Методическая статья

Динамический сбор внеклеточной жидкости гиппокампа у крыс, находящихся в сознании, в режиме реального времени с использованием системы микродиализа

DOI:

10.3791/64530

⸱

21 октября 2022 г.

 ,  ,  ,  ,  , 
1Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2Research Institute of Integrated TCM & Western Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 3School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 4School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Протокол обеспечивает подробный динамический отбор проб внеклеточной жидкости из гиппокампа бодрствующих крыс в режиме реального времени с использованием системы микродиализа.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Различные заболевания центральной нервной системы (ЦНС) связаны с изменениями состава внеклеточной жидкости гиппокампа (HECF). Однако трудности с получением HECF в режиме реального времени от крыс, находящихся в сознании, долгое время ограничивали оценку прогрессирования заболевания ЦНС и эффективность этномедицинской терапии. Обнадеживает то, что метод микродиализа мозга может быть использован для непрерывного отбора проб с преимуществами динамического наблюдения, количественного анализа и небольшого размера выборки. Это позволяет отслеживать изменения содержания во внеклеточной жидкости соединений из традиционных трав и их метаболитов в мозге живых животных. Таким образом, цель этого исследования состояла в том, чтобы точно имплантировать зонд микродиализа спинномозговой жидкости в область гиппокампа крыс Sprague Dawley (SD) с трехмерным стереотаксическим аппаратом мозга, отсекая молекулярные массы более 20 кДа. Затем высококачественный HECF был получен от крыс, находящихся в сознании, с использованием системы контроля отбора проб при микродиализе с регулируемой частотой отбора проб от 2,87 нл / мин до 2,98 мл / мин. В заключение, наш протокол обеспечивает эффективный, быстрый и динамичный метод получения HECF у бодрствующих крыс с помощью технологии микродиализа, что дает нам неограниченные возможности для дальнейшего изучения патогенеза заболеваний, связанных с ЦНС, и оценки эффективности лекарств.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Заболевания центральной нервной системы (ЦНС) с высокой заболеваемостью, такие как нейродегенеративные заболевания, черепно-мозговые травмы, черепно-мозговая травма, вызванная высотной гипоксией, и ишемический инсульт, являются основными причинами роста смертности во всем мире 1,2,3. Мониторинг цитокинов и белковых изменений в определенных областях мозга в режиме реального времени способствует диагностической точности заболеваний ЦНС и фармакокинетических исследований мозга после приема лекарств. В традиционных научных исследованиях используется гомогенат мозговой ткани или ручной сбор интерстициальной мозговой жидкости животных для обнаружения специфических веществ и для фармакокинетических исследований. Однако это имеет некоторые недостатки, такие как ограниченный размер выборки, невозможность динамического наблюдения за изменениями показателей и неравномерное качество выборки 4,5,6. Спинномозговая жидкость, интерстициальная жидкость, защищает головной и спинной мозг от механических повреждений. Его состав отличается от состава сыворотки из-за наличия гематоэнцефалического барьера (ГЭБ)7. Прямой анализ образцов спинномозговой жидкости в большей степени способствует раскрытию механизма поражения ЦНС и открытию лекарств. Неизбежно, что образцы спинномозговой жидкости, полученные вручную непосредственно из большой цистерны и желудочков головного мозга через шприц, имеют недостатки, связанные с загрязнением крови, случайной вероятностью сбора пробы, неопределенностью количества и почти отсутствием возможности многократного извлечения 8,9. В частности, традиционные методы забора интерстициальной мозговой жидкости не могут получить образцы из поврежденных областей мозга, что препятствует изучению патогенеза заболеваний ЦНС в определенных областях мозга и оценке эффективности таргетной этномедицинской терапии 9,10.

Микродиализ головного мозга — это метод отбора проб интерстициальной мозговой жидкости у бодрствующих животных11. Система микродиализа имитирует проницаемость сосудов с помощью зонда, имплантированного в мозг. Зонд для микродиализа оснащен полупроницаемой мембраной и имплантируется в определенные области мозга. После перфузии изотонической искусственной спинномозговой жидкостью (ACSF) диализованная интерстициальная мозговая жидкость может быть благоприятно собрана с преимуществами небольших размеров выборки, непрерывного отбора проб и динамического наблюдения12,13. С точки зрения расположения, зонды для микродиализа мозга могут быть выборочно имплантированы в структуры мозга или краниальные цистерны, представляющие интерес14. Наблюдение аномальных уровней эндогенного вещества во внеклеточной жидкости гиппокампа (HECF) предполагает возникновение заболеваний ЦНС или патогенез заболевания. Несколько исследований показали, что биомаркеры заболеваний ЦНС, такие как D-аминокислоты при шизофрении, β-амилоидные и тау-белки при болезни Альцгеймера, легкие цепи нейрофиламентов при черепно-мозговой травме и убиквитинкарбокси-концевая гидролаза L1s при гипоксической ишемической энцефалопатии, могут быть проанализированы в спинномозговой жидкости15,16,17 . Метод химического анализа, основанный на методе отбора проб микродиализа мозга, может быть использован для мониторинга динамических изменений экзогенных соединений, таких как активные ингредиенты этномедицины, которые диффундируют и распределяются в определенных областях мозга14.

В этой статье представлен специфический процесс динамического приобретения HECF у бодрствующих крыс и измерено его осмотическое давление для обеспечения качества образца.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Протокол эксперимента был проведен в соответствии с требованиями Комитета по использованию лабораторных животных и институциональному уходу за животными и их использованию при Университете традиционной китайской медицины Чэнду (номер записи: 2021-11). Для настоящего исследования использовали крыс-самцов Sprague Dawley (SD) (280 ± 20 г, возраст 6-8 недель).

1. Операция по имплантации зонда микродиализа головного мозга

  1. Используйте 3% и 1,5% изофлуран для индукции и поддержания анестезии крыс, соответственно, используя систему анестезии животных в воздушно-кислородной смеси со скоростью 0,6 л / мин. Убедитесь, что крысы находятся под глубоким наркозом без болевого рефлекса и роговичного рефлекса. Используйте ветеринарную мазь на глазах, чтобы предотвратить сухость под наркозом.
  2. Удалите шерсть с черепа анестезированной крысы электробритвой в области подготовки. Затем зафиксируйте анестезированную крысу на стереотаксическом локаторе мозга. Продезинфицируйте место операции перед операцией, нанеся повидон-йод и этанол 3 раза на область операции стерильным ватным тампоном. Применяют бупивакаин местно для местной анальгезии. ПРИМЕЧАНИЕ: Весь процесс сбора образцов HECF на основе микродиализа проиллюстрирован на рисунке 1.
  3. Сделайте 1,5-сантиметровый черепно-лицевой разрез посередине хирургическими ножницами и удалите надкостницу хирургическими ножницами и офтальмологическими щипцами.
  4. Рассмотрите брегму как базальное положение и проткните эндокраниум, чтобы просверлить отверстие 2 мм в переднезаднем (AP) положении (-2 мм), медиолатеральном (ML) положении (-3,5 мм) и дорсовентральном (DV) положении (-3,5 мм) (область CA1 гиппокампа) с помощью краниального сверла.
  5. Закрепите катетерный стилет на захвате стереотаксического локатора мозга и отрегулируйте положение оболочки микродиализа в положениях AP (-2 мм), ML (-3,5 мм) и DV (0 мм). Отрегулируйте значение DV стереолокатора мозга и имплантируйте корпус микродиализа в область CA1 на глубине 3,5 мм.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Поддерживайте температуру животного на уровне 37 °C во время работы с помощью средства поддержания температуры животного.
  6. Просверлите еще три отверстия диаметром 2 мм таким образом, чтобы три отверстия образовали треугольник, в котором отверстие зонда расположено по центру. Вкручиваем винты в отверстия на глубине 1 мм.
  7. Зафиксируйте зондирующий катетер зубным цементом и используйте хирургический шов 4-0, чтобы закрыть кожу. Расположение зонда показано на рисунке 2 .
  8. Поместите крысу в клетки на 7 дней, чтобы она восстановилась. Локально инфильтрат бупивакаина (1,5 мг/кг) один раз в день после операции.  Обеспечьте еду и воду ad libitum. Используйте глазные капли с гиалуронатом натрия 3 раза в день, чтобы предотвратить сухость после операции.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Выполняйте все процедуры в стерильной хирургической комнате. Не оставляйте животное без присмотра до тех пор, пока оно не придет в сознание, достаточное для поддержания лежачего положения грудины при температуре 37 °C. Не возвращайте животное, перенесшее операцию, в компанию других животных до полного выздоровления.

2. Подключение системы микродиализа и проверка зонда

  1. Подключите микродиализный насос, микрошприц, устройство бодрствования и криогенный коллектор образцов в соответствии с инструкциями производителя. Установите микрошприц с ACSF на микродиализный насос и установите микродиализный насос на скорость 1 мкл / мин для выпуска воздуха в трубопровод.
  2. Соедините трубопровод и зонд микродиализа мозга (мембрана: PAES; длина мембраны: 4 мм; наружный диаметр мембраны: 0,5 мм; отсечка: 20 кДа; длина вала: 14 мм). Используйте микродиализный насос со скоростью 1 мкл / мин, чтобы ввести ACSF в зонд до тех пор, пока поверхность зонда не станет слегка влажной. Погрузите зонд в раствор для инъекций гепарина натрия для последующего использования.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Если большая струя ACSF падает с полупроницаемой мембраны зонда, как видно невооруженным глазом под действием силы тяжести, замените зонд новым.

3. Сбор HECF у бодрствующей крысы

  1. Вставьте зонд для микродиализа мозга в катетер зонда и поместите крысу в камеру (высота: 360 мм; диаметр: 400 мм) с набивкой, чтобы крысы могли свободно передвигаться.
  2. Соедините трубопровод, микрошприцевой насос и зонд микродиализа мозга. Запрягите крысу через отверстие в верхней части удерживающего устройства для крыс и вертлюги из нержавеющей стали.
  3. Включите многоканальный поворотный контроллер, чтобы избежать переплетения трубопроводов микродиализа во время свободного движения крысы. Включите микрошприцевой насос и перекачайте ACSF со скоростью 1 мкл / мин. Периодически собирайте HECF после 60-минутного уравновешивания микродиализной системы сбора HECF.
  4. Убедитесь, что скорость потока образцов HECF в охлажденном коллекторе фракций соответствует инфузии ACSF. Соберите 20 мкл HECF и автоматически переключитесь на следующую пробирку. Позаботьтесь о том, чтобы проверить, не повреждена ли мембрана зонда при установке зонда.

4. Измерение осмотического давления для HECF

  1. Включите осмометр и войдите в систему обнаружения. Нажмите кнопку Cal на сенсорном экране и нажмите кнопку Res на странице, чтобы очистить предыдущую калибровочную память.
  2. Установите на измерительную головку пробирку объемом 1,5 мл, содержащую 100 мкл чистой воды без пузырьков. Потяните измерительную головку на дно контейнера с холодным гидразином.
  3. Введите номер образца 0 на сенсорном экране и подтвердите тестирование. Быстро окуните диодную иглу в пробирку для образца, а затем быстро вытащите ее, чтобы вызвать кристаллизацию образца при температуре -6,2 °C.
  4. Подождите, пока отобразится экран: нажмите головой измерения вверх и нажмите Cal и Cal 0 по очереди для калибровки. Выполните измерения с помощью калибровочного раствора 300 мОсм и измерьте осмотическое давление образцов HECF, как описано выше.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Протрите измерительную головку мягким бумажным полотенцем после калибровки или измерения. Образцы HECF без пузырьков следует хорошо перемешать.

5. Техническое обслуживание системы и устройств микродиализа после отбора проб

  1. Извлеките зонд для микродиализа головного мозга из зондового катетера после завершения отбора проб. Погрузите зонд в деионизированную воду и промыть деионизированной водой на 12 часов, чтобы удалить многожильные отложения солей из трубопровода и зонда.
  2. Извлеките зонд и поместите его в 0,05% раствор трипсина при температуре 4 °C. Высушите трубопроводы в сушильной печи при температуре 25 °C и храните при комнатной температуре.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Датчики для микродиализа стоят дорого, и этот шаг может увеличить возможность повторного использования датчиков. Белки, которые прилипают к поверхности зонда, могут быть переварены раствором трипсина, чтобы предотвратить блокировку мембраны зонда белками, и трипсин не влиял на материал зонда.

6. Обработка животных после отбора проб

  1. После отбора проб безболезненно усыпляют крыс, заставляя их вдыхать 1,5% изофлурана с последующей передозировкой 5% изофлурана в соответствии с этикой животных.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В соответствии с приведенным выше протоколом эксперимента и параметрами отбора проб, установленными в таблице 1, был получен водоподобный, бесцветный и прозрачный HECF крыс с заданной частотой отбора проб (рис. 1K). Осмотическое давление полученного крысой HECF составило 290-310 мОсм/л, что может косвенно обеспечить качество образцов18,19.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Патогенез заболеваний ЦНС до сих пор до конца не изучен, что препятствует разработке новых методов лечения и лекарств. Исследования показали, что большинство заболеваний ЦНС тесно связаны с поражениями гиппокампа20,21,22. Предлагаемый метод микродиализа мозга может быть нацелен на определенные области мозга, особенно на гиппокамп, что отличает его от традиционного подхода к сбору HECF. Зонды помещаются в область CA1 мозга крысы ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторам раскрывать нечего.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта работа была поддержана Национальным фондом естественных наук Китая (82104533), Департаментом науки и технологий провинции Сычуань (2021YJ0175) и Китайским фондом постдокторантуры (2020M683273). Авторы хотели бы поблагодарить г-на Юньчэн Хонга, старшего инженера по оборудованию в Tri-Angels D&H Trading Pte. Ltd. (Сингапур) за оказание технических услуг по методике микродиализа.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
  Сушильная печь для воздухаSuzhou Great Electronic Equipment Co., LtdGHG-9240A
Система анестезии для животныхRayward Life Technology Co., LtdR500IE
Устройство для поддержания температуры животныхRayward Life Technology Co., Ltd69020
Искусственная спинномозговая жидкостьBeijing leagene biotech. Co., LtdCZ0522
Зонд для микродиализа головного мозга  Катетер для микродиализа CMA ABT56518
  CMA Microdialysis ABT56518
Covance Infusion harnessInstech Laboratories, Inc.CIH95
Базовые смолы для зубных протезовShanghai Eryi Zhang Jiang Biomaterials Co., Ltd190732
Электрическая дрель для черепаRayward Life Technology Co., Ltd78001
Электрическая бритваRayward Life Technology Co., LtdCP-5200
Бак для свободного перемещения животных  CMA Microdialysis ABCMA120
Гепарин натрия для инъекцийChengdu Haitong Pharmaceutical Co., LtdH51021208
IodophorSichuan Lekang Pharmaceutical Accessories Co., Ltd202201
IsofluranRayward Life Technology Co., LtdR510-22
Микродиализный катетер stylet  CMA Microdialysis AB8011205
Пробирка для сбора микродиализа  CMA Microdialysis AB7431100
Микродиализный коллектор  CMA Microdialysis ABCMA4004
микродиализ fep трубки  CMA Microdialysis AB3409501
микродиализ in vitro stand  CMA Microdialysis ABCMA130
Микродиализный микроинъекционный насос  CMA Microdialysis AB788130
Шприц для микродиализа (1,0 мл) CMA Microdialysis AB8309020
адаптер для трубки для микродиализа  CMA Microdialysis AB3409500
Нерассасывающиеся хирургические шовные материалыShanghai Tianqing Biological Materials Co., LtdS19004
Офтальмические щипцыRayward Life Technology Co., LtdF12016-15
ОсмометрLö serOM 807
Гиалуронат натрия глазные каплиURSAPHARM Arzneimittel GmbHH20150150
Аппарат стереотаксиRayward Life Technology Co., Ltd68025
Хирургические ножницыRayward Life Technology Co., LtdS14014-15
Хирургические ножницыShanghai Bingyu Fluid technology Co., LtdBY-103
Игла для шприца  CMA Microdialysis ABT56518
Раствор трипсинаBoster
Biological Technology, Ltd.
Ультразвуковой очистительGuangdong Goote Ultrasonic Co., LtdKMH1-240W8101
PYG0107

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Erkkinen, M. G., Kim, M. O., Geschwind, M. D. Clinical neurology and epidemiology of the major neurodegenerative diseases. Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. 10 (4), 033118(2018).
  2. Salehi, A., Zhang, J. H., Obenaus, A. Response of the cerebral vasculature following traumatic brain injury. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 37 (7), 2320-2339 (2017).
  3. Kurtzman, R. A. em3, Caruso, J. L. High-altitude illness death investigation. Academic Forensic Pathology. 8 (1), 83-97 (2018).
  4. Matsumoto, T., et al. Pharmacokinetic study of Ninjin'yoeito: Absorption and brain distribution of Ninjin'yoeito ingredients in mice. Journal of Ethnopharmacology. 279, 114332(2021).
  5. Mahat, M. Y., et al. An improved method of transcutaneous cisterna magna puncture for cerebrospinal fluid sampling in rats. Journal of Neuroscience Methods. 211 (2), 272-279 (2012).
  6. Ceaglio, N., et al. High performance collection of cerebrospinal fluid in rats: evaluation of erythropoietin penetration after osmotic opening of the blood-brain barrier. Journal of Neuroscience Methods. 219 (1), 70-75 (2013).
  7. Bothwell, S. W., Janigro, D., Patabendige, A. Cerebrospinal fluid dynamics and intracranial pressure elevation in neurological diseases. Fluids and Barriers of the CNS. 16 (1), 9(2019).
  8. Barthel, L., et al. A step-by-step guide for microsurgical collection of uncontaminated cerebrospinal fluid from rat cisterna magna. Journal of Neuroscience Methods. 352, 109085(2021).
  9. Zhao, Y., Yang, Y., Wang, D. X., Wang, J., Gao, W. Y. Cerebrospinal fluid amino acid metabolite signatures of diabetic cognitive dysfunction based on targeted mass spectrometry. Journal of Alzheimer's Disease. 86 (4), 1655-1665 (2022).
  10. Lim, N. K., et al. An improved method for collection of cerebrospinal fluid from anesthetized mice. Journal of Visualized Experiments. (133), e56774(2018).
  11. Hendrickx, S., et al. A sensitive capillary LC-UV method for the simultaneous analysis of olanzapine, chlorpromazine and their FMO-mediated N-oxidation products in brain microdialysates. Talanta. 162, 268-277 (2017).
  12. Chefer, V. I., Thompson, A. C., Zapata, A., Shippenberg, T. S. Overview of brain microdialysis. Current Protocols in Neuroscience. , Chapter 7, Unit 7.1 (2009).
  13. Hammarlund-Udenaes, M. Microdialysis as an important technique in systems pharmacology-a historical and methodological review. The AAPS Journal. 19 (5), 1294-1303 (2017).
  14. Anderzhanova, E., Wotjak, C. T. Brain microdialysis and its applications in experimental neurochemistry. Cell and Tissue Research. 354 (1), 27-39 (2013).
  15. Mohammadi, A., Rashidi, E., Amooeian, V. G. Brain, blood, cerebrospinal fluid, and serum biomarkers in schizophrenia. Psychiatry Research. 265, 25-38 (2018).
  16. Lashley, T., et al. Molecular biomarkers of Alzheimer's disease: progress and prospects. Disease Models & Mechanisms. 11 (5), 031781(2018).
  17. Kawata, K., Tierney, R., Langford, D. Blood and cerebrospinal fluid biomarkers. Handbook of Clinical Neurology. 158, 217-233 (2018).
  18. Zhao, Q. P., et al. Protective effects of dehydrocostuslactone on rat hippocampal slice injury induced by oxygen-glucose deprivation/reoxygenation. International Journal of Molecular Medicine. 42 (2), 1190-1198 (2018).
  19. Wang, X. B. Protective effects of dehydrocostuslactone on oxygen-glucose deprivation injury in rat hippocampal slices. , Ningxia Medical University. Master's thesis (2017).
  20. Coimbra-Costa, D., Alva, N., Duran, M., Carbonell, T., Rama, R. Oxidative stress and apoptosis after acute respiratory hypoxia and reoxygenation in rat brain. Redox Biology. 12, 216-225 (2017).
  21. Liu, H. Y., Chou, K. H., Chen, W. T. Migraine and the Hippocampus. Current Pain and Headache Reports. 22 (2), 13(2018).
  22. Toda, T., Parylak, S. L., Linker, S. B., Gage, F. H. The role of adult hippocampal neurogenesis in brain health and disease. Molecular Psychiatry. 24 (1), 67-87 (2019).
  23. Wang, P., Lo Cascio, F., Gao, J., Kayed, R., Huang, X. F., F, X. Binding and neurotoxicity mitigation of toxic tau oligomers by synthetic heparin like oligosaccharides. Chemical Communications. 54 (72), 10120-10123 (2018).
  24. Han, J. Y., Li, Q., Ma, Z. Z., Fan, J. Y. Effects and mechanisms of compound Chinese medicine and major ingredients on microcirculatory dysfunction and organ injury induced by ischemia/reperfusion. Pharmacology & Therapeutics. 177, 146-173 (2017).
  25. Peng, T. M., et al. Anti-inflammatory effects of traditional Chinese medicines on preclinical in vivo models of brain ischemia-reperfusion-injury: Prospects for neuroprotective drug discovery and therapy. Frontiers in Pharmacology. 10, 204(2019).
  26. König, M., Thinnes, A., Klein, J. Microdialysis and its use in behavioural studies: Focus on acetylcholine. Journal of Neuroscience Methods. 300, 206-215 (2018).
  27. Liu, M. Z., Wang, P., Yu, X. M., Dong, G. C., Yue, J. Intracerebral microdialysis coupled to LC-MS/MS for the determination tramadol and its major pharmacologically active metabolite O-desmethyltramadol in rat brain microdialysates. Drug Testing and Analysis. 9 (8), 1243-1250 (2017).
  28. de Lima Oliveira, M., et al. Cerebral microdialysis in traumatic brain injury and subarachnoid hemorrhage: state of the art. Neurocritical Care. 21 (1), 152-162 (2014).
  29. Amiridze, N., Dang, Y., Brown, O. R. Hydroxyl radicals detected via brain microdialysis in rats breathing air and during hyperbaric oxygen convulsions. Redox Report. 4 (4), 165-170 (1999).
  30. Chang, H. Y., Morrow, K., Bonacquisti, E., Zhang, W., Shah, D. K. Antibody pharmacokinetics in rat brain determined using microdialysis. MABS. 10 (6), 843-853 (2018).
  31. Wan, H. Y., et al. Pharmacokinetics of seven major active components of Mahuang decoction in rat blood and brain by LC-MS/MS coupled to microdialysis sampling. Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology. 393 (8), 1559-1571 (2020).
  32. Zheng, H. Z., et al. Pharmacokinetic analysis of Huangqi Guizhi Wuwu decoction on blood and brain tissue in rats with normal and cerebral ischemia-reperfusion Injury by microdialysis with HPLC-MS/MS. Drug Design Development and Therapy. 14, 2877-2888 (2020).
  33. Bongaerts, J., et al. Sensitive targeted methods for brain metabolomic studies in microdialysis samples. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 161, 192-205 (2018).
  34. Zhang, Y. Q., Jiang, N., Yetisen, A. K. Brain neurochemical monitoring. Biosensors and Bioelectronics. 189, 113351(2021).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

CA1

Похожие статьи