Мы представляем протокол ЭКГ, который технически прост, недорог, быстр и доступен для маленьких мышей и может выполняться с повышенной чувствительностью. Мы предлагаем этот метод в качестве скринингового подхода для изучения фармакологических агентов, генетических модификаций и моделей заболеваний у мышей.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Электрокардиограмма Записи в анестетических мышей с использованием свинца II
* These authors contributed equally
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Электрокардиограмма является ценным инструментом для оценки системы проводимости сердца. Исследования на животных помогли получить новую генетическую и фармакологическую информацию об электрокардиограмме. Тем не менее, сделать измерения электрокардиограммы у мелких животных in vivo, таких как мыши, было сложной задачей. С этой целью мы использовали метод записи электрокардиограммы у обезболивания мышей со многими преимуществами: это технически простая процедура, недорогая, имеет короткое время измерения и доступна даже у молодых мышей. Несмотря на ограничения с использованием анестезии, сравнение между контрольными и экспериментальными группами может быть выполнено с повышенной чувствительностью. Мы лечили мышей с агонистами и антагонистами вегетативной нервной системы, чтобы определить достоверность этого протокола и сравнили наши результаты с предыдущими отчетами. Наш экГ-протокол обнаружил повышенные частота сердечных сокращений и интервалы на лечение атропином, снижение частота сердечных сокращений и интервалы к ТК после лечения карбабола, а также более высокие частота сердечных сокращений и интервалы с изопреналином, но не заметили никаких изменений в параметрах ЭКГ при администрировании пропранолола. Эти результаты подтверждаются предыдущими отчетами, подтверждающими надежность этого протокола ЭКГ. Таким образом, этот метод может быть использован в качестве скринингового подхода к проведению измерений ЭКГ, которые в противном случае не были бы предприняты из-за высокой стоимости и технических трудностей.
Введение
Электрокардиограмма (ЭКГ), тест, который измеряет электрическую активность своего сердцебиения, является ценным инструментом для оценки системы сердечной проводимости. Параметры, измеряемые ЭКГ, включают частоту сердечных сокращений, интервал PR, продолжительность ЗРС и интервал ЗТ. Короче говоря, PR интервал соответствует времени, которое требуется для электрического импульса для перемещения из предсердного синусового узла через атриовентрикулярный узел к волокнам Purkinje; Продолжительность ЗР – это время для деполяризации желудочков через систему Пуркинье и желудочковый миокард; и интервалом ЗТ является продолжительность ретрикулярной репаларизации.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Все процедуры для животных были одобрены местным комитетом по уходу и использованию лабораторных животных Университета Кён Хи (номер лицензии: KHUASP(SE)-18-108) и соответствовали Руководству Национальных институтов здравоохранения США по уходу и использованию лабораторных животных.
1. Экспериментальные животные
- Храните всех мышей (39 мышей, Balb/c, мужчин, 7'u20129 недель) в патоген-бесплатно объекта в соответствии с руководством для ухода и использования лабораторных животных.
- Поддерживайте мышей на 12 ч светлого/темного цикла при постоянной температуре с бесплатным доступом к пище и воде.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Фармакологические эксперименты
Чтобы определить, отражает ли наше неинвазивное измерение ЭКГ влияние вегетативной модуляции на систему сердечной проводимости, нормальные мыши Balb/c были оспорены агонистами и антагонистами вегетативной нервной системы (ANS). Атропин и карбахол были использованы для осуществления парасимпатической вегетативной блокады и стимуляции, соответственно, в то время как пропранолол и изопрореналин были введены для получения симпатической вегетативной б.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
В протоколе есть несколько важных этапов. Окружающая среда должна быть свободна от шума и вибрации. ЭЛЕКТРОДы ЭКГ должны быть вставлены под кожу стабильно и последовательно, из которых шаг вставки требует предварительных экспериментов, пока исследователь технически опытный. Кроме того, анестезия должна быть подготовлена и сохранена надлежащим образом и использоваться в надлежащей дозе. Наконец, волны ПЗРС должны располагаться соответствующим образом в отдельных ЭКГ-битах в окне усредненного просмотра.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы не декларируют никаких конфликтов интересов, финансовых или иных.
Благодарности
Эта работа была поддержана программами фундаментальных научно-исследовательских программ, которые находятся в ведении Национального исследовательского фонда Кореи (NRF) (2015R1C1AA2A0101052419 и 2018R1D1A1B07042484).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 2,2,2-трибромэтанол | Sigma-Aldrich | T48402-25G | анестетики, Avertin |
| Animal | Japan SLC, Inc., Shizuoka, Japan | Balb/c мыши, самец, в возрасте 7-9 недель | |
| Atropine | Sigma-Aldrich | A0123 | парасимпатический антагонист |
| BioAmp | AD Instruments, Bella Vista, Австралия | ML132 | биоусилитель |
| Carbachol | Парасимпатический агонист | Sigma-Aldrich | C4382 |
| Электроды с акупунктурными иглами | DongBang Acupuncture Inc., Sungnam, Korea | DB106 | 0,20 x 15 мм |
| Изопреналин | Sigma-Aldrich | I2760 | симпатический агонист |
| LabChart 8 | AD Instruments, Bella Vista, Австралия | программное обеспечение для анализа данных | |
| Mouse food | LabDiet, Сент-Луис, Миссури, США | 5L79 | Мышиная диета |
| PowerLab 2/28 | AD Instruments, Bella Vista, Австралия | система сбора данных | |
| Propranolol | Sigma-Aldrich | P0884 | симпатический антагонист |
| SPSS Статистическая программа SPSS | SPSS 25.0 | Статистическая программа | SPSS |
Ссылки
- Ho, D., et al. Heart rate and electrocardiography monitoring in mice. Current Protocols in Mouse Biology. 1, 123-139 (2011).
- Vatner, S. F., Takagi, G., Asai, K., Shannon, R. P. Cardiovascular physiol....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
