Method Article

Постепенные изменения температуры для максимального размножения и нереста у Astyanax mexicanus

DOI:

10.3791/61708

February 14th, 2021

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В данной статье изложены основные лабораторные условия и протоколы для инкрементального температурного режима для стимуляции максимального нереста у мексиканской тетра Astyanax mexicanus,которая является формирующейся моделью для исследований развития и эволюции.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Мексиканская тетра, Astyanax mexicanus,является формирующейся модельной системой для исследований в области развития и эволюции. Существование глазных поверхностных (поверхностных рыб) и слепых пещерных (пещерных рыб) морфов у этого вида дает возможность исследовать механизмы, лежащие в основе морфологической и поведенческой эволюции. Пещерные рыбы развили новые конструктивные и регрессивные черты. Конструктивные изменения включают увеличение вкусовых рецепторов и челюстей, органов чувств боковой линии и жира в организме. Регрессивные изменения включают потерю или уменьшение глаз. пигментация меланина, школьное поведение, агрессия и сон. Чтобы экспериментально исследовать эти изменения, крайне важно получить большое количество порожденных эмбрионов. С тех пор, как оригинальные поверхностные рыбы A. mexicanus и пещерные рыбы были собраны в Техасе и Мексике в 1990-х годах, их потомков регулярно стимулировали к размножению и нересту большого количества эмбрионов два раза в год в лаборатории Джеффри. Хотя размножение контролируется изобилием и качеством пищи, светло-темными циклами и температурой, мы обнаружили, что постепенные изменения температуры играют ключевую роль в стимулировании максимального нереста. Постепенное повышение температуры с 72 ° F до 78 ° F в первые три дня недели размножения обеспечивает два-три последовательных нерестовых дня с максимальным количеством высококачественных эмбрионов, за которым следует постепенное снижение температуры с 78 ° F до 72 ° F в течение последних трех дней нерестовой недели. Процедуры, показанные в этом видео, описывают рабочий процесс до и во время недели лабораторной селекции для стимуляции нереста с добавочной температурой.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Телеост Astyanax mexicanus имеет глазкую поверхностно-обитую (поверхностную рыбу) форму и множество различных слепых пещерных (пещерных рыб) форм1,2. Пещерные рыбы эволюционировали в вечной темноте и под ограничениями пищи, что привело к появлению новых конструктивных и регрессивных черт3. Конструктивные черты включают увеличение вкусовых рецепторов и размера челюсти, органов чувств боковой линии и жировых запасов. Регрессивные черты включают потерю или уменьшение пигментации меланина, глаз и поведения, таких как сон, школьное образование и агрессия. Атрибутом системы Astya....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта процедура была одобрена руководящими принципами институционального ухода за животными Университета Мэриленда, Колледж-Парк (в настоящее время IACUC 469 #R-NOV-18-59; Проект 1241065-1).

figure-protocol-1
Рисунок 1. Календари в течение недели размножения и недели без разведения. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

1. Понеде....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Как правило, мы разводим и нерестим потомков поверхностных рыб, первоначально собранных в Насимиенто-дель-Рио-Чой в Сан-Луис-Потоси, Мексика (поверхностная рыба Рио-Чой) и Сан-Соломон-Спрингс в государственном парке Балморхеа, штат Техас (техасская поверхностная рыба), и пещерных рыб, полученных из Куэва-де-Эль-Пашон (пещерная рыба Пачон) в Тамаулипасе, Мексика, и Куэва-де-лос-Сабинос (пещерная рыба Лос-Сабинос) и Сотано-де-ла-Тинаха (пещерная рыба Тинаха) в Сан-Луис-Потоси Мексика.

В течение .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Astyanax mexicanus - это новая биологическая модель, которая часто нерестится и может быть легко выведена в лаборатории1,2. Поскольку мы заинтересованы в механизмах развития, лежащих в основе эволюционных изменений в пещерных рыбах A. mexicanus, производство и использование эмбрионов имеет жизненно важное значение для наших исследовательских целей. Основной целью поддержания взрослого поголовья рыб является производство эмбрионов и молодых мальк.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторам нечего раскрывать.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Мы благодарим Дэвида Мартасяна, Дидре Хейзера, Эми Паркхерст, Крейга Фута и Мэнди Нг за ценный вклад в культурный центр лаборатории Джеффри A. mexicanus. Исследования в лаборатории Джеффри в настоящее время поддерживаются грантом NIH EY024941.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
BlackwormsEastern Aquatics, Ланкастер, ПенсильванияНет
Сети для разведения Изготовленныена заказ
яйца морских креветокAquaCave Lake Forest, Иллинойс.Нет
Колориметрический набор для тестированияPetcoАртикул:11916API Набор для тестирования pH пресной воды
Хлопья яичного желткаPentair, Миннеаполис, МиннесотаНет
Пальчиковые чашиКаролина Биологическое снабжение741004Тарелки для культур, 4,5 дюйма, 250 мл
Ручные сеткиЛюбой зоомагазин
Инкубатор для эмбрионовFisher Scientific51-029-321HPM405 л
Растворимые морские солиSpectrum Brands, Блэксбург, ВирджинияНет
Метиленовый синийSigma-Aldrich, Сент-Луис, МиссуриM9140
Пастеровские пипеткиFisher Scientific13-678-205.75 in.
Решение для замачивания сеткойЛюбой зоомагазин
Nutrafin CycleAmazonNoneБактериальный буст
Холодильник для живой подачиЛюбой источник
СтереомикроскопЛюбой источник
ТермометрЛюбой источник
Tetra Tropical CrispsSpectrum Brands, Блэксбург, ВирджинияНет

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jeffery, W. R. Cavefish as a model system in evolutionary developmental biology. Developmental Biology. 231, 1-12 (2001).
  2. Jeffery, W. R. Emerging model systems in evo-devo: cavefish and mechanisms of microevolution. Evolution & Development....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Astyanax mexicanusSurface FishCave FishIncremental TemperatureEmbryo CollectionBreeding ProtocolSpawning StimulationEmbryo StagingIncubator SetupWater Temperature

Related Articles