Описано здесь использование нескольких самодельных инструментов для передачи, охлаждения и убить взрослых Drosophila, а также для очистки стеклянных флаконов культуры и собирать яйца. Эти инструменты просты в обработке и довольно эффективны в обращении с Drosophila.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Простые домашние инструменты для обработки фруктовых мух-Drosophila меланогастер
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Плодовая муха, Drosophila melanogaster, широко используется как в биологических исследованиях и биологии образования. Обработка взрослых мух является общим, но трудно на практике, как взрослые мухи летать. Продемонстрировано здесь, как сделать некоторые простые и экономически эффективные инструменты для решения сложных вопросов в обработке Drosophila. Отверстия в пены пробки сделаны и пипетки советы или воронки вставляются в отверстия. Мухи затем двигаться только в одном направлении в пипетки наконечник / воронка сборки, что позволяет эффективно контролировать передачу взрослых Drosophila в или из флакона. Существующие протоколы были изменены для охлаждающих мух, охлаждая в дробленом льду и перенося их на холодную, твердую поверхность ледяного покрова. Ледяной пакет покрыт куском медицинской марли, которая удерживает обездвиженных мух из сгущенной воды при обследовании под стереомикроскопом. Мухи, наконец, усыпленных для подсчета и сортировки или отбрасываются микроволновой печи. Также была разработана клетка в форме бутылки для сбора яиц, а также трудосберегающее устройство и сопутствующее протокол для очистки стеклянных флаконов культуры.
Введение
Плодовая муха, Drosophila melanogaster, является моделью организма широко используется в биологических исследованиях и биологии образования для изучения широкого круга тем1,2. Основными проблемами обработки drosophila являются передача взрослых от флакона к флакону и иммобилизации мух, чтобы они легче справиться, так как все взрослые (за исключением некоторых мутантов3,4) может летать.
Условно, исследователь передает летит из одного флакона в другой, держа два флакона рот в рот, нажав мух вниз или позволяя ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
1. Подготовка инструментов и аксессуаров
- Наконечник/воронка пробки
- Получить две вилки губки (диаметр вилки должны быть немного больше, чем внутренний диаметр флаконов, используемых для передачи мух). Сделайте отверстие в центрах губки пробки с подогревом электрического паяльника железа.
- Получить два 1 мл пипетки советы, разрезать один пополам поперечным острым ножом, и отбросить заостренный конец. Затем, вырезать 1,5 см заостренный конец от второго кончика пипетки. Клей остатки двух кончиков пипетки вместе с универсальным клеем, чтобы сделать удлиненный кончик пипетки(рисунок 1A).
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
T- и F-стопперы были разработаны как набор простых инструментов, которые могут быть адаптированы и использованы в любой деятельности передачи мух. Передача мух из старой культуры в несколько свежих культур включает в себя удаление вилки свежих флаконов, заменив их F-стопперами, затем нажав вниз мух в старом флаконе, быстро удалив его вилку, и заменить его T-стоппер. Если старая еда компактна, то важно перевернуть старый флакон и вставить кончик T-стоппера в отверстие F-стоппера, а затем н.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Некоторые самодельные инструменты для обработки основных видов деятельности, связанных с воспитанием дрозофилы и эксперименты описаны в этой работе. Эти инструменты просты, но довольно эффективны. Фактически любая лаборатория может сделать эти инструменты с легкостью, и исследования или учебной лаборатории не нужно, чтобы найти готовую альтернативу, которая, возможно, не доступна на местном уровне.
Передача мух является наиболее распространенной практикой и трудной задачей в экспериме.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Автору нечего раскрывать.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Плоскогубцы | |||
| Аккумуляторная дрель-шуруповерт | макс. скорость: 500 об/мин | ||
| Электрический паяльник | |||
| Напильник | |||
| Диаметр воронки | диска 60 мм | ||
| Ящик | |||
| Булавки | |||
| Инфракрасный термометр | HCIYET HT-830 | ||
| Длинная манжета резиновые перчатки | |||
| Механические карандаши Медицинская | |||
| марля | |||
| Микроцентрифуга пробирка | 100 мкл | ||
| Микроволновая печь | |||
| Parafilm | |||
| Peri dish | внутренний диаметр 60 мм | ||
| Наконечники | 1 мл | ||
| Пластиковая пленка | |||
| Phi; 36 мм используется для покрытия пустого флакона | |||
| Точечный пинцет | |||
| Защитные рабочие перчатки | |||
| Повторно замораживаемые твердые пакеты со льдом | 26,5 раза; 14,5&раз; 2,5 см и более | ||
| Резиновая воздуходувка | |||
| Защелка | |||
| Бутылка | 500 мл, внутренний диаметр около 65 мм | ||
| Губчатая пробка | |||
| Губки | |||
| Трубчатая щетка | |||
| Флакон | Фита; 34 мм & раз; 90 мм |
Ссылки
- Jennings, B. H. Drosophila – a versatile model in biology & medicine. Materials Today. 14 (5), 190-195 (2011).
- JoVE Science Education Database. Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans. An Introduction to Drosophila melanogaster. , JoVE. Cambridge, MA. (2018).
- Ashburner....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
Теги
