Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Измерение уровня биофизического и психологического стресса после посещения трех мест с различными уровнями природы

8.2K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/59272

⸱

19 июня 2019 г.

 ,  ,  , 
1School of Kinesiology and Recreation, Illinois State University, 2Department of Recreation, Park, and Tourism Studies, Indiana University, 3Department pf Environmental and Occupational Health, School of Public Health-Bloomington, Indiana University

В этой статье

Краткое содержание

Целью данного документа является выявление изменений в уровнях стресса после посещения трех различных параметров и описание методов, используемых при определении уровней стресса на основе показателей слюнного кортизола, амилазы и психологического самоотчета Инструмент.

Аннотация

Посещение природной среды было связано с психологическим снижением стресса. Хотя большинство исследований, связанных со стрессом, опирались на форматы самоотчета, все большее число исследований в настоящее время включает в себя биологические гормоны и катализаторы, связанные со стрессом, такие как кортизол и амилаза, для измерения уровня стресса. Представлен протокол для изучения влияния на уровни биофизического и психологического стресса после посещения трех различных местах с различными уровнями природы. Биофизические и самостоятельно зарегистрированные уровни психологического стресса измеряются сразу же при входе в выбранные места и непосредственно перед тем, как посетители покидают сайт. Используя метод "слюни", биофизическая мера состоит из 1-2 мл образцов слюны, предоставленных исследуемых испытуемых при входе в одно из трех мест исследования. Как предписано сохранившейся литературы, слюна собирается в течение 45 минут сроки после окончания участия посетителя на месте. После сбора слюны образцы маркируются и транспортируются в биологическую лабораторию. Кортизол является биофизической переменной интереса в этом исследовании и измеряется с помощью процесса ELISA с TECAN пластины читателя. Для измерения самостоятельной сообщил стресс, Воспринимается стресс вопросник (PS), который сообщает уровни беспокойства, напряженности, радости и воспринимается требования. Данные собираются на всех трех объектах во второй половине дня до раннего вечера. При сравнении во всех трех условиях, уровни стресса, измеряемые как биологические маркеры и самоотчеты, значительно ниже после посещения наиболее естественной обстановке.

Введение

Повышенный уровень стресса уже давно связаны со многими серьезными заболеваниями, такими как болезни сердца, ожирение и психологические расстройства1,2,3. Растущий объем исследований показывает, что близость или посещение природных условий, таких как парк и неразвитые ландшафты могут иметь замечательное влияние на психологическое благополучие и снижение уровня стресса1,4, 5,6,7,8,9,10. Объяснения последствий природных условий и уровней стресса включали в себя следующее:(1) естественные условия обеспечивают места для физической активности 8,11 и (2) посетителей в естественной среде имеют возможность сосредоточиться на более незадачных мыслительных процессов, тем самым приводит к снижению усталости внимания12. Для определения влияния природы на снижение стресса, это исследование использует самоотчет о психологическом стрессе (ПСЗ) и два биомаркера на основе слюны, кортизола и амилазы, после посещения трех различных мест отдыха. Эти места различаются между их уровнями "естественности" и включают в себя дикую природу типа настройки, муниципальный парк, и местные фитнес-и базы отдыха.

Данное исследование направлено на решение следующих вопросов исследования: (РЗ1) Существуют ли различия в уровнях биофизического стресса, измеряемых слюнным кортизоломом и амилазой при сравнении во всех трех участках (т.е. естественных, полунатуральных, построенных)? (РЗ2) Существуют ли различия в уровнях психологического стресса, измеряемые ПСЗ (проявляемые четырьмя конструкциями: требования, заботы, напряжение и радость) по сравнению со всеми тремя участками (т.е. естественными, полуестественными, построенными)?

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Это исследование следует политике и руководящим принципам Программы защиты человеческих исследований Университета Индианы Институциональный обзор совета.

1. Выбор местоположения

  1. Выберите количество сайтов (n) на основе различных уровней природы.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Мы выбрали три сайта для нашей работы. Используя континуум, основанный на уровнях "естественности", сайт А считался наиболее естественным и состоит из примерно 1200 акров лесистых хребтов, граничащих с озером и установленных в лиственных лесах. Наиболее распространенные виды деятельности включают ходьба и наблюдение за дикой природой. Сайт B был 33 акров муниципального парка с участием пешеходных дорожек, мест для собраний, игровых площадок, а также открытое пространство поля для причинно-следственной деятельности. Сайт C был городским, крытым объектом упражнений с самым низким уровнем естественности. Все три объекта находятся в относительно близкой близости от города среднего размера (по оценкам, население 46000 человек) на среднем западе Соединенных Штатов.

2. Скрининг участников и подготовка

  1. Полный набор участников, прежде чем предметы занимаются рекреационным опытом.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Для сайтов A и B, субъекты подходили исследователь на стоянке входа в парк. Для сайта C, предметы подходили на стойке регистрации крытый объект упражнений. Для контроля различий в типе активности субъекты, набранные как для сайтов A, так и B, были преимущественно походами, в то время как для сайта C основной деятельностью была бег или ходьба по крытой трассе.
  2. Во время набора напоминайте субъектам о соблюдении руководящих принципов, связанных со сбором образцов слюнного кортизола. Они не должны есть или пить 10 мин, прежде чем предоставить образцы слюны.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Следует отметить, что в этом случае образцы слюны не были нормализованы для объема или разбавления (концентрации) - т.е. были ли участники надлежащим образом увлажнены и/или же гидратация изменялась между сборами образцов.
  3. Дайте красные повязки (или эквивалентно заметной одежды) для каждого участника, чтобы обеспечить легкую идентификацию при появке в конце их обязательств.
  4. Назначить 30-40 минут времени выделения так, что все субъекты на трех сайтах проводят одинаковое количество времени в каждом сайте. Исключите испытуемых, которые тратят значительно больше или меньше времени, чем остальная часть выборки.
  5. Поддерживайте согласованность вида деятельности.
    ПРИМЕЧАНИЕ: В этом случае ,средняя" деятельность была ходьба или походы. Субъекты, занимающиеся деятельностью, существенно отличающейся от пеших или пешеходных походов, были исключены из выборки. Например, в соответствующие образцы не были включены предметы, которые ловили рыбу, устраивали пикники или тяжеловесы.

3. Условия и экспериментальный дизайн

  1. Используйте квазиэкспериментальный предтестовый/посттестовый дизайн.
  2. После определения предметов и их согласия на участие, попросите каждого субъекта прочитать и подписать форму IRB, объясняющую добровольный характер, цель и процедуры исследования.
  3. После этого процесса, дать субъектам кусок одежды (например, красная повязка) для будущей идентификации и получить физиологические и психологические показатели уровня стресса (например, Ps , 1-2 мл слюны, которая плевать или слюни в пробирку). Соберите образцы с позднего вечера до раннего вечера.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Эти данные были собраны исследователями как 1) как перед субъектами вошел на сайт и 2) сразу же после окончания посещения сайта.

4. Образцы слюны

  1. Чтобы избежать разбавления образцов, попросите испытуемых не есть, не пить и не полоскать рот за 10 минут, прежде чем предоставить образцы слюны.
  2. Попросите испытуемых предоставить образцы слюны 1-2 мл (за исключением пены) непосредственно перед рекреационным опытом и сразу же после завершения опыта.
  3. Сбор образцов слюны с помощью пассивного метода слюни:
    1. Предоставьте субъектам 2 в пластиковой соломы для слюни в 2 мл кривой (см. Таблица материалов).
    2. Проинструктируйте испытуемых разрешить слюне слиться в рот, затем слюни вниз по соломе и в кривой. Согласно рекомендациям по сбору и обработке слюны (2011), 1 мл (за исключением пены) является достаточным для большинства тестов.
    3. Образцы этикетки с присвоенным 3-значным идентификационным номером (т.е. 001) и письмом, указывающим время сбора данных (т.е. A представляет собой предварительный тест, B представляет после тестирования; где 001A представляет образец слюны, предоставленный участником 001 перед проведением рекреационный опыт).
    4. После того, как образец собран и помечен, он должен храниться временно замороженные в стероидной пены окно, полное сухого льда не более 2 ч.
    5. Транспортировать отмеченные образцы в лабораторию и хранить при -80 градусах По Цельсию до анализа.

5. Количественная оценка амилазы

ПРИМЕЧАНИЕ: В этом ассее, й-амилазы гидролизов 2-хлоро-р-нитрофенил-з-D-maltotrioside до 2-хлоро-нитрофенол и формы глюкозы, 2-хлоро-p-nitrophenyl-- -D-maltoside, мальтотрия, и глюкоза. Реакция контролируется при абсорбции 405 нм, что соответствует активности амилозы в образце. Этот ассеид демонстрирует линейность между 0 и 2000 U/L.

  1. Материалы
    1. Используется набор жидкой амилазы реагентов (см. Таблицаматериалов) для количественной оценки амилазы в образцах слюны. Все реагенты предоставляются в виде готовых к использованию жидкостей и хранятся при 0-4 градусах Цельсия.
    2. Используйте многорежимный считыватель (см. ТаблицаМатериалов), способный читать оптическую плотность на 405 нм с температурой, контролируемой до 37 градусов по Цельсию во время асссе.
  2. Анализа
    1. Оттепель образцов на льду до анализа.
    2. Разбавить образцы 1:10 с 1x PBS (10 л слюны и 90 л PBS).
    3. Проанализируйте каждый образец в дубликате.
    4. Уравновесите реагент амилазы до 20-25 градусов по Цельсию в течение не менее 30 минут.
    5. Добавьте 0,1 мл амилазного реагента к микроплите 96 скважин для каждого образца.
    6. Предварительно навислите на микроплиту при 37 градусах по Цельсию в течение как минимум 5 мин.
    7. Добавьте 2,5 л образца в реагент амилазы.
    8. Возьмите первоначальное чтение после 60 с.
    9. Продолжить чтения каждые 60 с в течение дополнительных 2 минут.
    10. Рассчитайте среднее значениеразницы абсорбции в минуту (
  3. Расчет
    1. Для расчета активности амилазы используйте следующую формулу:
      figure-protocol-1
      Где абс/мин - изменения в абсорбции в минуту; ТВ - общий объем ассеа (0,1025 мл); 1000 евро - преобразование U/mL в U/L; ММА - миллимолярная абсорптивность 2-хлоро-р-нитрофенола - 12,9; Объем пробы SV (0,0025 мл); и LP - световая дорожка (1 см). Замена дает:
      figure-protocol-2
      Таким образом, умножьте «Абс/мин» на 3178x коэффициент разбавления (10), чтобы получить амилазу в U/L.
    2. Для образцов выше 2000 U/ L (асссиевые линейность) разбавляют далее (по крайней мере 2x с помощью PBS) и переасвиливаем, а затем умножьте результат амилазы дополнительным фактором разбавления.

6. Количественная оценка кортизола

ПРИМЕЧАНИЕ: В этом ассее, свободный кортизол количественно в слюне с помощью стандартной кривой кортизола. Стандарты и разбавленные образцы добавляются в пластину микротитера, предварительно покрытую антителом. Конъюгировать кортизол-пероксидаза добавляется в скважины, а затем добавление моноклональных антител к кортизола. Количество конъюгированной связывания кортизола/пероксидазы уменьшается по мере увеличения концентрации кортизола в образце.

  1. Материалы
    1. Используйте набор иммуноанализов ферментов кортизола (см. Таблицаматериалов) для количественной оценки кортизола в образцах слюны. Все реагенты, необходимые для выполнения этого асссеа, включены в комплект. Все компоненты комплекта хранятся при 0-4 градусах Цельсия до истечения срока годности.
    2. Используйте спектрофотометр, способный читать оптическую плотность (OD) на уровне 450 нм (см. Таблицаматериалов), а также программное обеспечение, способное использовать записи OD от считывателя пластин для выполнения четырехпопаратической логистической кривой (4 PLC) установки.
  2. Подготовка реагента
    1. Разрешить всем реагентам уравновесить до 20-25 градусов по Цельсию в течение как минимум 30 мин.
    2. Разбавить кортизол ассибуфер 1:5 с помощью деионизированной воды.
    3. Разбавить буфер стирки 1:20 с помощью деионизированной воды.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Асссея и мыть буферы стабильны в течение 3 месяцев при хранении на 0-4 градусов по Цельсию.
  3. Подготовка образцов
    1. Оттепель образцов на льду до анализа.
    2. Разбавить образцы 1:10 с буфером ассидного кортизола (20 л слюны и 180 л буфера) и использовать в течение 2 ч подготовки.
  4. Подготовка стандартов
    1. Этикетка стеклянные пробирки #1-#7.
    2. Пипет капота 225 л буфера асссев в трубку #1 и 125 л буфера в трубки #2-#7.
    3. Добавьте 25 зл и стоек кортизола в трубку #1 и вихрь.
    4. Удалить 125 л буфера из трубки #1 и добавить его в трубку #2, а затем вихрь.
    5. Повторите серийные разбавления для трубок #3-#7.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Окончательные концентрации кортизола каждого стандарта показаны в таблице 1.
    6. Стандарты должны использоваться в течение 2 ч подготовки.
Стандартный#1#2#3#4#5#6#7
Объем буфера асса (КЛ)225 год125 г.125 г.125 г.125 г.125 г.125 г.
ДополнениеФондовый Std#1#2#3#4#5#6
Объем добавления (КЛ)25125 г.125 г.125 г.125 г.125 г.125 г.
Окончательная концентрация (пг/мл)3200 г.1600 г.800400200 г.10050 лет

Таблица 1: Стандартный таблица подготовки кривой.

  1. Анализа
    1. Используйте макет пластины ниже на рисунке 1 в качестве руководства для настройки микроплиты.
    2. Рекомендуется использовать многоканальный пипетки для добавления реагентов.
    3. Добавьте 50 кл. образцов или стандартов в соответствующее количество колодцев в пластине. Образцы и стандарты должны быть запущены в дубликате.
    4. Добавьте буфер ассеа (75 л) в неспецифические обязательные скважины (NSB).
    5. Добавьте буфер ассея (50 л) в скважины с максимальной связыванием (B0) и нулевые стандартные (пустые) скважины.
    6. Добавьте 25 конъюгированного кортизола к каждой скважине.
    7. Добавьте 25 кЛ антител кортизола к каждому колодцу, за исключением скважин NSB.
    8. Аккуратно коснитесь стороны пластины, чтобы смешать реагенты.
    9. Накройте плитой уплотнитель и встряхните при комнатной температуре (RT) при температуре 20-25 градусов по Цельсию на 1 ч.
    10. Удалите содержимое колодца и промойте каждый колодец 4x буфером для мытья (300 л). Нажмите на тарелку, чтобы высохнуть на абсорбирующимполомы между стихами.
    11. Добавьте субстрат TMB к каждой скважине (100 л).
    12. Инкубировать пластину при 20-25 градусах По Цельсию в течение 30 минут без встряхивания.
    13. Добавьте стоп-решение к каждому колодцу (50 л).
    14. Прочитайте оптическую плотность в каждой скважине микроплиты на уровне 450 нм.
    15. Средний оптической плотности для каждого стандарта, а затем образца и вычесть среднюю оптическую плотность для скважин NSB.
    16. Рассчитайте % bound (B/B0) для всех образцов, используя элементы максимальной связывания (B0).
    17. Создайте стандартную кривую с использованием программного обеспечения, способного к четырехпараметрической логистической регрессионной кривой, рассчитанной по кривой %B/B0.
    18. Умножьте результат на коэффициент разбавления (10), чтобы получить значения кортизола в pg/mL.
    19. Образцы с оптической плотностью, опадание выше высочайшего стандарта, следует дополнительно разбавлять буфером асссеа и повторно асссесифицированы, после чего результат следует умножать на дополнительный коэффициент разбавления.

figure-protocol-3
Рисунок 1 : Пример макета пластины. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.

7. Психологическое измерение (Воспринимаемый вопросник стресса)

  1. Измерьте психологические уровни испытуемых с помощью ПСЗ, опубликованного Fliege et al.13, который включает в себя четыре фактора (беспокойство, напряжение, напряжение, радость) и использует 20 пунктов.
  2. Попросите субъекта заполнить PS ' непосредственно перед их рекреационного опыта и сразу же после завершения опыта.
  3. Теги анкеты с 3-значным идентификационным номером идентичны биофизиологическому уровню стресса каждого субъекта.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Описание образца
Используя метод иную технику отбора квот, в этом исследовании приняли на работу 35 посетителей с каждого из трех участков. В общей сложности в этом исследовании было набрано 105 испытуемых, в том числе 63 мужчины и 42 женщины. Средний возраст посетителей, набранных с трех различных сайтов, составил 25,9 года (сайт А), 37,2 года (сайт B) и 28,8 года (сайт C). Были также зарегистрированы частоты посещения испытуемыми в выбранных трех местах. Для сайта А и сайта C большинство испытуемых ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Цель этого исследования заключается в выявлении потенциальных изменений в стрессе с использованием биофизических и психологических инструментов после посещения рекреационных в трех различных условиях с различными уровнями природы. Как кортизол, так и амилаза, как было показано, являются надежными показателями уровней психологического стресса. Процедура ассеидного асссея, описанная в данном исследовании, была адаптирована к формату 96 скважин. При высоких уровнях амилазы в слюне, изменения абсорбции происходят быстро. Поэ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не заявляют о конфликте интересов.

Благодарности

Это исследование было профинансировано частично через Программу грантов исследований факультета (FRGP) спонсируемой через Школу общественного здравоохранения при Университете Индианы, Блумингтон, IN. Авторы хотели бы поблагодарить д-ра Элисон Войт и Мелиссу Пейдж за их редакционную помощь и конструктивные комментарии.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Набор для иммуноферментного анализа кортизолаDetectXK003-H1Набор для иммуноферментного анализа кортизола предназначен для количественного измерения кортизола, присутствующего в высушенных фекальных экстрактах, слюне, моче, сыворотке, плазме и образцах питательных сред.
Криогенные этикетки для криогенного храненияFisherbrand5-910-AУникальный клей выдерживает экстремальные температуры
Жидкая амилаза (CNPG3) Набор реагентовPointe ScientificA7564Для количественного кинетического определения активности &альфа;-амилазы в сыворотке крови человека.
Круглое дно 2 мл Полипропиленовые пробирки с наружной резьбой КолпачокGreiner Bio-One07-000-2572,0 мл U-BTM Cryo.s самостоящий полипропиленовый стерилизованный
Synergy Multi-Mode Microplate ReaderBioTekЭто одноканальный считыватель микропланшетов с абсорбцией, флуоресценцией и люминесценцией, в котором используется двойная оптическая конструкция для выполнения измерений образцов в формате микропланшета.

Ссылки

  1. Hansmann, R., Hug, S., Seeland, K. Restoration and stress relief through physical activities in forests and parks. Urban Forestry and Urban Greening. 6, 213-225 (2007).
  2. Krantz, D. S., McCeney, M. K. Effects of psychological and social factors on organic disease: A critical assessment of research on coronary heart disease. Annual Review of Psychology. 53, 341-369 (2002).
  3. Ward Thompson, C., et al. More green space is linked to less stress in deprived communities: Evidence from salivary cortisol patterns. Landscape and Urban Planning. 105, 221-229 (2012).
  4. Haluza, D., Schonbauer, R., Cervinka, R. Green perspectives for public health: A narrative on the physiological effects of experiencing outdoor nature. International Journal of Environmental Research and Public Health. 11, 5445-5461 (2014).
  5. Korpela, K. M., Ylen, M., Tyrväinen, L., Silvennomen, H. Determinants of restorative experiences in everyday favorite places. Health and Place. 14, 636-652 (2008).
  6. Mantler, A., Logan, A. C. Natural environments and mental health. Advances in Integrative Medicine. 2, 5-12 (2015).
  7. Mayer, F. S., McPherson-Frantz, C., Bruehlman-Senecal, E., Dolliver, K. Why is nature beneficial? the role of connectedness to nature. Environment and Behavior. 41, 307-643 (2009).
  8. Pretty, J., Peacock, J., Sellens, M., Griffin, M. The mental and physical health outcomes of green exercise. International Journal of Environal Health Research. 15, 319-337 (2005).
  9. Ulrich, R., et al. Stress recovery during exposure to natural and urban environments. Journal of Environmental Psychology. 11, 201-230 (1991).
  10. Kaplan, S., Talbot, J. F. Psychological Benefits of a Wilderness Experience. Behavior and the Natural Environment. Altman, I., Wohlwill, J. F. , Springer. Boston, MA. 163-203 (1983).
  11. Salmon, P. Effects of physical exercise on anxiety, depression, and sensitivity to stress: A unifying theory. Clinical Psychology Review. 21, 33-61 (2001).
  12. Focht, B. C. Brief walks in outdoor and laboratory environments: Effects on affective responses, enjoyment, and intentions to walk for exercise. Research Quarterly for Exercise and Sport. 80, 611-620 (2009).
  13. Fliege, H., et al. The Perceived Stress Questionnaire (PSQ) reconsidered: Validation and reference values from different clinical and healthy adult samples. Psychosomatic Medicine. 67, 78-88 (2005).
  14. Kirschbaum, C., Hellhammer, D. H. Salivary cortisol in psychoneuronendocrine research: Recent developments and applications. Psychoneuroendocrinology. 19, 313-333 (1994).
  15. Gallacher, D. V., Petersen, O. H. Stimulus-secretion coupling in mammalian salivary glands. International Reviews in Physiology. 28, 1-52 (1983).
  16. Slosnik, R. T., Chatterton, R. T., Swisher, T., Par, S. Modulation of attentional inhibition by norepinephrine and cortisol after psychological stress. International Journal of Psychophysiology. 36, 59-68 (2000).
  17. Nater, U. M., et al. Stress-induced changes in human salivary alpha-amylase activity-associations with adrenergic activity. Psychoneuroendocrinology. 31 (1), 49-58 (2006).
  18. Takai, N., et al. Effect of psychological stress on the salivary cortisol and amylase levels in healthy young adults. Archives of Oral Biology. 49 (12), 963-968 (2004).
  19. Shirtcliff, E. A., Granger, D. A., Schwatz, E., Curran, M. J. Use of salivary biomarkers in biobehavioral research: Cotton based sample collection methods can interfere with salivary immunoassay results. Psychoneuroendocrinology. 26, 165-173 (2001).
  20. Nater, U. M., et al. Human salivary alpha-amylase reactivity in a psychosocial stress paradigm. Journal of Psychophysiology. 55 (3), 333-342 (2005).
  21. Granger, D. A., et al. Integration of salivary biomarkers into developmental and behaviorally-oriented research: Problems and solutions for collecting specimens. Physiology and Behavior. 92, 583-590 (2007).
  22. Frumkin, H. Beyond toxicity: Human health and the natural environment. American Journal of Preventive Medicine. 20, 234-240 (2001).
  23. Hartig, T., Mitchell, R., de Vries, S., Frumkin, H. Nature and health. Annual Review of Public Health. 35, 207-228 (2014).
  24. Gidlow, C. J., et al. Where to put your best foot forward: Psycho-physiological responses to walking in natural and urban environments. Journal of Environmental Psychology. 45, 22-29 (2016).
  25. Ewert, A., Chang, Y. Levels of nature and stress response. Behavioral Sciences. 8 (5), 49(2018).
  26. Wyles, K. J., et al. Are some natural environments more psychologically beneficial than others? The importance of type and quality on connectedness to nature and psychological restoration. Environment and Behavior. 51 (2), 111-143 (2019).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Биофизический стресссбор слюныизмерение уровня кортизолаальфа-амилазаИФА-анализопросник воспринимаемого стрессаметод пассивного слюноотделенияестественная средаснижение стресса
Измерение уровня биофизического и психологического стресса после посещения трех мест с различными уровнями природы
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.