$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Основная цель настоящего сборника – предоставить читателям актуальные знания о новой методологии изучения сосудистых заболеваний на уровне клеток, белков и мРНК, как in vivo , так и in vitro, у человека или на мышиной модели. Это включает в себя новые методы визуализации и искусственного интеллекта, а также гистопатологический анализ, расширенный для сложных тканей1, таких как кальцинированные артерии. В сборнике представлены четыре метода, которые полностью отвечают на эти вопросы, предоставляя очень интересные подсказки о том, как подходить к старым проблемам с современной и технологической точки зрения, демонстрируя быструю техническую эволюцию в этой области.
Ишемия-реперфузионное повреждение (ИРИ) является основным фактором риска развития острого повреждения почек (ОПП)2. Специфические диагностические биомаркеры не были установлены, хотя микроРНК являются отличными кандидатами3. Aomatsu et al.4 разработал интересную мышиную модель ОПП, очищающую и количественно определяющую микроРНК с помощью qRT-PCR. Они идентифицировали 17 повышенных микроРНК с ОПП, индуцированных ишемией-реперфузионным повреждением. Метод позволяет изучать профиль микроРНК в почках ОПП с динамическим диапазоном, точной количественной оценкой и высокой специфичностью. Кроме того, модель облегчает введение лекарственных препаратов до и после ИРИ. В протоколе также описываются критические моменты, о которых следует знать, и неспецифические реакции после ПЦР. Ключевыми моментами являются гомогенизация, выбор эндогенного контроля и качество очищенных микроРНК. Этот метод очень полезен, поскольку он обеспечивает животную модель ОПП для изучения IRI в почках человека, что, вероятно, будет осуществимо для дальнейших исследований за пределами микроРНК.
Bauer et al.5 разработали полуавтоматический метод экстракции ДНК из небольшого количества атеросклеротических бляшек, встроенных в парафин с фиксированным формалином (FFPE). Это еще одна интересная тема, поскольку она, вероятно, обеспечит стандартизированный метод изучения патобиологии очень сложной ткани, такой как диффузно кальцинированныеатеромы1. Это затрудняет извлечение тканей, так как включает в себя использование протоколов декальцификации, которые изменяют нуклеиновые кислоты и другое содержимое клеток1. Авторы получили более высокую концентрацию ДНК и лучшее качество ДНК (стабильность и воспроизводимость) по сравнению с двумя ручными колоночными методами, без существенных различий в фрагментации ДНК. Важные изменения протокола включают этап инкубации для депарафинизации (меньшая токсичность реагентов), ночное разложение протеазы К, дальнейшее время инкубации после добавления буфера для лизиса при 65 °C и увеличение объема элюирования. Протокол, безусловно, является многообещающим для будущих высокопроизводительных анализов.
Suarez-Cuenca et al.6 представили протокол количественной оценки циркулирующих мононуклеарных клеток-предшественников (МПК) из сосудов, расположенных близко к месту ангиопластики, с целью прогнозирования риска ампутации конечностей у пациентов с критической ишемией конечностей (КИК). Это еще одна интересная тема, поскольку риск ампутации при КИК в настоящее время все ещеочень высок7, и существует существенная нехваткадоступных прогностических моделей8. Возможность идентификации циркулирующих биомаркеров является весьма перспективной в клинической практике, предлагая реальную перспективу для изменения анамнеза и ведения пациентов с КИК.
В работе Zoli et al.9 метод визуализации трактографии был использован для исследования расширения гипофизарно-диэнцефальных опухолей и опухолей основания черепа. Предоперационная нейровизуализационная оценка имеет решающее значение перед операцией на черепе, и трактография до сих пор редко применялась в хирургии основания черепа из-затехнических проблем. В дополнение к внедрению протокола МРТ для лечения этих опухолей, целью авторов также было описать трансляционное сотрудничество между нейрохирургами и командой нейровизуализации. Это сотрудничество предлагает междисциплинарный протокол для эффективного интегрированного многоосевого подхода к этим пациентам. Реализованный протокол включал в себя быстрые последовательности (фазовое обратное кодирование, сканирование для диффузионно-взвешенных изображений) в качестве нового подхода к расширенной коррекции постобработки. Это открывает путь к новым подходам к дооперационному исследованию этих сложных опухолей.
Сосудистые атероматозные заболевания по-прежнему являются серьезной проблемой здравоохранения во всем мире, и все больше и больше требуются новые методы для изучения этих пациентов на разных уровнях, от визуализации и крови до тканей. В этом сборнике представлены советы по преодолению некоторых проблем в изучении сосудистых заболеваний, включающие: (1) новые методы изучения содержания клеток бляшек, белков и мРНК, (2) гистопатологический анализ, расширенный для затрудненного извлечения тканей (например, кальцинированных участков), и (3) количественную оценку ангиогенеза. Безусловно, разработка и распространение новых подходов, связанных с анализом тканей, имеют отношение к широкому спектру патологий и потенциально влияют на клинические рекомендации по диагностике на всех уровнях.