В городе Ово Внутрисосудистая инъекция куриным эмбрионам

Kai Jin; Jing Zhou; Gaoyuan Wu; Ziyi Lian; Zongyi Zhao; Shujian Zhou; Chen Chen; Hongyan Sun; Yingjie Niu; Qishenng Zuo; Yani Zhang; Jiuzhou Song; Guohong Chen; Bichun Li

doi:10.3791/63458

Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

В городе Ово Внутрисосудистая инъекция куриным эмбрионам

7.4K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/63458

⸱

3 июня 2022 г.

Kai Jin¹^,² , Jing Zhou¹^,² , Gaoyuan Wu¹^,² , Ziyi Lian¹^,² , Zongyi Zhao¹^,² , Shujian Zhou¹^,² , Chen Chen¹^,² , Hongyan Sun¹^,² , Yingjie Niu¹^,² , Qishenng Zuo¹^,² , Yani Zhang¹^,² , Jiuzhou Song³ , Guohong Chen¹^,² , Bichun Li¹^,²^,⁴

¹Joint International Research Laboratory of Agriculture and Agri-Product Safety of Ministry of Education of China, Yangzhou University, ²Key Laboratory of Animal Breeding Reproduction and Molecular Design for Jiangsu Province, College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, ³Animal & Avian Sciences, University of Maryland, College Park, ⁴College of Biotechnology, Jiangsu University of Science and Technology

В этой статье

Краткое содержание

Общей целью данной работы является описание того, как выполнить внутриклеточную инъекцию экзогенных материалов в куриные эмбрионы. Такой подход очень полезен для изучения биологии развития куриных эмбрионов.

Аннотация

В качестве классической модельной системы биологии эмбрионов куриный эмбрион был использован для исследования эмбрионального развития и дифференцировки. Доставка экзогенных материалов в куриные эмбрионы имеет большое преимущество для изучения функции генов, трансгенного разведения и подготовки химер во время эмбрионального развития. Здесь мы показываем метод внутрисосудистой инъекции in ovo, при котором экзогенные материалы, такие как плазмидные векторы или модифицированные первичные половые клетки (PGC), могут быть перенесены в донорские куриные эмбрионы на ранних стадиях развития. Результаты показывают, что внутрисосудистая инъекция через дорсальную аорту и головку позволяет введенным материалам диффундировать во весь эмбрион через кровеносную систему. В представленном протоколе эффективность введения экзогенных плазмидных и лентивирусных векторов, а также колонизация вводимых экзогенных ПГК в гонаду-реципиента определялись путем наблюдения флуоресценции у эмбрионов. В данной статье подробно описаны процедуры этого метода, тем самым обеспечивая отличный подход к изучению функции генов, биологии эмбриона и развития, а также производства гонадно-химерной курицы. В заключение данная статья позволит исследователям с большим успехом и воспроизводимостью выполнить внутрисосудистую инъекцию экзогенных материалов в куриные эмбрионы.

Введение

Куриные эмбрионы широко использовались на протяжении веков в развитии, иммунологическом, патологическом и других биологических применениях ^1,2,3. Они имеют много неотъемлемых преимуществ перед другими животными моделями в изучении токсикологии и клеточной биологии⁴. Куриные эмбрионы легко доступны и могут манипулироваться in vitro и непосредственно наблюдаться на любой стадии развития, что обеспечивает удобную систему моделирования эмбрионов.

В целом, современные методы доставки куриного эмбриона, такие как электрот....