Методическая статья

Оценка различий в цвете плаценты с последовательностью полицитемии двойной анемии

DOI:

10.3791/61312

⸱

17 июня 2020 г.

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Reproductive Medicine, Affiliated Shenzhen Maternity and Child Healthcare Hospital, Southern Medical University, 2Division of Fetal Medicine, Department of Obstetrics, Leiden University Medical Center, 3Fetal Medicine Unit & Prenatal Diagnosis Center, Department of Obstetrics, Shanghai First Maternity and Infant Hospital, Tongji University School of Medicine, 4Division of Neonatology, Department of Pediatrics, Leiden University Medical Center

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

У монохориальных близнецов с последовательностью полицитемии анемии близнецов (TAPS) донорский близнец и соответствующая ему доля плаценты бледные, в то время как близнец-реципиент и его плацентарная доля имеют полноцветный аспект. Здесь представлен протокол для количественной оценки цветовой разницы на материнской стороне плаценты TAPS после рождения.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Последовательность полицитемии анемии близнецов (TAPS) встречается у 5% монохориальных близнецов и характеризуется большими различиями гемоглобина между близнецами. Постнатальные диагностические критерии для TAPS основаны на гематологических параметрах и характеристиках плаценты. Исследование плаценты после рождения показывает, что цвет материнской стороны между плацентарными территориями анемичных и полицитемных близнецов заметно различается. Разница в цвете плацент TAPS выше по сравнению с монохориальными плацентами с острым перинатальным фето-фетальным переливанием; таким образом, это используется в качестве дополнительного диагностического критерия для TAPS. Программное обеспечение, такое как ImageJ, позволяет измерять интенсивность цвета в плацентах TAPS с помощью компьютера. Однако подробная методика расчета цветовых различий между анемичными и полицитемическими компонентами плаценты TAPS до сих пор не описана. Представленный здесь протокол представляет собой пошаговый метод анализа цветовых различий на материнской стороне плаценты TAPS с использованием программного обеспечения ImageJ.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ТАПС является хронической формой фето-фетального трансфузионного синдрома и характеризуется большой разницей между близнецами гемоглобина (Hb) без признаков олиго-многоводия1. Основной патогенез TAPS связан с уникальной плацентарной ангиоархитектурой, при этом лишь несколько незначительных анастомозов позволяют осуществлять хроническое и низкоскоростное переливание крови от донора (анемичный близнец) к реципиенту (полицитемный близнец)2,3,4. Постнатальная диагностика TAPS основана на гематологических тестах, показывающих большую разницу между Hb и большой разницей в количестве ретикулоцитов, и/или плацентарной инъекции с красителем, показывающим лишь незначительные анастомозы5. Тем не менее, количество ретикулоцитов не всегда измеряется при рождении, и инъекции плаценты обычно не выполняются в большинстве центров медицины плода. Дополнительный диагностический критерий может быть полезен для диагностики случаев без измерения количества ретикулоцитов и без инъекции плацентарного красителя. Поразительная разница в цвете между бледной кожей донорского близнеца и обильной кожей близнеца-реципиента постоянно присутствует у близнецов TAPS при рождении. Сходная цветовая разница материнской стороны между плацентарными территориями анемичных и полицитемных близнецов также выявляется при грубом исследовании.

Недавно была выдвинута гипотеза о том, что эта разница в цвете плаценты может быть использована в качестве простого и точного метода для подтверждения диагноза TAPS после рождения6 детей. Количественная оценка цветовой разницы в плацентах TAPS экономит время по сравнению с инъекцией плаценты. Кроме того, количественная оценка цветовой разницы в плацентах TAPS является более экономически эффективной по сравнению с подсчетом ретикулоцитов. Материалы, используемые в этом методе, легко доступны в клинических условиях, поэтому этот метод обеспечивает простые и точные критерии для диагностики TAPS. В протоколе подробно описан метод количественной оценки цветовых различий с материнской стороны монохориальных плацент с помощью TAPS.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Этот протокол был одобрен комитетом по этике Медицинского центра Лейденского университета, а постнатальное обследование монохориальных близнецовых плацент человека является частью стандартного лечения в Медицинском центре Лейденского университета. Получение согласия на постнатальное обследование монохориальных близнецовых плацент человека в Медицинском центре Лейденского университета не требуется.

1. Забор плаценты методом TAPS и общее исследование

  1. Используйте все человеческие монохориальные двойняшки плаценты с TAPS, введенной в любом гестационном возрасте. Сохраняйте монохориальную двойную плаценту человека как можно более неповрежденной. Доставьте монохориальную плаценту как можно мягче, если необходимо ручное удаление.
    ПРИМЕЧАНИЕ: После рождения акушерки или неонатологи должны перенести плаценты TAPS в пластиковую коробку, а затем в лабораторию.
  2. Когда родится первый ребенок, используйте один зажим, чтобы пережать пуповину, чтобы отметить порядок рождения как первый. Когда родится другой ребенок, используйте два зажима, чтобы пережать пуповину, чтобы отметить порядок рождения как второй.
  3. Исследуйте плаценту макроскопически, включая целостность плаценты, типы прикреплений пуповины, количество пупочных сосудов и общее исследование делительной мембраны для подтверждения хорионизма. Соберите междутрубную мембрану для патологической диагностики монохорионичности. Диаметр плаценты TAPS зависит от гестационного возраста.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Обследование следует проводить в течение 1 недели после родов, чтобы избежать образования адгезивных тромбов на материнской стороне.
  4. При необходимости храните плаценту в холодильнике (1–4 °C) в сухой пластиковой коробке до осмотра.

2. Подготовка плацентарной материнской стороны

  1. Обрежьте амниотическую оболочку по краю плаценты с помощью ножниц. Обратите внимание на сосуды на оболочке и на наличие веламентозного канатика для предотвращения вытекания крови из плацентарного образования.
    ПРИМЕЧАНИЕ: При введении веламентозного пуповины сосуды из пуповины перемещаются к поверхности амниотической оболочки на некоторое расстояние, прежде чем прикрепиться к плацентарному образованию. Если «голые» сосуды перерезать, кровь из плацентарной массы может вытекать и создавать беспорядок.
  2. Удаляйте тромбы осторожно, чтобы не повредить доли плаценты.
  3. Организуйте плацентарные доли с материнской стороны, чтобы устранить зазор между мочаками. Плацента обычно имеет около 15 долей и может быть идентифицирована по материнской линии.

3. Подготовка к оформлению документации

  1. Поместите плаценту на пластиковую панель материнской стороной вверх.
  2. Подвергните материнскую сторону плаценты воздействию света (равномерное распределение с помощью двух одинаковых ламп с левой и правой стороны). Используйте лампы, которые имеют функцию регулировки интенсивности света.
  3. Чтобы уменьшить отражение, делайте цифровые фотографии с помощью камеры (Таблица материалов) в условиях слабого освещения и избегайте прямого воздействия источника света.
  4. Делайте фотографии перпендикулярно материнской стороне плаценты.

4. Компьютеризированное измерение с помощью ImageJ

  1. Откройте ImageJ на компьютере, нажав на значок программы.
  2. Нажмите на «Файл», затем «Открыть», чтобы открыть изображение плаценты. Как только нужное изображение будет открыто, нажмите на "Изображение" | «Цвет», затем «Инструмент каналов», чтобы выбрать «Цвет» из выпадающего списка.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Программное обеспечение может автоматически определять цвет измеряемого объекта. Плацента красного цвета. В программном обеспечении, после нажатия кнопки «Цвет», плацентарная картинка автоматически преобразуется в красный канал спектра.
  3. Нажмите на кнопку «Произвольная выборка», чтобы соответственно оконтурить полноту и бледную долю плаценты полицитемных и анемичных близнецов путем визуального осмотра различной интенсивности цвета материнской стороны плаценты.
  4. Нажмите на кнопку "Анализировать" | "Гистограмма". Получите гистограмму интенсивности цвета после выбора обильной области или бледной области соответственно. Режим, отображаемый на гистограмме интенсивности, представляет собой цвет, который больше всего присутствует в выбранной плацентарной области.
  5. Рассчитайте отношение цветовой разницы, разделив моду интенсивности цвета анемичного двойника на моду интенсивности цвета полицитемного двойника.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Плацентарное исследование дает ценную информацию для диагностики TAPS. Плаценты TAPS характеризуются наличием небольшого количества мелких сосудистых анастомозов1 (рис. 1, рис. 2). Эта особенность плаценты TAPS связана с патогенезом TAPS и является постнатальным диагностическим критерием. Подобно цвету кожи новорожденных при рождении, доля плаценты у близнеца-реципиента при TAPS обычно темная и обильная, а доля плаценты у донорского близн...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ключевые моменты для достижения оптимального обследования на основе нашего опыта включают: 1) доставку плаценты как можно более щадяще, чтобы избежать повреждений, особенно когда показано ручное удаление; 2) осмотр плаценты МЦ вскоре после рождения во избежание образования адгезивных сгустков (желательно в течение нескольких дней); 3) щадящее удаление всех тромбов, избегая повреждения плацентарных долей; 4) воздействие на материнскую сторону плаценты МЦ равномерных условий освещения и ми...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Это исследование финансировалось Национальным фондом естественных наук Китая (номер гранта: 81801465), Медицинским проектом Саньмин в Шэньчжэне (номер гранта: SZSM201512012) и Национальной программой ключевых исследований и разработок Китая (номер гранта: 2018YFC1002900).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Шприцы 20 млBD Plastipak300613
Color dyeRoyal Talens Schoolverf36716010 (синий); 36715010 (зеленый); 36712350 (желтый); 36713570 (розовый)
Цифровой фотоаппаратCanon Inc.ixus 125 hs
ImageJ Национальныйинститут здравоохранениядля Windows ImageJ в комплекте с 64-разрядными Java 1.8.0_112
Пупочные катетерыVygon1270.08 (8 F)
1270.08 (5 F)
1270.04 (4 F)
1270.03 (3.5 F)
1270.02 (2.5 F)

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Lopriore, E., et al. Twin anemia-polycythemia sequence in two monochorionic twin pairs without oligo-polyhydramnios sequence. Placenta. 28 (1), 47-51 (2007).
  2. Zhao, D., et al. Placental share and hemoglobin level in relation to birth weight in twin anemia-polycythemia sequence. Placenta. 35 (12), 1070-1074 (2014).
  3. Lopriore, E., et al. Assessment of feto-fetal transfusion flow through placental arterio-venous anastomoses in a unique case of twin-to-twin transfusion syndrome. Placenta. 28 (2-3), 209-211 (2007).
  4. Lopriore, E., et al. Quantification of feto-fetal transfusion rate through a single placental arterio-venous anastomosis in a monochorionic twin pregnancy. Placenta. 30 (3), 223-225 (2009).
  5. Tollenaar, L. S. A., et al. Improved prediction of twin anemia-polycythemia sequence by delta middle cerebral artery peak systolic velocity: new antenatal classification system. Ultrasound in Obstetrics and Gynecology. 53 (6), 788-793 (2019).
  6. Tollenaar, L. S., et al. Color Difference in Placentas with Twin Anemia-Polycythemia Sequence: An Additional Diagnostic Criterion. Fetal Diagnosis and Therapy. 40 (2), 123-127 (2016).
  7. Zhao, D. P., et al. Prevalence, size, number and localization of vascular anastomoses in monochorionic placentas. Placenta. 34 (7), 589-593 (2013).
  8. De Paepe, M. E., Burke, S., Luks, F. I., Pinar, H., Singer, D. B. Demonstration of placental vascular anatomy in monochorionic twin gestations. Pediatric and Developmental Pathology. 5 (1), 37-44 (2002).
  9. Lewi, L., et al. Placental sharing, birthweight discordance, and vascular anastomoses in monochorionic diamniotic twin placentas. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 197 (6), 581-588 (2007).
  10. Robertson, E. G., Neer, K. J. Placental injection studies in twin gestation. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 147 (2), 170-174 (1983).
  11. Lewi, L., et al. The outcome of monochorionic diamniotic twin gestations in the era of invasive fetal therapy: a prospective cohort study. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 199 (5), (2008).
  12. Slaghekke, F., et al. Fetoscopic laser coagulation of the vascular equator versus selective coagulation for twin-to-twin transfusion syndrome: an open-label randomised controlled trial. Lancet. 383 (9935), 2144-2151 (2014).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

ImageJTAPS
Видео скоро будет доступно

Похожие статьи