Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Трипептид стабилизированный Nanoemulsion олеиновой кислоты

8.6K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/59034

⸱

27 февраля 2019 г.

 ,  ,  ,  , 
1Department of Chemistry, Brooklyn College, The City University of New York, 2Ph.D. Program in Chemistry, The Graduate Center of The City University of New York, 3Ph.D. Program in Biochemistry, The Graduate Center of The City University of New York, 4Department of Genetics and Genomic Sciences, Icahn School of Medicine at Mount Sinai, 5Women's Health Research Institute, Icahn School of Medicine at Mount Sinai, 6Laboratory for Translational Research, Western Connecticut Health Network

В этой статье

Краткое содержание

Этот протокол описывает эффективный метод синтеза nanoemulsion олеиновая acids-platinum(II) конъюгата, стабилизировалось с трипептид лизин тирозин фенилаланин (KYF). Nanoemulsion формы умеренный синтетических условиях через самостоятельной сборки KYF и сопряженное.

Аннотация

Мы опишем способ получения nanoemulsion, состоящий из олеиновая acids-Pt(II) ядро и покрытие лизин тирозин фенилаланин (KYF) (KYF-Pt-NE). KYF-Pt-NE инкапсулирует Pt(II) на 10% веса, имеет диаметр 107 Нм ± 27 и отрицательный заряд поверхности. KYF-Pt-NE стабилен в воде и в сыворотке крови и биологически активен. Спряжение Флюорофор к KYF позволяет синтеза люминесцентных nanoemulsion, которая подходит для биологической обработки изображений. Синтез nanoemulsion проводится в водной среде и KYF-Pt-NE форм через самосборки коротких пептида KYF и олеиновая acids-platinum(II) конъюгата. Самостоятельной сборки процесс зависит от температуры раствора, молярное соотношение субстратов и скорость потока добавления субстрата. Важнейшие шаги включают поддержание оптимальной скорости перемешивания во время синтеза, разрешительные достаточное время для самостоятельной сборки и предварительно сконцентрировав nanoemulsion постепенно в центробежных концентратор.

Введение

В последние годы наблюдается растущий интерес к инженерии наночастицы для таких биомедицинских приложений как поставки наркотиков и bioimaging1,2,3,4. Многофункциональность систем на основе наночастиц часто обусловливает необходимость включения нескольких компонентов в рамках одной разработке. Строительные блоки, которые часто основаны на липиды или полимеры отличаются с точки зрения их физико-химических свойств, а также их биосовместимости и способность к биологическому разложению, которое в конечном итоге может повлиять на функции наноструктурированных1, 5,6. Биоселективного материалы, такие как белки и пептиды, давно были признаны перспективным компоненты многофункциональных наноструктур из-за их гибкость последовательности7,8. Пептиды, самостоятельно собрать в весьма упорядоченный супрамолекулярные архитектуры, образуя цилиндрические лентами9,10, волокнистых подмостей11,12и многие другие, проложив тем самым путь к зданию снизу вверх наноструктур на основе биомолекулы гибридный подход к13.

Пептиды были изучены для приложений в области медицины и биотехнологии, особенно для противоопухолевой терапии14 и сердечно-сосудистых заболеваний15 а что касается антибиотик развития16,17, метаболический расстройства18и инфекции19. Существует более сотни малых пептид терапевтов проходят клинические испытания20. Пептиды легко изменить и быстро, чтобы синтезировать при низких затратах. Кроме того они являются биологически, что значительно облегчает их биологических и фармацевтических приложения21,22. Использование пептидов как структурных компонентов включает в себя техники реагировать, на основе пептида наночастиц и складов Гидрогель для контролируемого высвобождения23,24,25,26 , 27, биосенсоры на основе пептида28,,2930,31или био электронных устройств32,,3334. Важно отметить, что даже короткие пептиды с двумя или тремя аминокислотных остатков, которые включают фенилаланина были найдены для самостоятельной сборки процессов35,,3637 и создавать стабилизированные эмульсии38 .

Препараты на основе платины, ввиду их высокой эффективности, используются в многих схем лечения рака, как самостоятельно, так и в сочетании с другими агентами39,40. Платиновый соединений вызвать повреждение ДНК, образуя monoadducts и intrastrand или interstrand перекрестные ссылки. Pt-ДНК поражения распознаются клеточными и, если не отремонтированы, привести к сотовой апоптоз. Наиболее важный механизм, по которому Pt(II) способствует гибели клеток рака, является ингибирование транскрипции ДНК41,42. Однако преимущества платиновой терапии уменьшаются по системной токсичности Pt(II), что вызывает серьезные побочные эффекты. Это приводит к нижней клинических дозирование Pt(II)43, которая часто приводит к югу терапевтические концентрации платины, достигнув ДНК. Как следствие репарации ДНК, который следует способствует выживание клетки рака и приобретения Pt(II) сопротивления. Платиновый химио сопротивление является серьезной проблемой в противоопухолевой терапии и основной причиной неудачи лечения44,45.

Мы разработали стабильной наносистем, инкапсулирующий агент Pt(II) для того чтобы обеспечить защитный эффект в кровообращения и уменьшить побочные эффекты Pt II-индуцированной. Система основана на ядре олеиновая acids-Pt(II) стабилизированы с KYF трипептид сформировать nanoemulsion (KYF-Pt-NE)46. Строительные блоки KYF-Pt-NE, аминокислоты, трипептид, так и олеиновой кислоты, имеют статус обычно признается как безопасное (GRAS) с продуктами питания и лекарствами (FDA). KYF-Pt-NE готовится с помощью метода nanoprecipitation47. Короче говоря олеиновая acids-Pt(II) конъюгата растворяется в органических растворителях и затем добавлены каплям водный раствор KYF (рис. 1) при 37 ° C. Раствор перемешивали за несколько часов, чтобы позволить самостоятельной сборки из KYF-Pt-NE. Nanoemulsion в основном в 10 кДа Центробежные концентраторы и три раза промывают водой. Химическая модификация KYF с Флюорофор позволяет синтеза люминесцентных FITC-KYF-Pt-NE для биомедицинских изображений.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

1. синтез конъюгата олеиновая Acids–Platinum(II)

  1. Активация цисплатин
    1. Приостановить 50 мг (0,167 ммоль) цисплатина в 4 мл воды (например, nanopure) при температуре 60 ° C.
    2. Добавить прикапывают 55.2 mg (0.325 ммоль) AgNO3 в 0,5 мл воды в раствор цисплатина и перемешать реакции для по крайней мере 2 часа при температуре 60 ° C. Белый преципитат AgCl сформирует, указывающее ход реакции.
    3. Чтобы определить, завершилась ли реакции активации, выполнить тест с 10% HCl на наличие свободных ионов Ag+ в растворе. Тест должен быть отрицательным (без дополнительных AgCl осадок должен форма).
    4. Центрифуга реакционную смесь на 3220 x g 10 мин и удалить Белый преципитат AgCl.
    5. Собирать супернатант и фильтровать его через фильтр шприц 0,2 мм. Тестирование супернатант наличие платины, применяя 2-3 капли раствора через пипетку Pasteur SnCl2 кристаллов. Тест является положительным, если цвет координат комплекса олова с платиновым темно желто оранжевый.
    6. Используйте супернатант с активированной Pt(II) на втором шаге.
  2. Реакция олеиновой кислоты с активированной Pt(II)
    1. Приостановить 94,2 мг олеиновой кислоты (0.333 ммоль) в 3 мл воды при температуре 60 ° C.
    2. Добавить 13.3 мг (0.333 ммоль) NaOH в 1 мл воды и смешивают с раствором активированного Pt(II) из шага 1.1
    3. Перемешайте реакции на 2 ч при температуре 60 ° C и далее при комнатной температуре на ночь. Сырой продукт является жирной желто коричневый осадок.
    4. Центрифуга реакционную смесь на 3220 x g 10 мин и удалить супернатант. Сухие сырой продукт при 25 ° C, с помощью роторный испаритель. Очищайте продукт путем многократной стирке с ацетонитриле. Окончательный цвет чистого олеиновая acids–Pt(II) конъюгата — бледно-желтый.

2. синтез KYF-Pt-NE и FITC-меченых Nanoemulsion FITC-KYF-Pt-NE

  1. Синтез KYF трипептид и дневно обозначенные трипептид FITC-KYF
    1. Синтезировать KYF с помощью стандартных твердотельных пептидной химии. Использовать следующие стандартные муфты условий для присоединения каждой аминокислоты: Ван смолы (2.19 ммоль), защищены Fmoc аминокислота (4.38 ммоль), 2-(1H-Benzotriazole-1-yl)-1,1,3,3-tetramethylaminium Тетрафтороборат (TBTU) (4.38 ммоль) и diisopropylethylamine (DIPEA) (8.76 ммоль). Распустить аминокислоты с TBTU в диметилформамиде (DMF) и DIPEA.
    2. Замочите 5.7 g Fmoc-L-пе 4-alkoxybenzyl спирт смолы (0,382 мг-экв/г) в 25 мл ДМФ за 1 ч до использования.
    3. Deprotect аминовая группа L-фенилаланина аминокислоты с 15 мл 20% раствора пиперидина/DMF для 5 мин, отказаться от растворителя и повторите мыть с циклом 20 мин.
    4. Вымойте смолы для 1 мин с следующие растворители: ДМФ, изопропиловый спирт (IPA), ДМФ, IPA, ДМФ, IPA, ДМФ, ДМФ. Отказаться от растворителя после каждой стирки.
    5. Кайзер тест для определения наличия свободной NH2 группы на смолае (см. подэтапы) и если положительный (смола семян фиолетовый), добавить Fmoc-L-тирозин аминокислоты и выполнять муфту на ночь.
      1. Подготовьте Кайзер тест решений в отдельных бутылок.
      2. Растворяют 5 g Нингидрин в 100 мл этанола.
      3. Растворите 80 г фенола в 20 мл этанола.
      4. Смешать 2 мл 0,001 М водный раствор цианистого калия с
        98 мл пиридина.
      5. Добавьте 2-3 капли каждого Кайзер тестов решения для образца и тепла в кипящую воду на 5 мин.
    6. После успешного соединения второй аминокислоты, выполнить тест Кайзер и если отрицательный приступить к deprotection протоколу (шаги 2.1.3 до 2.1.5). Повторите процесс с Fmoc фенилаланина аминокислоты.
      1. После соединения всех аминокислот, мыть смолы для 1 мин с 5 мл ДМФ, IPA, ДМФ, метанол, дихлорметана и диэтиловом эфире, после каждого мытья отказаться от растворителя. Сохраните смолы для дальнейшей обработки.
      2. Для изменения пептид с FITC, используйте половину смолы для последующих шагов (2.1.7-2.1.9). Для получения неизмененным KYF трипептид, следуйте процедуре, начиная 2.1.10.
    7. Измените N-терминальный аминокислоты KYF3 KYF-N с 6-azidohexanoic кислота. С этой целью смешайте 1 g (0,382 ммоль) Ван KYF смолы и 120,1 мг (0.764 ммоль) 6-azidohexanoic кислоты с 245.2 мг (0.764 ммоль) TBTU и 197.1 мг DIPEA в 30 мл DMF (1.528 ммоль). Перемешайте реакции на ночь при комнатной температуре.
    8. Получите KYF-FITC синтез KYF-N3 с Пропаргиловый флуоресцеин через реакцию нажмите. С этой целью смешивают 253 мг (0,097 ммоль) KYF-N3 Ван смолы с 3.78 мг (0,019 ммоль) Цуй твердых, 71.9 мг (0,193 ммоль) флуоресцеин Пропаргиловый и 2,24 мг (0,017 ммоль) DIPEA. Реакция должна изменить цвет от зеленого до коричневого.
    9. После 24 часов мыть смолы 1 мин попеременно с 5 мл DMF и IPA пять раз, метанола и воды трижды, DMF и воды трижды и дихлорметана и диэтиловый эфир трижды. Отказаться от растворителя после каждой стирки.
    10. Рассекающий удар KYF-FITC или KYF пептид из смолы с раствором trifluoroacetic кислоты (ТФК) / triisopropylsilane (советы) / h2O на соотношение 95/2.5/2.5 более 3 часов.
    11. Осадок сырой пептида в холодной диэтиловым эфиром, промыть трижды с холодной эфира, а затем сухой под вакуумом.
  2. Синтез FITC-KYF-стабилизированный nanoemulsion с Pt(II) (FITC-KYF-Pt-NE) и KYF-Pt-NE
    1. Растворите 10 мг (0.0126 ммоль) конъюгата олеиновая acids–Pt(II) в 1,5 мл изопропанола и место в шприц 5 мл.
    2. Шприц с пероксидазой олеиновая acids–Pt(II) в шприцевой насос и задать направление в 0,1 мл/мин.
    3. Для того, чтобы синтезировать FITC-KYF-Pt-NE, растворить 1 мг (0,00105 ммоль) FITC-KYF и 1 мг (0.00219 ммоль) KYF (1:2 молярное соотношение FITC-KYF:KYF) в 20 мл воды и отрегулировать температуру раствора до 37 ° C. Покрывают стены контейнера с алюминиевой фольгой, чтобы избежать Фотообесцвечивание Флюорофор FITC. Синтезировать KYF-Pt-NE, Растворите 2 мг (0,0044 ммоль) из KYF трипептид в 20 мл воды и отрегулировать температуру раствора до 37 ° C.
    4. Добавьте олеиновая acids–Pt(II) конъюгата каплям решение трипептид FITC-KYF/KYF или KYF. Выполните этот шаг под капотом.
    5. Перемешать раствор на ночь при комнатной температуре испарения органических растворителей и позволить самостоятельной сборки из FITC-KYF-Pt-NE или KYF-Pt-NE.
    6. Концентрат FITC-KYF-Pt-NE или KYF-Pt-NE в центробежных концентратор (10k MWCO) и промыть трижды с 4 мл nanopure воды.
    7. Хранить водных растворов KYF-Pt-NE и FITC-KYF-Pt-NE при 4 ° C.
    8. Анализ платины содержимого с помощью атомно-абсорбционной спектроскопии (AAS), после производителя руководство48.
      1. Подготовить Платиновый стандартов в 10% HCl решение для калибровочной кривой (эффективный диапазон для ААС составляет от 100 до 1200 мкг/кг (частей на миллиард)).
      2. Растворяют 50 мкл раствора KYF-Pt-NE от шаг 2,2 в 100 мкл aqua regia (смесь 3:1 концентрированной соляной кислоты и азотная кислота) и оставить на ночь при комнатной температуре. 850 мкл воды для достижения окончательной выборки объемом 1 мл. Анализ образца с помощью ААС. Конечная концентрация кислоты должна быть 10% во всех проанализированных пробах.
      3. Запись чтение Pt концентрации в ppb и вычислить окончательное содержание платины в образце (счет для разбавления образца и первоначальный объем nanoemulsion).

3. конфокальная томография клеточного поглощения FITC-KYF-Pt-NE

  1. Семя 6 линий клеток рака яичников (A2780, CP70, SKOV3, OV90, TOV21G и ES2), в 4 хорошо камеры конфокальные блюда на плотность 4,7 х 104 клетки на камеру и предварительно культура на ночь при 37 ° C.
  2. После 24 ч, вымыть клетки трижды с фосфатный буфер (PBS) и проинкубируйте с FITC-KYF-Pt-NE в среде культуры клеток (см. шаг 6.1 для клеток линии конкретных деталей) для 15 мин при температуре 37 ° C.
  3. После инкубации удалите средства массовой информации и вымыть клетки три раза с PBS.
  4. Исправьте клетки с холодной метанола для 5 мин при 20 ° C и стирать три раза с 1 мл раствора PBS.
  5. Разрушения клеток в 1 мл 0,1% тритон-X 10 мин при комнатной температуре и мыть три раза с 1 мл ФСБ.
  6. Проинкубируйте клетки для 90 минут с LAMP1 антитело проспряганное с Alexa Fluor 647 (1 мл) в 1:50 разрежения в PBS при комнатной температуре. Далее Вымойте клетки 3 раза с PBS.
  7. Разбавьте DAPI Стоковый раствор (1 мг/мл) до 1 мг/мл в PBS. Затем добавить 1 мл разбавленного раствора в каждой камере и Инкубируйте 15 мин при комнатной температуре. Вымойте клетки 3 раза с PBS.
  8. Гора coverslips на слайде с помощью установки среды.
  9. Изображение клетки, с использованием живой клетки конфокального микроскопа в возбуждения волны 405 нм, 488 нм и 633 нм. Установите параметры обнаружения как следовать: мощности лазера от 0,2% и не более 1%, Pinole 1 воздушные подразделения, получить мастер 650-750, цифровой смещение 0.
  10. Открыть изображение в визуализации программного обеспечения. Изображение выберите графика и выберите Вставить линейку, чтобы вставить панель масштаб изображения.

4. препарат выпуска исследования

  1. Провести исследования выпуск препарата в PBS. Отрегулируйте значения рН три PBS буферов до 7,4, 6,8 и 5.0 соответственно.
  2. Разбавить 5 мкл KYF-Pt-NE в 180 мкл буфера PBS соответствующие рН, передача 3,5 кДа MWCO мини-диализа Кубок и инкубировать при 37 ° C в PBS.
  3. Удаление буфера из каждого три мини-диализа трубы в 2, 4, 6, 24, 48 и 140 h и измерять концентрации Платиновый ААС. Подготовить все образцы согласно шаг 2.2.8 но окончательного громкость образца до 500 мкл.

5. клетки культуры методы

  1. Культура клеток линии A2780, CP70, SKOV-3, OV-90, ООО - 21G, ES-2 в ячейку культуры среднего (DMEM) дополнены с 10% (A2780, CP70, SKOV-3, ES-2) или с 15% (ООО - 21G, OV-90) плода бычьим сывороточным (ФБС), с L-глютамина и пенициллин/стрептомицина. Расти все клетки в 5% CO2, насыщенная атмосфера воды при 37 ° C.
  2. Семенной 3 x 105 клеток в каждом 96-луночных пластины и предварительно культуры на ночь для экспериментов в пробирке инкубации. Подготовьте KYF-Pt-NE, цисплатина и карбоплатин решения в воде. Регулировка концентрации Pt(II) в KYF-Pt-NE соответствует концентрации карбоплатин и цисплатин для каждой ячейки строки. Инкубируйте 72 часов при 37 ° C.
  3. После инкубации оцените клеточной жизнеспособности, с использованием колориметрического анализа (assay пролиферации клеток МТТ). Вкратце удалите среды и добавьте 110 мкл 10% МТТ в среде каждому хорошо и проинкубируйте втечение 2 ч при 37 ° C. Затем добавьте 100 мкл моющего средства в каждой скважине и проинкубируйте втечение 5 ч при 37 ° C.
  4. Проверьте поглощения в 570 Нм с помощью пластины читателя. Анализировать результаты статистического анализа с помощью Z-тест и P-тест.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Представитель ТЕА изображение KYF-Pt-NE приготовленные этот протокол будет показано на рисунке 2A. KYF-Pt-нес сферических в морфологии, хорошо рассеяны и одинаковыми по размеру. Диаметр сердечника KYF-Pt-нес, измеряется непосредственно из трех изображений ТЕА с минимум 200 измерений, — 107 Нм ± 27. Гидродинамические диаметр KYF-Pt-NE, анализируются с помощью динамического света спектроскопии (DLS), было установлено 240 Нм с индексом полиизопрена 0,156. Потенц...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Важнейшие шаги в синтезе nanoemulsion включают корректировки молярное соотношение субстратов, контроль температуры и потока скорость во время добавления олеиновая acids–Pt(II), предоставляя достаточное время для самостоятельной сборки и очистки продукта с помощью Центробежный концентратор столбец. Эти параметры влияют на размер и морфология KYF-Pt-NE; Таким образом это особенно важно для поддержания надлежащего молярное соотношение и правильно настроить синтетических условий.

Отношение подложе...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют конфликт интересов раскрыть.

Благодарности

Мы с благодарностью признаем финансовой поддержке Национального института рака, Грант SC2CA206194. Объявляются не конкурирующих финансовых интересов.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
2-(1H-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилуроний
тетрафторборат (ТБТУ)		ANASPEC INC.:AS-20376SPPS
4-луночная камерная конфокальная тарелкаLab-Tek II, Thermo Fisher Scientific154526Для визуализации
6-бромгексановой кислотыChem-Impex INT' L INC.24477Клик модификация для пептида
A2780Любезно предоставлено профессором Джоном Мартинетти из больницы Маунт-СинайКлеточная линия рака яичников
Barnstead NanopureThermo FisherD11901система фильтрации воды
BUCHI rotavapor R-3BuchiZ568090Для удаления растворителей и сушки образцов
Центрифуга 5810 Reppendorf5811FДля разделения платинового комплекса
Цис-дихлордиаминплатина (II) 99%Acros Organics19376-0050in vitro тесты
CP70Любезно предоставлено профессором Джоном Мартинетти из больницы Маунт-СинайКлеточная линия рака яичников
Цифровая водяная баняVWR97025-134Для разогрева среды для клеточной культуры
Динамическое рассеяние света (DLS)Brookhaven Instrument CorporationДля измерения размера наночастиц
ES-2ATCCCRL-1978клеточная линия рака яичников
Fmoc-L-Lys(Boc)-OH 99,79%Chem-Impex INT' L INC.00493SPPS
Fmoc-L-Phe смола 4-алкоксибензиловая спиртовая смола (0,382 мг-кв/г),Chem-Impex INT' L INC.01914SPPS
Fmoc-LTyr(tBu)-OH 98%Alfa AesarH59730SPPS
HERACELL 150i CO2-инкубаторThermo Scientific Fisher
Шприцевой насос высокого давленияNew Era1010-USДля добавления платинового комплекса при синтезе наночастиц
Горячая пластина/мешалкаVWR12365-382Для перемешивания и нагрева образцов
Антитело LAMP-1 (сопряжено с Alexa Fluor 647)Santa Cruz Biotechnologysc-18821 AF647Для визуализации
N,N-диизопропилэтиламина (DIPEA)Oakwood Chemical005027SPPS
Ninhydrin 99%Alfa Aesar Aesar A10409Kaiser test
Oleиновая кислотаChem-Impex INT' L INC.01421Для синтеза платинового комплекса
OV90ATCCCRL-11732Клеточная линия рака яичников
PBSCorning21-031-CVДля промывки клеток
Permount монтажная средаFisher ChemicalSP15-100Для визуализации
фенолаFisher ChemicalA92500Тест Кайзера
Фосфовольмовая кислотаFisher ChemicalA248-25отрицательное окрашивание для TEM
Piperidine 99%BTC219260-2.5L
SPPS Platinum AAS standardsoultion Alfa Aesar880861000мкг/мл для калибровочной кривой
Пропаргил бромид 97%Alfa AesarL10595Для алкиновой модификации флуоресцеина
Научный биологический кабинетThermo Scientific Fisher1385Bio-hood для клеточных культур
Самоочищающаяся вакуумная системаWelch2028Вакуумный насос для ротапара
Нитрат серебраAcros Organics19768-0250Активация цисплатина
SKOV3ATCCHTB-77Клеточная линия рака яичников
Гидроксид натрияFisher ScientificS313-1Для синтеза платинового комплекса
Олово (II) хлоридSigma Aldrich208256Тест на наличие платины
TOV21GATCCCRL-11730Клеточная линия рака яичников
Трифторуксусная кислота 99% (TFA)Alfa AesarL06374SPPS
Триизопропилсилан (TIPS)Chem-Impex INT' L INC.01966SPPS
Triton-XSigma AldrichT8787-100MLДля визуализации
порошка уранина 40%Fisher ScientificS25328AДля алкиновой модификации флуоресцеина
Vivaspin 20 (10000 MWCO)SartoriousVS2001Для промывки наночастиц и конденсации
VWR Инвертированный микроскоп VWR89404-462Для мониторинга клеточных культур

Ссылки

  1. Agrahari, V., Agrahari, V., Mitra, A. K. Nanocarrier fabrication and macromolecule drug delivery: challenges and opportunities. Therapeutic Delivery. 7 (4), 257-278 (2016).
  2. Anselmo, A. C., Mitragotri, S. Nanoparticles in the clinic. Bioengineering & Translational Medicine. 1 (1), 10-29 (2016).
  3. Peer, D., Karp, J. M., Hong, S., Farokhzad, O. C., Margalit, R., Langer, R. Nanocarriers as an emerging platform for cancer therapy. Nature Nanotechnology. 2 (12), 751-760 (2007).
  4. Roy Chowdhury, M., Schumann, C., Bhakta-Guha, D., Guha, G. Cancer nanotheranostics: Strategies, promises and impediments. Biomedicine & Pharmacotherapy. 84, 291-304 (2016).
  5. Jeevanandam, J., Chan, Y. S., Danquah, M. K. Nano-formulations of drugs: Recent developments, impact and challenges. Biochimie. , 99-112 (2016).
  6. Meerum Terwogt, J. M., Groenewegen, G., Pluim, D., Maliepaard, M., Tibben, M. M., Huisman, A., ten Bokkel Huinink, W. W., Schot, M., Welbank, H., Voest, E. E., Beijnen, J. H., Schellens, J. M. Phase I and pharmacokinetic study of SPI-77, a liposomal encapsulated dosage form of cisplatin. Cancer Chemotherapy and Pharmacology. 49 (3), 201-210 (2002).
  7. Fan, Z., Sun, L., Huang, Y., Wang, Y., Zhang, M. Bioinspired fluorescent dipeptide nanoparticles for targeted cancer cell imaging and real-time monitoring of drug release. Nature Nanotechnology. 11 (4), 388-394 (2016).
  8. Jeong, Y., et al. Enzymatically degradable temperature-sensitive polypeptide as a new in-situ gelling biomaterial. Journal of Controlled Release. 137 (1), 25-30 (2009).
  9. Uesaka, A., et al. Morphology control between twisted ribbon, helical ribbon, and nanotube self-assemblies with his-containing helical peptides in response to pH change. Langmuir. 30 (4), 1022-1028 (2014).
  10. Hwang, W., Marini, D. M., Kamm, R. D., Zhang, S. Supramolecular structure of helical ribbons self-assembled from a B-sheet peptide. Journal of Chemical Physics. 118 (1), 389-397 (2003).
  11. Svobodova, J., et al. Poly(amino acid)-based fibrous scaffolds modified with surface-pendant peptides for cartilage tissue engineering. Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 11 (3), 831-842 (2017).
  12. Kumar, V. A., et al. Highly angiogenic peptide nanofibers. ACS Nano. 9 (1), 860-868 (2015).
  13. Romera, D., Couleaud, P., Mejias, S. H., Aires, A., Cortajarena, A. L. Biomolecular templating of functional hybrid nanostructures using repeat protein scaffolds. Biochemical Society Transactions. 43 (5), 825-831 (2015).
  14. Medina, S. H., Schneider, J. P. Cancer cell surface induced peptide folding allows intracellular translocation of drug. Journal of Controlled Release. 209, 317-326 (2015).
  15. Recio, C., Maione, F., Iqbal, A. J., Mascolo, N., De Feo, V. The Potential Therapeutic Application of Peptides and Peptidomimetics in Cardiovascular Disease. Frontiers in Pharmacology. 7, 526(2016).
  16. McCarthy, K. A., et al. Phage Display of Dynamic Covalent Binding Motifs Enables Facile Development of Targeted Antibiotics. Journal of the American Chemical Society. 140 (19), 6137-6145 (2018).
  17. Lazar, V., et al. Antibiotic-resistant bacteria show widespread collateral sensitivity to antimicrobial peptides. Nature Microbiology. 3 (6), 718-731 (2018).
  18. Czeczor, J. K., McGee, S. L. Emerging roles for the amyloid precursor protein and derived peptides in the regulation of cellular and systemic metabolism. Journal of Neuroendocrinology. 29 (5), (2017).
  19. Branco, M. C., Sigano, D. M., Schneider, J. P. Materials from peptide assembly: towards the treatment of cancer and transmittable disease. Current Opinion in Chemical Biology. 15 (3), 427-434 (2011).
  20. Cheetham, A. G., et al. Targeting Tumors with Small Molecule Peptides. Current Cancer Drug Targets. 16 (6), 489-508 (2016).
  21. Ndinguri, M. W., Solipuram, R., Gambrell, R. P., Aggarwal, S., Hammer, R. P. Peptide targeting of platinum anti-cancer drugs. Bioconjugate Chemistry. 20 (10), 1869-1878 (2009).
  22. Eskandari, S., Guerin, T., Toth, I., Stephenson, R. J. Recent advances in self-assembled peptides: Implications for targeted drug delivery and vaccine engineering. Advanced Drug Delivery Reviews. 110, 169-187 (2017).
  23. Zhou, J., Du, X., Yamagata, N., Xu, B. Enzyme-Instructed Self-Assembly of Small D-Peptides as a Multiple-Step Process for Selectively Killing Cancer Cells. Journal of the American Chemical Society. 138 (11), 3813-3823 (2016).
  24. Sun, J. E., et al. Sustained release of active chemotherapeutics from injectable-solid beta-hairpin peptide hydrogel. Biomaterials Science. 4 (5), 839-848 (2016).
  25. Lock, L. L., Reyes, C. D., Zhang, P., Cui, H. Tuning Cellular Uptake of Molecular Probes by Rational Design of Their Assembly into Supramolecular Nanoprobes. Journal of the American Chemical Society. 138 (10), 3533-3540 (2016).
  26. Kalafatovic, D., Nobis, M., Son, J., Anderson, K. I., Ulijn, R. V. MMP-9 triggered self-assembly of doxorubicin nanofiber depots halts tumor growth. Biomaterials. 98, 192-202 (2016).
  27. Frederix, P. W., et al. Exploring the sequence space for (tri-)peptide self-assembly to design and discover new hydrogels. Nature Chemistry. 7 (1), 30-37 (2015).
  28. Horsley, J. R., et al. Photoswitchable peptide-based 'on-off' biosensor for electrochemical detection and control of protein-protein interactions. Biosensors and Bioelectronics. 118, 188-194 (2018).
  29. Hoyos-Nogues, M., Gil, F. J., Mas-Moruno, C. Antimicrobial Peptides: Powerful Biorecognition Elements to Detect Bacteria in Biosensing Technologies. Molecules. 23 (7), 1683(2018).
  30. Xiao, X., et al. Advancing Peptide-Based Biorecognition Elements for Biosensors Using in-Silico Evolution. ACS Sensors. 3 (5), 1024-1031 (2018).
  31. Puiu, M., Bala, C. Peptide-based biosensors: From self-assembled interfaces to molecular probes in electrochemical assays. Bioelectrochemistry. 120, 66-75 (2018).
  32. Wang, J., et al. Developing a capillary electrophoresis based method for dynamically monitoring enzyme cleavage activity using quantum dots-peptide assembly. Electrophoresis. 38 (19), 2530-2535 (2017).
  33. Etayash, H., Thundat, T., Kaur, K. Bacterial Detection Using Peptide-Based Platform and Impedance Spectroscopy. Methods in Molecular Biology. 1572, 113-124 (2017).
  34. Handelman, A., Apter, B., Shostak, T., Rosenman, G. Peptide Optical waveguides. Journal of Peptide Science. 23 (2), 95-103 (2017).
  35. Chen, C., Liu, K., Li, J., Yan, X. Functional architectures based on self-assembly of bio-inspired dipeptides: Structure modulation and its photoelectronic applications. Advances in Colloid and Interface Science. 225, 177-193 (2015).
  36. Reddy, S. M., Shanmugam, G. Role of Intramolecular Aromatic pi-pi Interactions in the Self-Assembly of Di-l-Phenylalanine Dipeptide Driven by Intermolecular Interactions: Effect of Alanine Substitution. Chemphyschem. 17 (18), 2897-2907 (2016).
  37. Marchesan, S., et al. Unzipping the role of chirality in nanoscale self-assembly of tripeptide hydrogels. Nanoscale. 4 (21), 6752-6760 (2012).
  38. Scott, G. G., McKnight, P. J., Tuttle, T., Ulijn, R. V. Tripeptide Emulsifiers. Advanced Materials. 28 (7), 1381-1386 (2016).
  39. Galanski, M., Jakupec, M. A., Keppler, B. K. Update of the preclinical situation of anticancer platinum complexes: novel design strategies and innovative analytical approaches. Current Medicinal Chemistry. 12 (18), 2075-2094 (2005).
  40. Wheate, N. J., Walker, S., Craig, G. E., Oun, R. The status of platinum anticancer drugs in the clinic and in clinical trials. Dalton Transactions. 39 (35), 8113-8127 (2010).
  41. Oberoi, H. S., Nukolova, N. V., Kabanov, A. V., Bronich, T. K. Nanocarriers for delivery of platinum anticancer drugs. Advanced Drug Delivery Reviews. 65 (13-14), 1667-1685 (2013).
  42. Fichtinger-Schepman, A. M., van Oosterom, A. T., Lohman, P. H., Berends, F. cis-Diamminedichloroplatinum(II)-induced DNA adducts in peripheral leukocytes from seven cancer patients: quantitative immunochemical detection of the adduct induction and removal after a single dose of cis-diamminedichloroplatinum(II). Cancer Research. 47 (11), 3000-3004 (1987).
  43. Englander, E. W. DNA damage response in peripheral nervous system: coping with cancer therapy-induced DNA lesions. DNA Repair. 12 (8), 685-690 (2013).
  44. Galluzzi, L., et al. Molecular mechanisms of cisplatin resistance. Oncogene. 31 (15), 1869-1883 (2012).
  45. Boeckman, H. J., Trego, K. S., Turchi, J. J. Cisplatin sensitizes cancer cells to ionizing radiation via inhibition of nonhomologous end joining. Molecular Cancer Research. 3 (5), 277-285 (2005).
  46. Dragulska, S. A., et al. Tripeptide-Stabilized Oil-in-Water Nanoemulsion of an Oleic Acids-Platinum(II) Conjugate as an Anticancer Nanomedicine. Bioconjugate Chemistry. 29 (8), 2514-2519 (2018).
  47. Martinez Rivas,, J, C., et al. Nanoprecipitation process: From encapsulation to drug delivery. International Journal of Pharmaceutics. 532 (1), 66-81 (2017).
  48. Agilent Technologies. Analytical Methods for Graphite Tube Atomizers, User's Guide Manual, 8th edition. , (2012).
  49. Park, S. Y., et al. A smart polysaccharide/drug conjugate for photodynamic therapy. Angewandte Chemie. 50 (7), 1644-1647 (2011).
  50. Canton, I., Battaglia, G. Endocytosis at the nanoscale. Chemical Society Reviews. 41 (7), 2718-2739 (2012).
  51. Lokich, J., Anderson, N. Carboplatin versus cisplatin in solid tumors: an analysis of the literature. Annals of Oncology. 9 (1), 13-21 (1998).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Конъюгат олеиновой кислоты с платинойпокрытие пептидом KYFпроцесс самосборкицентрифугирующее концентрированиефлуоресцентная наноэмульсиявысвобождение платиныклетки рака яичниковпросвечивающая электронная микроскопияметод с использованием шприцевого насоса
Трипептид стабилизированный Nanoemulsion олеиновой кислоты
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.