатических узлов, почки и ткани с видимых метастазов.
    5. Соберите позвоночника, если мышь разработал паралича нижних конечностей.
    6. Извлечь РНК и белка из проб костного мозга.
    7. Исправьте все остальные ткани в формалине.
    8. Для декальцинации погрузите образцов костей в 0,25 М ЭДТА раствор (pH 8.0) на 5 дней после 24 ч фиксации.
    9. Погрузите все образцы в 75% спирта для длительного хранения.
  5. Сравнение сигнала Люцифераза на же время очков в двух группах. Из обеих групп запишите жертву даты каждой мыши и расчета кривых выживания двух групп с программным обеспечением.
    Примечание: Все процедуры приводится на рисунке 1.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Чтобы продемонстрировать эффект ингибирования анти MALAT1 gapmer ДНК в мм, мы постучал вниз выражение MALAT1 и использовал его в H929 и MM.1S клеток. Сорок восемь часов спустя, клетки были собраны для анализа эффективности нокдауна и статус апоптоз в клетках transfected с анти MALAT1 gapmer или управления ДНК. qRT ПЦР результаты показали, что анти MALAT1 gapmer ДНК, сбил MALAT1 выражение в H929 и MM.1S клетки эффективно (рисA). Статус апоптоз...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Доказательств показал, что lncRNAs принимают участие в регуляции многочисленных физиологические и патофизиологические процедур в раках, включая мм7,8,9; они имеют потенциал, чтобы быть направлены для лечения рака, которые могут быть реализованы путем антисмысловых олигонуклеотидов20,21,22. США продовольствия и медикаментов (FDA) одобрил...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют ничего сообщать.

Благодарности

Авторы благодарят proteomic Лернер научно-исследовательский институт, геномные и изображений ядра за их помощь и поддержку. Финансирование: Эта работа была финансовой поддержке гранта NIH/NCI R00 CA172292 (для J.J.Z.) и начальных средств (для J.J.Z.) и клинические и поступательного науки совместных (АОЗТ) дело Вестерн Резерв университета Core использования пилот гранта (J.J.Z.). Эта работа использовали Конфокальный микроскоп Leica SP8, который был приобретен с финансирования из национальных институтов здравоохранения SIG Грант 1S10OD019972-01.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Одностенные углеродные нанотрубкиMillipore-Sigma704113
DSPE-PEG2000-AmineAvanti Polar Lipids880128
ванна ультразвуковой аппаратVWR97043-992
Центробежный фильтр объемом 4 млMillipore-SigmaZ740208-8EA
УФ/ВИС спектрометрThermo Fisher ScientificaccuSkan GO УФ/вид микропланшетный спектрофотометркоэффициент экстинкции 0,0465 л/мг/см при длине волны 808 нм
Sulfo-LC-SPDPProteoChemc1118
DTT растворMillipore-Sigma43815
NAP-5 колонкаGE Healthcare17-0853-01
in vivo система визуализацииPerkinElmer
NOD. CB17-Prkdcscid/J мышиCharles River lab250
Проточный цитометрBecton Dickinso
LipofectamineInvitrogen11668019Lipofectamine 2000
Фетальная бычья сыворотка (FBS)Invitrogen10437-028
RMPI-1640 mediumInvitrogen11875-093
MALAT1-QF:синтезировано методом IDT Компания5'- GTTCTGATCCCGCTGCTATT - 3'
MALAT1-QR:синтезирован компанией IDT 5'- TCCTCAACACTCAGCCTTTATC - 3'
GAPDH-QF:синтезировано компанией IDT 5'- CAAGAGCAAGAGGAGAG - 3'
GAPDH-QR:синтезировано компанией IDT 5'- CTACATGGCAACTGTGAGGAG - 3'
Количественная ПЦР с использованием мастер-смеси SYBR Green PCRThermo Fisher ScientificA25780
RevertAid первого стенда набор для синтеза кДНКThermo Fisher ScientificK1621
anti-MALAT1синтезирован компанией IDT 5'-mC*mG*mA*mA*mA*C*A*T*T
*G*G*C*A*C*A*mC*mA*mG*mC*mA-3'
Набор для анализа жизнеспособности клетокPromega CorporationG7570CellTiter-GloЛюминесцентный Набор для анализа жизнеспособности клеток
accuSkan GO UV/Vis Микропланшетный спектрофотометрThermo Fisher Научный
центробежный фильтрMillipore-SigmaUFC910008
программное обеспечение SPSSверсия IBM 24.0
D-люциферинMillipore-SigmaЛ9504

Ссылки

  1. Jiang, X., et al. RNase non-sensitive and endocytosis independent siRNA delivery system: delivery of siRNA into tumor cells and high efficiency induction of apoptosis. Nanoscale. 5 (16), 7256-7264 (2013).
  2. Murakami, T., et al. Water-dispersed single-wall carbon nanohorns as drug carriers for local cancer chemotherapy. Nanomedicine (Lond). 3 (4), 453-463 (2008).
  3. Kam, N. W., Dai, H. Carbon nanotubes as intracellular protein transporters: generality and biological functionality. Journal of the American Chemical Society. 127 (16), 6021-6026 (2005).
  4. Kam, N. W., Liu, Z., Dai, H. Functionalization of carbon nanotubes via. cleavable disulfide bonds for efficient intracellular delivery of siRNA and potent gene silencing. Journal of the American Chemical Society. 127 (36), 12492-12493 (2005).
  5. Kam, N. W., Liu, Z., Dai, H. Carbon nanotubes as intracellular transporters for proteins and DNA: an investigation of the uptake mechanism and pathway. Angewandte Chemie International Edition in English. 45 (4), 577-581 (2006).
  6. Ntziachristos, P., Abdel-Wahab, O., Aifantis, I. Emerging concepts of epigenetic dysregulation in hematological malignancies. Nature Immunology. 17 (9), 1016-1024 (2016).
  7. Evans, J. R., Feng, F. Y., Chinnaiyan, A. M. The bright side of dark matter: lncRNAs in cancer. Journal of Clinical Investigation. 126 (8), 2775-2782 (2016).
  8. Ronchetti, D., et al. Distinct lncRNA transcriptional fingerprints characterize progressive stages of multiple myeloma. Oncotarget. 7 (12), 14814-14830 (2016).
  9. Wong, K. Y., et al. Epigenetic silencing of a long non-coding RNA KIAA0495 in multiple myeloma. Molecular Cancer. 14, 175(2015).
  10. Schmidt, L. H., et al. The long noncoding MALAT-1 RNA indicates a poor prognosis in non-small cell lung cancer and induces migration and tumor growth. Journal of Thoracic Oncology. 6 (12), 1984-1992 (2011).
  11. Ji, P., et al. MALAT-1, a novel noncoding RNA, and thymosin beta4 predict metastasis and survival in early-stage non-small cell lung cancer. Oncogene. 22 (39), 8031-8041 (2003).
  12. Luo, J. H., et al. Transcriptomic and genomic analysis of human hepatocellular carcinomas and hepatoblastomas. Hepatology. 44 (4), 1012-1024 (2006).
  13. Guffanti, A., et al. A transcriptional sketch of a primary human breast cancer by 454 deep sequencing. BMC Genomics. 10, 163(2009).
  14. Cho, S. F., et al. MALAT1 long non-coding RNA is overexpressed in multiple myeloma and may serve as a marker to predict disease progression. BMC Cancer. 14, 809(2014).
  15. Handa, H., et al. Long non-coding RNA MALAT1 is an inducible stress response gene associated with extramedullary spread and poor prognosis of multiple myeloma. British Journal of Haematology. 179 (3), 449-460 (2017).
  16. Hu, Y., et al. Targeting the MALAT1/PARP1/LIG3 complex induces DNA damage and apoptosis in multiple myeloma. Leukemia. , (2018).
  17. Lennox, K. A., Behlke, M. A. Cellular localization of long non-coding RNAs affects silencing by RNAi more than by antisense oligonucleotides. Nucleic Acids Research. 44 (2), 863-877 (2016).
  18. Kam, N. W., O'Connell, M., Wisdom, J. A., Dai, H. Carbon nanotubes as multifunctional biological transporters and near-infrared agents for selective cancer cell destruction. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 102 (33), 11600-11605 (2005).
  19. Zeineldin, R., Al-Haik, M., Hudson, L. G. Role of polyethylene glycol integrity in specific receptor targeting of carbon nanotubes to cancer cells. Nano Letters. 9 (2), 751-757 (2009).
  20. Amodio, N., D'Aquila, P., Passarino, G., Tassone, P., Bellizzi, D. Epigenetic modifications in multiple myeloma: recent advances on the role of DNA and histone methylation. Expert Opinion on Therapeutic Targets. 21 (1), 91-101 (2017).
  21. Ahmad, N., Haider, S., Jagannathan, S., Anaissie, E., Driscoll, J. J. MicroRNA theragnostics for the clinical management of multiple myeloma. Leukemia. 28 (4), 732-738 (2014).
  22. Amodio, N., et al. Drugging the lncRNA MALAT1 via. LNA gapmeR ASO inhibits gene expression of proteasome subunits and triggers anti-multiple myeloma activity. Leukemia. , (2018).
  23. Highleyman, L. FDA approves fomivirsen, famciclovir, and Thalidomide. Food and Drug Administration. BETA. 5, (1998).
  24. Smith, R. J., Hiatt, W. R. Two new drugs for homozygous familial hypercholesterolemia: managing benefits and risks in a rare disorder. JAMA Internal Medicine. 173 (16), 1491-1492 (2013).
  25. Aartsma-Rus, A. FDA Approval of Nusinersen for Spinal Muscular Atrophy Makes 2016 the Year of Splice Modulating Oligonucleotides. Nucleic Acid Therapeutics. 27 (2), 67-69 (2017).
  26. Nelson, S. F., Miceli, M. C. FDA Approval of Eteplirsen for Muscular Dystrophy. The Journal of the American Medical Association. 317 (14), 1480(2017).
  27. Liu, Z., Sun, X., Nakayama-Ratchford, N., Dai, H. Supramolecular chemistry on water-soluble carbon nanotubes for drug loading and delivery. American Chemical Society Nano. 1 (1), 50-56 (2007).
  28. Ali-Boucetta, H., et al. Multiwalled carbon nanotube-doxorubicin supramolecular complexes for cancer therapeutics. Chemical communications (Cambridge). (4), 459-461 (2008).
  29. Bianco, A., Kostarelos, K., Partidos, C. D., Prato, M. Biomedical applications of functionalised carbon nanotubes. Chemical communications. (5), Cambridge. 571-577 (2005).
  30. Hadidi, N., Kobarfard, F., Nafissi-Varcheh, N., Aboofazeli, R. Optimization of single-walled carbon nanotube solubility by noncovalent PEGylation using experimental design methods. International Journal of Nanomedicine. 6, 737-746 (2011).
  31. Padilla-Parra, S., et al. Quantitative imaging of endosome acidification and single retrovirus fusion with distinct pools of early endosomes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109 (43), 17627-17632 (2012).
  32. Wu, H., Zhu, L., Torchilin, V. P. pH-sensitive poly(histidine)-PEG/DSPE-PEG co-polymer micelles for cytosolic drug delivery. Biomaterials. 34 (4), 1213-1222 (2013).
  33. Oishi, M., Nagatsugi, F., Sasaki, S., Nagasaki, Y., Kataoka, K. Smart polyion complex micelles for targeted intracellular delivery of PEGylated antisense oligonucleotides containing acid-labile linkages. Chembiochem. 6 (4), 718-725 (2005).
  34. Dong, H., Ding, L., Yan, F., Ji, H., Ju, H. The use of polyethylenimine-grafted graphene nanoribbon for cellular delivery of locked nucleic acid modified molecular beacon for recognition of microRNA. Biomaterials. 32 (15), 3875-3882 (2011).
  35. Arunachalam, B., Phan, U. T., Geuze, H. J., Cresswell, P. Enzymatic reduction of disulfide bonds in lysosomes: characterization of a gamma-interferon-inducible lysosomal thiol reductase (GILT). Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 97 (2), 745-750 (2000).
  36. Lelimousin, M., Sansom, M. S. Membrane perturbation by carbon nanotube insertion: pathways to internalization. Small. 9 (21), 3639-3646 (2013).
  37. Thomas, M., Enciso, M., Hilder, T. A. Insertion mechanism and stability of boron nitride nanotubes in lipid bilayers. J Phys Chem B. 119 (15), 4929-4936 (2015).
  38. Jin, H., Heller, D. A., Strano, M. S. Single-particle tracking of endocytosis and exocytosis of single-walled carbon nanotubes in NIH-3T3 cells. Nano Letters. 8 (6), 1577-1585 (2008).
  39. Jin, H., Heller, D. A., Sharma, R., Strano, M. S. Size-dependent cellular uptake and expulsion of single-walled carbon nanotubes: single particle tracking and a generic uptake model for nanoparticles. American Chemical Society Nano. 3 (1), 149-158 (2009).
  40. Ruggiero, A., et al. Paradoxical glomerular filtration of carbon nanotubes. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (27), 12369-12374 (2010).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

MALAT1
Подавление роста клетки множественной миеломы в Vivo, одностенные углеродные нанотрубки (ОУНТ)-доставлены антисмысловых Oligos MALAT1
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.