Мы описываем и детализируем использование трансламинарной автономной системы. Эта система использует задний сегмент человека для независимого регулирования давления внутри сегмента (внутриглазного) и окружающего зрительного нерва (внутричерепного) для создания трансламинального градиента давления, который имитирует особенности глаукоматозной оптической невропатии.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Трансламинарная модель автономной системы для модуляции внутриглазного и внутричерепного давления в задних сегментах донора человека
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
В настоящее время существует неудовлетворенная потребность в новой доклинической модели человека, которая может быть нацелена на этиологию заболевания ex vivo с использованием внутричерепного давления (ВЧД) и внутриглазного давления (ВГД), которые могут идентифицировать различные патогенные парадигмы, связанные с патогенезом глаукомы. Модели культуры органов переднего сегмента человека ex vivo ранее успешно использовались и применялись в качестве эффективных технологий для открытия патогенеза глаукомы и тестирования терапевтических средств. Доклинический скрининг лекарств и исследования, проводимые на системах органов человека ex vivo, могут быть более трансформируемыми для клинических исследований. В этой статье подробно описывается создание и эксплуатация новой модели трансламинального давления человека ex vivo, называемой трансламинальной автономной системой (TAS). Модель TAS может независимо регулировать ВЧД и ВГД с использованием задних сегментов донора человека. Модель позволяет изучать патогенез доклиническим способом. Это может уменьшить использование живых животных в офтальмологических исследованиях. В отличие от экспериментальных моделей in vitro, структура, сложность и целостность ткани головки зрительного нерва (ONH) также могут поддерживаться в рамках модели ex vivo TAS.
Введение
Глобальные оценки в недавних опросах показывают, что 285 миллионов человек живут с нарушениями зрения, в том числе 39 миллионов слепых1. В 2010 году Всемирная организация здравоохранения задокументировала, что три из девяти перечисленных ведущих причин слепоты происходят в заднем сегменте глаза1. Заболевания заднего сегмента глаза включают сетчатку, сосудистую оболочку и зрительный нерв2. Сетчатка и зрительный нерв являются расширениями центральной нервной системы (ЦНС) мозга. Аксоны ганглиозных клеток сетчатки (RGC) уязвимы для повреждения, потому что они выходят из глаза через головку зрительног....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Глаза были получены в соответствии с положениями Хельсинкской декларации для исследований с участием тканей человека.
ПРИМЕЧАНИЕ: Глаза из авторитетных глазных банков (например, Lions Eye Institute for Transplant, Research, Tampa FL) были собраны в течение 6-12 часов после смерти, а донорская сыворотка была проверена на гепатит В, гепатит С и вирус иммунодефицита человека 1 и 2. После того, как они были получены, глаза были рассечены и установлены в модели TAS в течение 24 часов. Критерии исключения включали любую глазную патологию. Глаза не были исключены в зависимости от возраста, расы или пола. Чтобы обеспечить жизнеспособность сетчатки ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Проектирование и создание трансламинарной автономной системы
Трансламинарный перепад давления является потенциальным ключевым механизмом в патогенезе различных заболеваний, в том числе глаукомы. Использование описанной модели включает, но не ограничивается этим, изучение глаукомы (повышенное ВГД, возможно, снижение ВЧД), черепно-мозговой травмы (повышенное ВЧД) и долгосрочное воздействие связанных с микрогравитацией нарушений зрения (повышенный ВЧД, повышенный ВГД). Чтобы помочь обнаружить молекулярны.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Посмертные ткани человека являются особенно ценным ресурсом для изучения нейродегенеративных заболеваний человека, поскольку идентификация потенциальных лекарств, разработанных на животных моделях, должна быть переведена на людей47. Эффекты повышения ВГД человека хорошо известны, но минимальные исследования были проведены для аномальных изменений трансламинального давления ONH. Несмотря на то, что существует несколько животных моделей и конечное моделирование ONH человека, не существует модели ex .......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы рукописи не имеют потенциальных конфликтов интересов для раскрытия.
Благодарности
Финансирование этого проекта осуществлялось за счет дискреционных средств д-ра Коллин М. Макдауэлл. Эта работа была частично поддержана неограниченным грантом от Research to Prevent Blindness, Inc. департаменту офтальмологии и визуальных наук UW Madison. Мы благодарим д-ра Эббота Ф. Кларка и Веймин Мао за их техническую помощь с моделью культуры перфузионных органов. Мы благодарим Институт трансплантации и исследований Lions Eye (Тампа, Флорида) за предоставление глаз донора человека.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| #122, 1-1/8" внутри x 1-5/16" снаружи Diam, уплотнительное кольцо из витона, толщина 3/32", 755 Durometer 50 Pack | Amazon | B07DRGPPZJ | |
| 114 Buna-N O-Ring, 70A Durometer, черный, 5/8" ID, 13/16" OD, ширина 3/32" (в упаковке 100) | Amazon | B000FMYRHK | |
| шприцы 30 мл без иглы | Vitality Medical | 302832 | |
| 3-позиционный запорный кран, 2 замка Luer с внутренней резьбой, поворотный замок Luer с наружной резьбой, вентилируемый колпачок | QOSINA | 2C6201 | |
| 4-40 x 1/2 PH PAN MS SS/CHROME и крестообразная отвертка соответствующего размера | Brikksen Stainless Steel Fastners | PPMSSSCH4C.5 | |
| ANPROLENE 16 LARGE AMPULE | Fisher Scientific | NC9085343 | |
| Betadine | Purdue | PUR1815001EACH | |
| Corning 100 x 20 мм обработанные тканевой культурой чашки | для культур Sigma-Aldrich | CLS430167-100EA | strong> |
| Corning L-глутаминовый раствор | Fisher Scientific | MT25005CI | |
| Covidien 3033 Curity Марлевая губка, 4" x 4", 12-слойная, стерильная, 1200/CS | Med Plus Medical Supply | COV-3033-CS | |
| Перевязочные щипцы деликатно изогнутые (зубчатые) | Katena | K5-4010 | |
| Dumont #5 - Тонкие щипцы | F.S.T. | 11254-20 | |
| Глазные ножницы стандартные изогнутые | Katena | K4-7410 | |
| Falcon 150 x 15 мм Простые стерильные одноразовые чашки | Петри Capitol Scientific | 351058 | |
| Fisherbrand 4 унции контейнеры для образцов | Fisher | Scientific 16-320-730 | |
| Fisherbrand Мгновенно запечатывающиеся стерилизационные мешочки | Fisher Scientific | 01-812-54 | |
| Пакеты для стерилизации Fisherbrand Instant Sealing Sturify | Fisher Scientific | 01-812-55 | |
| Пакеты для мгновенной герметизации Fisherbrand Fisher | Scientific | 01-812-58 | |
| HyClone Dulbecco's Modified Eagles Medium | Fisher Scientific | SH3024302 | |
| HyClone Penicillin Streptomycin 100X Раствор | Fisher Scientific | SV30010 | |
| Гидрофильный фильтр с внутренней резьбой на входе Luer Lock, наружным выходом Luer Slip, синие и прозрачные | гидростатического давления Qosina | 28217 | |
| , DELTRAN ® II, Каталог # DPT-200 с расходом 3CC/HR | AD инструменты | DPT-200 | |
| JG15-0.5HPX 15 Gauge 0.5" NT Premium Series Дозирующий наконечник 50/box | Jenson Global | JG15-0.5HPX 15 | |
| Keyence B2? Микроскоп X710 | Keyence | B2-X710 | |
| LabChart 8 AD | инструменты | LabChart 8 | |
| Leica ST5020 Multi-stainer | Leica | ST5020 | |
| Невентилируемый универсальный колпачок Luer Lock, белый | QOSINA | 65811 | |
| Восьмеричный мост Усилитель (модель # FE228) | AD инструменты | FE228 | |
| Pharmco Products ЭТИЛОВЫЙ СПИРТ, 200 PROOF | Fisher Scientific | NC1675398 | |
| Фосфатный буферный раствор (PBS) | Sigma-Aldrich | D8537-500ML | |
| PowerLab 8/35 (модель # PL3508) | AD instruments | PL3508 | |
| ProLong Gold Antifade Mountant with DAPI | ThermoFisher | P36935 | |
| Push-to-Connect Tube Fitting для воздуха и воды Прямой адаптер, наружный диаметр трубы 1/8 дюйма x наружная резьба 1/8 NPT Наружная резьба | McMAster-Carr | 7880T113 | |
| Push-to-Connect с универсальной резьбой для воздуха и воды, адаптер, трубка 1/8" наружный диаметр x труба 1/8 | McMAster-Carr | 51235K101 | |
| Saint-Gobain Tygon S3 E-3603 Гибкая трубка 500 футов. | Fisher Scientific | 14-171-268 | |
| Superblock T20 | Хирургические ножницы Fisher Scientific | PI37536 | |
| - Sharp-Blunt | F.S.T. | 14001-14 | |
| Тканевые щипцы тонкие 1x2 зуба изогнутые | Katena | K5-4110 | |
| Трансламинарная автономная система (TAS) | Научный центр здоровья Университета Северного Техаса | Н/Д | |
| США размер 030 Уплотнительное кольцо Buna-N, B1000, 70 Твердость, черный, Buna-N (NBR, нитрил, Buna) | Marco Rubber & Пластмассы | В1000-030 |
Ссылки
- Pascolini, D., Mariotti, S. P. Global estimates of visual impairment: 2010. The British Journal of Ophthalmology. 96 (5), 614-618 (2012).
- Bastawrous, A., et al. Posterior segment eye disease in sub-Saharan Africa:....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
