$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
1. Предварительная характеристика
- Выполните полную предварительную характеристику образца.
- Проведите все эксперименты на сухих образцах, приобретенных из коммерческого источника. Храните образцы в лаборатории, в сухом и темном месте, при комнатной температуре.
- Перед голографическими измерениями выполните полную характеристику образца с помощью сканирующего электронного микроскопа (SEM), линейной оптической спектроскопии и нелинейной оптической микроскопии (NOM)10 (рисунок 1).
- Помимо оптических свойств образцов, измеренных линейными методами, собирают дополнительную информацию лазерными лучами более высокой интенсивности, позволяющими охарактеризовать их нелинейные оптические свойства.
- Использовать соответствующие нелинейные оптические восприимчивости для количественной оценки нелинейного оптического отклика и составлять основу нелинейных оптических методов, таких как неразрушающая многофотонная флуоресценция возбуждения и генерация второй гармоники (SHG), которые используются для характеристики различных биологических образцов.
- Для нелинейных химических явлений, происходящих в колеблющейся реакции БР, проводят исследование интерферометрического мониторинга фазового перехода in situ из состояния I в состояние II со следующими концентрациями реагентов: [CH2(COOH)2]0 = 0,0789 моль dm-3, [MnSO4]0 = 0,0075 моль dm-3, [HClO4]0 = 0,03 моль dm-3, [КИО3] 0 = 0,0752 моль дм-3 и [Н2O2]0 = 1,269 моль дм-3 (0 после кронштейна означает начальную концентрацию в начале процесса). Сделать общий объем, используемый для реакции БР, равным 2,5 мл.
ПРИМЕЧАНИЕ: Значения концентрации, используемые здесь, равны значениям в исследовании Pagnacco et al.8, но с объемом реакции, деленным на 10.
- Подготовьте образец для эксперимента.
- Используйте для этого эксперимента крылья королевы Испании фритиллярной бабочки I . lathonia . Поместите крыло на твердую поверхность и сделайте сечение с фрезой диаметром 10 мм. Поместите образец в ящик для образцов, в котором может быть любой контейнер с крышкой.

Рисунок 1: Волнистое поперечное сечение шкалы крыла бабочки. Поперечное сечение регистрировали на нелинейном оптическом сканирующем микроскопе (А,В). Также было проведено наблюдение SEM (C) крыла королевы Испании фритиллярной бабочки, I. lathonia. Эта цифра была изменена с14. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
2. Экспериментальная установка
- Голографическая установка
ПРИМЕЧАНИЕ: Голографические интерферометрические измерения проводились с помощью специальной оптической установки (рисунок 2).
- Отрегулируйте лабораторную температуру до 23 °C ± 0,2 °C. Включите лазер. Для этих голографических наблюдений используйте лазер ( подробности приведены в Таблице материалов) с длиной волны возбуждения 532 нм.
- Проверьте выравнивание оптических элементов (рисунок 2). Во-первых, проверьте, что настройка выполнена по схеме, показанной на рисунке 2.
- Идеально выровняйте лазерный луч с вогнутым зеркалом M. Проверьте и отрегулируйте положение оптического расширителя луча (L).
- Определите часть пучка, которая воздействует на образец S и убедитесь, что он образует рефлекторный пучок O. Проверьте, собрана ли остальная часть пучка на сферическом зеркале CM, которое будет использоваться для генерации опорного пучка R. Проверьте, находится ли детектор C в зоне интерференции двух указанных пучков.
ПРИМЕЧАНИЕ: В качестве детектора используется датчик комплементарного полупроводника оксида металла (CMOS).
- Настройте камеры в соответствии с инструкциями для используемой камеры. Установите оптическую/фотографическую камеру для голографического эксперимента, как показано на рисунке 2 (C - камера; подробности приведены в таблице материалов). Установите вторую оптическую/фотографическую камеру для просмотра видимых изменений в реакции BR и тепловизионную камеру с тепловым разрешением 50 мК и фокусным расстоянием 13 мм над оптическим столом.
ПРИМЕЧАНИЕ: Камера, используемая в голографическом эксперименте, не использует объектив; свет непосредственно врезается в чип.
- Подготовьте образец в голографическую установку.
- Подготовьте образец крыла, как показано на этапе 1.2.1. Поместите подготовленный образец на круглую металлическую опору диаметром 15 мм. Опора имеет три существующих отверстия для винтов, к которым прикреплено металлическое кольцо, удерживающее образец.
- Прикрепите кольцо к опоре. Поместите прилагаемый образец в часть крепления для образца, расположенную на оптическом столе.
- Подготовьте образец для мониторинга химической реакции. На оптическом столе, в предполагаемом месте, поместите опору с плоской клеевой поверхностью, на которую будет помещена кювета/сосуд.
- Подготовьте реагент, используемый для инициализации реакции, как на этапе 1.1.5. Наполните реагенты в кювету и перемешайте в кювете в следующем порядке объемов и концентраций: 0,7 мл 0,2817 моль dm-3 CH2(COOH)2; 0,5 мл 0,0375 моль дм-3 MnSO4; 0,5 мл 0,15 моль дм-3 HClO4; 0,5 мл 0,376 моль дм-3 КИО3; и 0,3 мл 10,575 моль дм-3 Н2О2.
- Убедитесь, что общий объем кюветы составляет 2,5 мл, и поместите его на опору в установке.
- При необходимости настройте дополнительные инструменты. Для мониторинга фотофоретического эффекта используйте дополнительный лазер (подробности приведены в Таблице материалов) для локального нагрева.

Рисунок 2: Голографическая установка. На рисунке показано, как расположены различные компоненты для голографического эксперимента. Сокращения: L1 = лазер на 532 нм, L = двояковыпуклая линза, A = диафрагма, M = плоское зеркало, используемое для отклонения лазерного луча, CM = вогнутое зеркало, C = CMOS-камера, S = секция крыла бабочки, R = опорный луч, O = объектный луч. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
3. Настройка используемого программного обеспечения
ПРИМЕЧАНИЕ: Для анализа данных голографических экспериментов используется собственное программное обеспечение C++, основанное на приближенииФренеля 11 . Программное обеспечение, разработанное для представленного исследования, можно найти по адресу . 12 Детали программного обеспечения не могут быть опубликованы в данный момент; однако дополнительная информация будет предоставляться по запросу. Приближение Френеля чрезвычайно полезно в цифровой голографии, поскольку оно фокусируется на разных поверхностях и приближается к области первого дифракционного порядка, который содержит полную информацию о записанной сцене.
- Включите компьютер и запустите программное обеспечение.
ПРИМЕЧАНИЕ: Шаг запуска программного обеспечения зависит от самого программного обеспечения. Коммерческого программного обеспечения для этой цели не существует.
4. Проведите эксперимент
- Выключите внешний свет. Проведите весь эксперимент в темной комнате.
- Синхронизируйте камеры, используя выбранный интервал. Для этого эксперимента запустите голографическую камеру через 60 с, а две другие камеры сразу после нее, используя либо программное обеспечение, либо вручную.
- Нажмите кнопки записи и определите в программном обеспечении, когда начнется запись.
- Индуцировать динамические изменения в интересующей системе. Способ инициации зависит от типа образца; в случае фотофоретического эффекта наружно нагревают образец с помощью имеющихся лазеров: 450 нм, 532 нм, 660 нм, 980 нм. В случае реакции БР начните реакцию, перемешав химические реагенты. Наблюдайте за голографическим экспериментом.
- Установите фотографическую и тепловизионную камеру, чтобы следить за всем экспериментом и определять момент окончания голографической записи по оптическим и тепловым измерениям.
- Объявите об окончании процесса. Окончание записи предварительно запрограммировано, в соответствии с предполагаемой продолжительностью процесса. Для реакции BR используйте затвердевание в качестве конца реакции. В случае с фотофоретическим эффектом такого специфического момента нет. В любом случае, этот шаг подчеркивает важность тройной записи.
5. Получение результатов12
- Сохраните результаты. Точная сортировка файлов в зависимости от времени для реконструкции голограмм и более глубокого анализа данных.
ПРИМЕЧАНИЕ: На этом этапе данные передаются с камеры, используемой для голографии, на компьютер (жесткий диск) в папки, названные в честь дат съемки. Используйте кнопки копирования/вставки и переименования.
- Проверьте голограмму зонда на наличие соответствующих настроек. Таким образом, лучшие настройки выбираются на первой голограмме, глядя на нее, а затем используются для реконструкции всех голограмм.
- Выберите одну голограмму, нажав на одну из них из папки, которую вы ранее сделали (шаг 5.1), и сделайте реконструкцию, нажав на кнопку Реконструировать .
- Измените настройки, чтобы получить наилучшее изображение и сделать реконструкцию снова. На экране (меню программного обеспечения) появятся опции для настройки таких параметров, как выборка, смещение и расстояние Френеля. Повторяйте эти шаги до тех пор, пока не будут определены наилучшие параметры.
- Выполните реконструкции. Выберите все голограммы, нажав кнопку «Открыть файл» и выбрав все файлы. Применить нужные параметры для численной реконструкции голограмм; они остаются неизменными после шага 5.2.1, поэтому на этот раз не выполняйте никаких действий.
- Выполните реконструкции с помощью кнопки Reconstruct и интерферограмм, вставив имена файлов в поле start with/end with, а затем нажав кнопку Batch. Интерферограммы отображаются в ранее созданной папке (на шаге 5.1).
ПРИМЕЧАНИЕ: После записи серии голограмм во времени первая голограмма представляет собой невозмутимое состояние, в то время как действие внешней силы вызывает последующие голограммы. Необходимо реконструировать голограммы с помощью сдвинутого преобразования Френеля13.
- Получение интерферограмм путем вычитания (в терминах комплексных чисел) конкретной голограммы во времени с первой полученной голограммой.
ПРИМЕЧАНИЕ: Данный протокол позволяет наблюдать влияние силы на объект. Изменение интерференционной картины в зависимости от времени является следствием деформации или смещения, которое происходит внутри системы во время измерения. Эти изменения используются для мониторинга динамики системы на наноуровне.
6. Анализ результатов
- Выполните визуальный анализ в качестве первого этапа контроля качества процесса. На этом этапе найдите видимые изменения в интерференционной картине и попытайтесь сопоставить изменения в интерференционной картине с результатами, полученными оптическими и тепловыми измерениями.
- Проведите перекрестный допрос всех записей. На этом втором этапе анализа тщательно проанализируйте изображения визуально как с оптических, так и с тепловизионных камер с голографическими реконструкциями, чтобы выявить динамику на наноуровне. Таким образом, момент реакции виден одновременно в голографических, тепловых и фотографических изображениях.
- Сделать графическое представление результатов на основе численного/программного анализа и представить их в виде графиков (1D, 2D или 3D), диаграмм, гистограмм и т.д. После полного анализа результатов сделайте выводы и предугадывайте дальнейшие исследования на основе этого.