Для расследования патофизиологии инсульта создана модель мыши церебральной ишемии-реперфузии. Мы дистально перевязать право средней мозговой артерии и правой общей сонной артерии и восстановления кровотока после 10 или 40 мин ишемии.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Два судна окклюзии модель мыши церебральной ишемии-реперфузии
* These authors contributed equally
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
В этом исследовании модель мыши окклюзии средней мозговой артерии (MCA) используется для изучения церебральной ишемии реперфузии. Воспроизводимость и надежную мышь модель полезна для изучения патофизиологии церебральной ишемии реперфузии и определения потенциальных терапевтических стратегий для больных с инсультом. Вариации в анатомии круг Уиллис C57BL/6 мышей влияет на объем их инфаркте после травмы головного мозга индуцированной ишемии. Исследования показали, что дистального прикуса MCA (СМАо) может преодолеть эту проблему и привести к стабильной инфаркте размер. В этом исследовании мы создать модель мыши двух сосудистой окклюзии церебральной ишемии-реперфузии через прерывание потока крови к правой MCA. Мы дистально перевязать правый MCA и правой общей сонной артерии (ОСО) и восстановление кровообращения после определенного периода ишемии. Эта травма ишемии реперфузии индуцирует инфаркте стабильный размер и поведенческих дефицита. Периферические иммунных клеток проникнуть ишемии мозга в течение периода 24 h инфильтрации. Кроме того нейронов потери в области коры меньше на более длительный срок реперфузии. Таким образом эта модель двух судно окклюзии подходит для исследования иммунного ответа и нейрональных восстановления во время периода реперфузии после церебральной ишемии.
Введение
Церебральной ишемии реперфузии мыши модель является одним из наиболее широко используемых экспериментальных подходов для изучения патофизиологии индуцированной ишемии мозга травмы1. Потому что церебральной ишемии реперфузии активирует периферийных иммунной системы, периферической иммунные клетки проникнуть в ишемии мозга и вызвать повреждения нейронов2. Таким образом надежных и воспроизводимых мыши модель, которая имитирует церебральной ишемии реперфузии требуется понимать патофизиологию инсульта.
Мышей C57Bl/6J (B6) являются наиболее часто используемые штамм в ход экспериментов, потому что он....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Институционального ухода за животными и использования комитетов Синика и Тайбэйского медицинского университета одобрил этот протокол для использования экспериментальных животных.
1. СМАо/реперфузия модель
- Предоставить свободный доступ к вода и Чоу мышей до операции.
- Автоклав, хирургические инструменты и дезинфицировать хирургии таблицы и оборудования с использованием 70% этиловом спирте. Одежда хирургическая маска и стерильные перчатки. Используйте сухой шарик стерилизатор для resterilize хирургические инструменты, если несколько операций мыши будет проводиться в одном эксперименте.
- Анестезировать 8 - до 12-нед....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Эта процедура СМАо/реперфузия производства корковых инфаркте вблизи правом MCA и причиной дефицита поведения. Различные степени индуцированной ишемии при инфаркте громкости (рис. 1AB) и нейрональных потери (рис. 1 cD) были созданы в коре правой области MCA путем увеличения продолжительности перевязки. Этот СМАо/реперфузионных повреждений сократилось двигательной активности животных в 48 ч после С.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
СМАо/реперфузия мыши модель является моделью животных обычно используются для имитации переходных ишемии в организме человека. Это животное модель может применяться нокаут и трансгенных мышей штаммов для изучения патофизиологии инсульта. Особенно важны несколько шагов в протоколе. (1 microdrill тщательно должен использоваться при создании отверстие в черепе, с легко вызывая кровотечение из MCA ненадлежащих действий. (2 MCA не должны быть повреждены, и кровотечения следует избегать до и после процедуры перевязки. Поврежде.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы не имеют ничего сообщать.
Благодарности
Эта работа была поддержана Министерством науки и технологии, Тайвань (наиболее 106-2320-B-038-024, наиболее 105-2221-E-038-007-MY3 и наиболее 104-2320-B-424-001) и Тайбэй медицинский университет больницы (107TMUH-SP-01). Этот манускрипт был отредактирован Уоллес академических редактирования.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Костный ронжер | Динер | Фридман | |
| Бупренорфин | Сигма | В-044 | |
| Цефазолин | Сигма | 1097603 | |
| Хлорал Гидрат | Сигма | С8383 | |
| Микроскоп для рассечения | Никон | СМЗ-745 | |
| Электрические машинки для стрижки | Петпро | ||
| 10% формалин | Sigma | F5304 | |
| Germinator Стерилизатор сухих шариков | Braintree Scientific | ||
| Iris Щипцы | Karl Klappenecker | 10 см | |
| Iris Ножницы | Diener | 9 см | |
| Iris Ножницы STR | Karl Klappenecker | 11 см | |
| Microdrill | Stoelting | FOREEDOM K.1070 | |
| Микроножницы-Vannas | HEISS | H-4240 | лезвие 7 мм, 8 см |
| Матрица мозга мыши | World Precision Instruments | ||
| Неинвазивная система измерения артериального давления | Muromachi | MK-2000ST | |
| Операционные ножницы STR | Karl Klappenecker | 14 см | |
| Система физиологического мониторинга | Harvard Apparatus | ||
| Razor лезвия | Ever-Ready | ||
| Stoelting Грызуны Грелки | Stoelting | 53810 | Грелка |
| Зажим для швов | Stoelting | ||
| Tweezers | IDEALTEK | No.3 | |
| Vetbond | 3M | 15672 | Хирургический клей |
| 10-0 Шов | UNIK | NT0410 | |
| 2,3,5-Triphenyltetrazolium хлорид | Sigma | T8877 |
Ссылки
- Woodruff, T. M., et al. Pathophysiology, treatment, and animal and cellular models of human ischemic stroke. Molecular Neurodegeneration. 6 (1), 11(2011).
- Chamorro, A., et al. The immunology of acute stroke. Nature Reviews. Neurology.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
