Методическая статья

Универсальный комплект на основе цифровой микрофлюиды Droplet Actuation для научного образования

DOI:

10.3791/61978

26 апреля 2021 г.

В этой статье

Краткое содержание

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Мы описываем образовательный набор, который позволяет пользователям выполнять несколько экспериментов и получить практический опыт работы с цифровой микрофлюидой.

Аннотация

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В настоящем документе описывается образовательный комплект, основанный на цифровой микрофлюиде. В качестве конкретного примера приводится протокол эксперимента по химилюминесценции на основе люминола. Он также имеет флуоресцентные изображения и закрытый увлажненные корпуса на основе ультразвукового форсунки для предотвращения испарения. Комплект может быть собран в течение короткого периода времени и с минимальным обучением электронике и припою. Комплект позволяет как студентам/аспирантам, так и энтузиастам получить практический опыт работы с микрофлюидой интуитивно и быть обученными знакомству с цифровой микрофлюидой.

Введение

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Микрофлюиды является весьма междисциплинарной области расчесывания физики, химии, биологии и инженерии для манипуляции небольшой объем жидкостей, начиная от фемтолитров до микролитров1. Микрофлюиды также является очень широким и активным полем; Поиск Web of Science возвращает почти 20 000 публикаций, и все же не хватает литературы и обзорных работ по использованию микрофлюиды в качестве учебногопособия 2. Есть две проницательные, хотя и устаревшие обзорные статьи Легге и Финченко3,4. Legge знакомит педагогов с идеей лаборатории на чипе3. Финченко указал на роль лаборатории микрофлюиды в обучении научно-технологической инженерной математике (STEM) и упростил философию в "учить микрофлюидуиду" и "использовать микрофлюидуиду"4. Более поздний обзор Rackus, Ridel-Kruse и Pamme в 2019 году указывает на то, что в дополнение к междисциплинарному характеру, микрофлюиды также очень практический вопрос2. Практическая деятельность, связанная с практикой микрофлюиды, предоставляет учащимся обучение на основе исследований и делает его привлекательным инструментом для научной коммуникации и информационно-пропагандистской работы. Микрофлюиды действительно предлагает большой потенциал для научного образования в формальной и неформальной обстановке, а также является идеальным "инструментом", чтобы воодушевить и просвещать общественность о междисциплинарном аспекте современных наук.

Такие примеры, как недорогие микроканальные устройства, бумажная микрофлюиду и цифровая микрофлюиды, являются идеальными инструментами для образовательных целей. Среди этих платформ, цифровые микрофлюиды остается эзотерической и рецензируемых докладов, основанных на цифровой микрофлюидыне хватает 2. Здесь мы предлагаем использовать цифровую микрофлюиду в качестве образовательного инструмента по нескольким причинам. Во-первых, цифровая микрофлюиду очень отличается от микроканальной парадигмы, поскольку она основана на манипуляции каплями и использовании капель в качестве дискретных микровесов. Во-вторых, капельками манипулируют на относительно общих электродных платформах, поэтому цифровая микрофлюида может быть тесно соединена с микроэлектроникой. Пользователи могут использовать расширенный набор электронных компонентов, теперь очень доступны для сделай сам приложений в электронном интерфейсе с каплями. Таким образом, мы утверждаем, что цифровые микрофлюиды могут позволить студентам испытать эти уникальные аспекты и быть открытыми не слишком придерживаться микроканальной основе низкой Рейнольд номер микрофлюиды1.

Короче говоря, область цифровой микрофлюиды в значительной степени основана на явлениях электроодкивания, которые были впервые описаны ГабриэльЛиппманн 5,6. Последние события были инициированы Берже в начале 1990-хгодов 7. Его ключевым вкладом является идея введения тонкого изолятора для отделять проводящие жидкости от металлических электродов, чтобы устранить проблему электролиза. Эта идея была термином, как электроотвод на диэлектрических (EWOD). Впоследствии цифровая микрофлюиды была популяризирована несколькими исследователями-первопроходцами8,9. Теперь полный список приложений, например, в клинической диагностике, химии и биологии, былдоказан на цифровой микрофлюиды 10,11,12 и, следовательно, множество примеров доступны для образовательных учреждений. В частности, по линии низкой стоимости, сделай сам цифровые микрофлюиды, Абдельгавад и Уилер ранее сообщали о недорогих, быстрых прототипах цифровых микрофлюидов13,14. Fobel и др., также сообщил DropBot как с открытым исходным кодом цифровой микрофлюидной системы управления15. Yafia и др., также сообщили портативные цифровые микрофлюиды на основе 3D печатных частей и меньше телефон16. Alistar и Gaudenz также разработали платформу OpenDrop на батарейках, которая основана на транзисторном массиве полевого эффекта и активацииDC 17.

Здесь мы представляем цифровой микрофлюиды образовательный комплект на основе коммерчески источников печатной платы (PCB), что позволяет пользователю собирать и получать практический опыт работы с цифровой микрофлюиды (Рисунок 1). Плата за услуги по созданию ПКБ из цифровых файлов дизайна широко доступна, и поэтому мы считаем, что это жизнеспособное недорогое решение для образования при условии, что цифровые файлы дизайна могут быть общими. Тщательный выбор компонентов и системного дизайна сделан для упрощения процесса сборки и создания интерфейса с интуитивно понятным пользователем. Таким образом, конфигурация одной пластины используется вместо двух пластин конфигурации, чтобы избежать необходимости в верхней пластине. Как компоненты, так и испытательные химические вещества должны быть легко доступны. Например, пищевая пленка из супермаркета используется в качестве изолятора в нашем комплекте.

Чтобы доказать осуществимость нашего комплекта, мы предлагаем конкретный химический эксперимент, основанный на химилюминесценции люминола и предоставляем протокол. Есть надежда, что визуальное наблюдение за химилюминесценцией может воодушевить и возбудить студентов. Luminol является химическим веществом, которое проявляет синее свечение при смешивании с окисливляющеевещество, такое какH 2 O2 и, как правило, используется в судебно-медицинской экспертизы дляобнаружения крови 18. В нашей лабораторной обстановке катализатором выступает феррикианин калия. Люминол реагирует с ионом гидроксида и образует дианион. Впоследствии дианион реагирует с кислородом из перекиси водорода, чтобы сформировать 5-аминофталиновой кислоты с электронами в возбужденном состоянии, и расслабление электронов от возбужденного состояния до состояния земли приводит к фотонам, видимым как взрыв синего света.

Мы также сообщаем об эксперименте с флуоресцентной визуализацией со смартфоном, чтобы продемонстрировать интеграцию светоизлучающего диода (LED) в качестве источника возбудительного света. Наконец, испарение капель является проблемой микрофлюиды, но редко решается. (1 йл капли воды теряется в пределах 1 ч от открытого субстрата3.) Мы используем распылитель на основе высокочастотного преобразователя пьезо для преобразования воды в мелкий туман. Это создает увлажняемую среду для предотвращения испарения капель и демонстрирует долгосрочную активацию капель (1 ч).

figure-introduction-1
Рисунок 1: Схема EWOD создана. (a) Микроконтроллер используется для обеспечения последовательности управления электродом EWOD. Кроме того, влажность контролируется. b)Схема макета ПХД. Помечены электроды, светодиоды для флуоресцентных изображений, резистор и транзисторы полевого эффекта (FET). Также показана шкала бар 1 см. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.

figure-introduction-2
Рисунок 2: Верхний вид комплекта. Помечены доска микроконтроллера, высоковольтная доска питания, EWOD PCB, датчик влажности и распылитель. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1) Сборка комплекта цифровой микрофлюиды

  1. Solder резисторы поверхностного крепления, транзисторы и светоизлучающие диоды на доске ПХД в соответствии со схемами на рисунке 1b.
  2. Подключите выход высоковольтной доски питания к доске ПХД с припойными компонентами(рисунок 2 и дополнительный рисунок 1).
  3. Подключите батарею к доске усилителя напряжения, чтобы увеличить напряжение с 6 V до 12 V(рисунок 2 и дополнительный рисунок 1).
  4. Подключите высоковольтную доску питания к доске усилителя напряжения, чтобы увеличить напряжение с 12 V до 230 V(рисунок 2 и дополнительный рисунок 1).
  5. Подключите датчик влажности к доске микроконтроллеров. Подключите ультразвуковой распылитель пьезо и доску драйвера форсунки к доскемикроконтроллеров (рисунок 2 и дополнительная цифра 1).
  6. Поместите всю сборку в акриловый корпус размеров 23 см х 20,5 см х 6 см.
  7. Включите микроконтроллер с кодом(дополнительныйкод) и используйте цифровой мультиметр для измерения напряжения электрода EWOD, чтобы убедиться, что выходное напряжение составляет 230 В. Отрегулируйте переменный резистор высоковольтной доски питания таким образом, чтобы выходное напряжение составило 230 В (Дополнительная цифра 2).

2) Подготовка изолятора на электродной решетке

  1. Носите чистые нитриле перчатки. Используйте микропипюту, чтобы наложить 10 йл из 5 cSt силиконового масла на область электрода и использовать палец для равномерного распространения силиконового масла на области электрода. Обратите внимание, что силиконовое масло служит в качестве заполнения между электродом и пищевой оберткой изолятора и, чтобы избежать каких-либо воздушных кранов.
  2. Вырезать кусок пищевой пленки с размерами около 2,5 см х 4 см и поместить его на верхней части электрода. Используйте micropipette для применения 10 йл 5 cSt силиконового масла на области электрода и использовать палец для равномерного распространения силиконового масла. Обратите внимание, что силиконовое масло служит гидрофобным слоем поверх изолятора.

3) Эксперимент по химилюминесценции на основе люминола

  1. Смешайте 0,25 г люминола и 1,6 г NaOH в 25 мл деионизированной воды в стакане со стеклянным мешалки, чтобы получить раствор.
  2. Смешайте 20 мл раствора с предыдущего шага с 20 мл 3% перекиси водорода.
  3. Используйте микропипюту, чтобы поместить 2-5 МКЛ раствора люминола с предыдущего шага на электрод цели.
  4. Используйте микропипет для того чтобы поместить 10 l 0.1% w/w феррикяид калия на электроде. Обратите внимание, что это капля, которая будет перемещена для электроодкивания.
  5. Включите микроконтроллер, чтобы переместить 10 капли калия феррикязида, чтобы слиться с люминолом.

4) Флуоресцентный эксперимент изображений

  1. Вырежьте кусок полупрозрачной ленты с габаритами 1 см х 1 см. Поместите полупрозрачную ленту между возбуждающим светоизлучающим диодом и электродами EWOD.
  2. Прикрепите фильтр излученного цвета стекла на камеру смартфона лентой.
  3. Смешайте 2,5 мг фторсхейна изотиоцианата в растворе аквеозного этанола (3% ж/в).
  4. Пипетка 10 мкл раствора с предыдущего шага на одном из электродов.
  5. Включите микроконтроллер.
  6. Используйте смартфон для записи видео droplet актуации.

5) Долгосрочный эксперимент по активации капель с ультразвуковым форсункой

  1. Поместите 1 мл воды на ультразвуковой распылитель. Обратите внимание, что код написан с использованием алгоритма пороговой обратной связи для поддержания уровня влажности более 90%.
  2. Поместите каплю 10 МКЛ с микропайпеттом. Включите микроконтроллер и немедленно закройте крышку корпуса.
  3. Подождите 1 ч. Визуально проверьте актуацию капель.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Актуация капель записывается с помощью смартфона. Репрезентативные результаты по химилюминесценции и флуоресцентной визуализации отображаются на рисунке 3 и рисунке 4. Для эксперимента по химилюминесценции капля 10 йл феррикианида приводируется для перемещения и смешивания с предварительно отложенной каплей 2 МКЛ на целевом электроде, как показано на рисунке 3. Период времени между последовательными ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Описанная здесь процедура позволяет читателю собрать и протестировать рабочую систему EWOD для активации капель и получить практический опыт работы с микрофлюидой. Мы намеренно избегаем дорогих компонентов и химических образцов. В настоящее время, один комплект может быть построен за $ 130 с самым дорогим компонентом является оптическое цветное стекло для флуоресцентных изображений и микроконтроллера за исключением пользовательских акриловый корпус (Дополнительный таблица 1). Для такой стоимости, флуорес...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторов нечего раскрывать.

Благодарности

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Y. T. Y. хотел бы отметить финансовую поддержку со стороны Министерства науки и техники в соответствии с номерами грантов MOST 107-2621-M-007-001-MY3 и Национального университета Цин Хуа в рамках гранта номер 109-2702E1. Марк Курбан из Edanz Group (https://en-author-services.edanzgroup.com/ac) отредактирован проект этой рукописи.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Акриловый корпусМЕСТНЫЙ поставщик23см x 20,5 см x 6см
Ardunion UnoArduinoUNOмикроконтроллерная плата
уксусная кислотаSigma Alrich695092-100ML
Макетная платаMCIGICM400tie4 см x 7 см, 400 точек Беспаяная макетная плата, упаковка из 4
BSP89 H6327 Infineon MOSFET;Мышелов726-BSP89H6327дренажный фильтр напряжения пробоя 240В,на сопротивление 4,2 Ом
цитридная кислотасигма Alrich251275-100G
Цветной стеклянный фильтр ThorlabsFGL 530цветной стеклянный фильтр для флуоресцентной визуализации
DHT11 датчик температуры и влажностиadafruit
цифровой мультиметр Fluke17B
Флуоресцеин изотиоцианат Iсигма AlrichF7250-50MG50 мг цена, флуоресцентная визуализация
ГлицеринSigma AlrichG9012-500ML
Высоковольтный блок питания для Nixe tubeVaorwneNCH6100HVВысокое напряжение максимальная мощность постоянного тока 235 В
LM2596 напряжение усилитель цепиповышение напряжения напряжение от 5 В до 12 В
LuminolSigma Alrich123072-5G5 г за $110
PippetThermal Fisher1- 10 мкл
Печатная плата Местный вендер10 штук за $60
Пластиковая пищевая пленкаKirklandStretch-tite пищевая пленка Полиэтиленовая пищевая пленка
Феррицинид калияMerck1049821 кг
1Н раствор гидроксида калия (1 моль/л)Шарлау 1 литр
Прозрачная офисная лента 3 мм3М Скотчполупрозрачный, используется в качестве диффузора для подсветки
сольGreat Value Йодированная соль6 унций за 7 долларов соль из супермаркета
Силиконовое масло (5Cst)Sigma Alrich317667-250 млверхний гидрофобный слой и заполняющий слой между электродом и изолятором
сахарозастоловый сахар  из любого супермаркета, 6 долларов за фунт
Поверхностный монтаж синий светодиодозний3528озний 20 штук PLCC-2 Светодиоды для поверхностного монтажа, 3528 Размер SMD SMT LED - СИНИЙ
Резистор поверхностного монтажа 180k ОмBalance World Inc3 мм x 6 мм 1 ватт
Резистор поверхностного монтажа 510 ОмBalance World Incрезистор смещения для светодиода, 3 мм x 6 мм 1 ватт
Распылитель водыGrove рабочая частота 100 кГц; напряжение питания 5В не более 2 Вт; В комплект входит ультразвуковой преобразователь
высоковольтный транзистор

Ссылки

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Convery, N., Gadegaard, N. 30 years of microfluidics. Micro and Nano Engineering. 2, 76-91 (2019).
  2. Rackus, D. G., Ridel-Kruse, I. H., Pamme, N. Learning on a chip: Microfluidics for formal and informal science education. Biomicrofluidics. 13, 041501(2019).
  3. Legge, C. H. Chemistry under the microscope-Lab on a chip technologies. Journal of Chemical Education. 79, 173(2002).
  4. Fintschenko, Y. Education: a modular approach to microfluidics in the teaching laboratory. Lab On A Chip. 11, 3394(2011).
  5. Mugele, F., Baret, J. -C. Electrowetting: from basics to applications. Journal of Physics: Condensed Matter. 17, 705-774 (2005).
  6. Lippmann, G. Relations entre les phenomenes electriques et capillary. Ann. Chim. Phys. 6, 494(1875).
  7. Berge, B. Electrocapillarite et mouillge de films isolant par l'eau. C. R. Acad. Sci. II. 317, 157(1993).
  8. Pollack, M. G., Fair, R. B., Shenderov, A. D. Electrowetting-based actuation of liquid droplets for microfluidics applications. Applied Physics Letters. 77, 1725(2000).
  9. Lee, J., Kim, C. J. Surface-tension-driven microactuation based on continuous electrowetting. Journal of Microelectromechanical Systems. 9 (2), 171(2000).
  10. Choi, K., Ng, A. H. C., Fobel, R., Wheeler, A. R. Digital Microfluidics. Annual Review of Analalytical Chemistry. 5, 413-440 (2012).
  11. Jebrail, M. J., Wheeler, A. R. Let's get digital: digitizing chemical biology with microfluidics. Current Opinion in Chemical Biology. 14, 574-581 (2000).
  12. Pollack, M. G., Pamula, V. K., Srinivasan, V., Eckhardt, A. E. 2011. Applications of electrowetting-based digital microfluidics in clinical diagnostics. Expert Review of Molecular Diagnostics. 11, 393-407 (2011).
  13. Abdelgawad, M., Wheeler, A. R. Rapid prototyping in copper substrates for digital microfluidics. Advanced Materials. 19 (1), 133-137 (2007).
  14. Abdelgawad, M., Wheeler, A. R. Low-cost, rapid-prototyping of digital microfluidics devices. Microfluidics and Nanofluidics. 4, 349-355 (2008).
  15. Fobel, R., Fobel, C., Wheeler, A. R. DropBot: an open-source digital microfluidic control system with precise control of electrostatic driving force and instantaneous drop velocity measurement. Applied Physics Letters. 102, 193513(2013).
  16. Yafia, M., Ahmadi, A., Hoorfar, M., Najjaran, H. Ultra-portable smartphone controlled integrated digital microfluidic system in a 3D-printed modular assembly. Micromachines. 6 (9), 1289-1305 (2015).
  17. Alistar, M., Gaudenz, U. OpenDrop: an integrated do-it-yourself platform for personal use of biochips. Bioengineering. 4 (2), 45(2017).
  18. Khan, P., et al. Luminol-based chemiluminescent signals: clinical and non-clinical application and future uses. Applied Biochemistry and Biotechnology. 173 (2), 333-355 (2014).
  19. Agresti, J. J., et al. Ultrahigh-throughput screening in drop-based microfluidics for directed evolution. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (9), 4004-4009 (2010).
  20. Microfluidics. , Available from: https://microfluidics.utoronto.ca/dropbot/ (2020).
  21. Busnel, J. M., et al. Evaluation of capillary isoelectric focusing in glycerol-water media with a view to hydrophobic protein applications. Electrophoresis. 26, 3369-3379 (2005).
  22. Chatterjee, D., Shepherd, H., Garrell, R. L. Electromechanical model for actuating liquids in a two plate droplet microfluidic device. Lab On A Chip. 9, 1219-1229 (2009).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи