Приемная иммунотерапия клеток iNKT в глюкозе-6-фосфатной исофазе (G6PI)-индуцированной РА мышей

Ming Meng; Shengde Chen; Xiang Gao; Huifang Liu; Yuanyuan Wang; Jingnan Zhang; Haiyang Dou; Wenjuan Li; Dongzhi Chen

doi:10.3791/60048

Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Приемная иммунотерапия клеток iNKT в глюкозе-6-фосфатной исофазе (G6PI)-индуцированной РА мышей

6.5K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/60048

⸱

31 января 2020 г.

Ming Meng^*¹^,² , Shengde Chen^*¹^,² , Xiang Gao^*¹^,² , Huifang Liu^*¹^,² , Yuanyuan Wang^*¹^,² , Jingnan Zhang^*¹^,² , Haiyang Dou^*¹^,² , Wenjuan Li^*¹^,² , Dongzhi Chen^*¹^,²

¹Medical School of Hebei University, ²Key Laboratory of Pathogenesis Mechanism and Control of Inflammatory-Autoimmune Diseases in Hebei Province

^* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Этот протокол использует G6PI смешанные пептиды для построения ревматоидных моделей артрита, которые ближе к модели человеческого ревматоидного артрита в CD4^и Т-клеток и цитокинов. Высокая чистота инвариантных естественных киллеров Т-клеток (главным образом iNKT2) со специфическими фенотипами и функциями были получены путем индукции in vivo и в пробирке для очищения для приемной иммунотерапии.

Аннотация

Ревматоидный артрит (РА) является сложным хроническим воспалительным аутоиммунным заболеванием. Патогенез заболевания связан с инвариантными естественными клетками-убийцами Т (iNKT). Пациенты с активной РА представляют меньше iNKT клеток, дефектной функции клеток, и чрезмерная поляризация Th1. В этом исследовании, модель РА животных была создана с использованием смеси gpI325-339 и hGPI469-483 пептидов. Клетки iNKT были получены индукцией in vivo и очисткой in vitro, а затем настой в мышей РА для приемной иммунотерапии. Система обработки in vivo (IVIS) показала, что клетки iNKT в основном распределяются в селезенке и печени. На 12 день после клеточной терапии прогрессирование заболевания значительно замедлилось, клинические симптомы были смягчены, обилие клеток iNKT в тимусе увеличилось, доля iNKT1 в тимусе снизилась, а уровни ТНФ-З, IfN-Q и IL-6 в сыворотка уменьшилась. Приемная иммунотерапия клеток iNKT восстановила баланс иммунных клеток и исправила чрезмерное воспаление организма.

Введение

Ревматоидный артрит (РА) является аутоиммунным заболеванием, характеризующимся хронической, прогрессирующей инвазивностью с частотой 0,5-1%^1,². Основной патогенез связан с аномальным распространением аутореактивных^CD4 и^CD8 - Т-клеток, проявляющихся в увеличении доли CD4^иIFN-Q и^CD4- IL-17A^- Т-клеток, а также уменьшенного числа CD4^-ИЛ-4 и CD4 ^-CD25^-FoxP3^- Т-клеток. Поэтому секреция воспалительных цитокинов усиливается, а чрезмерная воспалительная реакция разрушает родной баланс и функцию толер....