Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Спонтанная мышиная модель анапластического рака щитовидной железы

2.4K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/64607

⸱

3 февраля 2023 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Biotherapy and Cancer Center, West China Hospital, Sichuan University and Collaborative Innovation Center, 2Division of Thyroid Surgery, Laboratory of Thyroid and Parathyroid Disease, Frontiers Science Center for Disease-Related Molecular Network, Department of General Surgery, West China Hospital, Sichuan University, 3Department of Ultrasound, West China Hospital of Sichuan University, Sichuan University, 4Department of Otolaryngology-Head & Neck Surgery and University of Arizona Cancer Center, University of Arizona, 5Center for Translational Medicine, Shenzhen Bay Laboratory, 6Division of Laboratory Medicine/Research Centre of Clinical Laboratory Medicine, West China Hospital, Sichuan University

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы представляем стандартный конвейер для получения опухолей ATC у мышей с помощью спонтанных генетически модифицированных моделей мышей. Далее мы представляем опухолевую динамику и патологическую информацию о первичных и метастазирующих поражениях. Эта модель поможет исследователям понять онкогенез и облегчит открытие лекарств.

Аннотация

Анапластический рак щитовидной железы (АТХ) является редким, но смертельным злокачественным новообразованием с мрачным прогнозом. Существует острая необходимость в более глубоких исследованиях канцерогенеза и развития АТХ, а также терапевтических методов, поскольку стандартные методы лечения у пациентов с АТХ практически исчерпаны. Однако низкая распространенность препятствовала тщательным клиническим исследованиям и сбору образцов тканей, поэтому в создании эффективных методов лечения был достигнут незначительный прогресс. Мы использовали генную инженерию для создания условно-индуцируемой мышиной модели ATC (mATC) на фоне C57BL/6. Мышиная модель ATC была генотипирована с помощью TPO-cre/ERT2; БрафCA/вес; Trp53 ex2-10/ex2-10 и индуцируется внутрибрюшинным введением тамоксифена. С помощью мышиной модели мы исследовали динамику опухоли (размер опухоли варьировал от 12,4 мм 2 до 32,5 мм2 после 4 месяцев индукции), выживаемость (средний период выживания составил 130 дней) и метастазирование (метастазы в легкие произошли у 91,6% мышей) кривые и патологические особенности (характеризуются иммуногистохимическим окрашиванием Cd8, Foxp3, F4/80, Cd206, Ki67 и Caspase-3). Результаты показали, что спонтанная mATC обладает очень похожей на опухолевую динамику и иммунологическое микроокружение с опухолями ATC человека. В заключение, при высоком сходстве патофизиологических признаков и унифицированных генотипов, модель mATC в некоторой степени устранила нехватку клинической ткани ATC и гетерогенность образца. Таким образом, это облегчило бы механизм и трансляционные исследования АТХ и обеспечило бы подход к изучению лечебного потенциала низкомолекулярных препаратов и иммунотерапевтических агентов для АТХ.

Введение

Рак щитовидной железы является одним из наиболее распространенных эндокринных злокачественных новообразований1, происходящих из эпителия щитовидной железы. В последние годы заболеваемость раком щитовидной железы быстро возросла во всем мире2. Рак щитовидной железы можно разделить на отдельные типы в зависимости от степени дифференцировки опухолевых клеток. На основании клинического поведения и гистологии карциномы щитовидной железы делятся на хорошо дифференцированные карциномы, включая папиллярную карциному щитовидной железы (ПТК) и фолликулярную карциному щитовидной железы (ФТК), низкодифференцированную карциному (ПДТК) и недифференцированную или анапластическую карциному щитовидной железы (АТХ)3. В отличие от ПТК, который является распространенным типом с легким поведением и лучшим прогнозом4, АТХ является редким и очень агрессивным злокачественным новообразованием, на долю которого приходится от 2% до 3% всех опухолей щитовидной железы5. Хотя АТХ встречается редко, он является причиной примерно 50% смертей, связанных с раком щитовидной железы, с удручающей выживаемостью (6-8 месяцев)6,7. Более 50% случаев АТХ диагностируются как метастазы в легкие8. Помимо агрессивного характера АТХ, в клинике разработано ограниченное эффективное лечение. Таким образом, пациенты с АТХ имеют мрачный прогноз 9,10,11. Это говорит о том, что срочно необходимы дальнейшие углубленные исследования молекулярных механизмов, лежащих в основе разработки АТХ и лечения.

Онкогенез АТХ является динамическим дедифференцированным процессом. Сложность сбора образцов опухолей человека на каждом этапе клинических исследований препятствовала пониманию механизма развития от хорошо дифференцированных до недифференцированных карцином. Напротив, использование мышиных моделей АТХ (mATC) благоприятствует сбору образцов mATC во всем курсе онкогенеза. Таким образом, мы можем лучше понять механизмы образования опухоли, проанализировав динамический дедифференцированный процесс. Кроме того, гетерогенность клинических образцов АТХ также способствовала трудностям в понимании молекулярного механизма. Тем не менее, мыши имели одинаковый генетический фон и содержались в одинаковой среде обитания, обеспечивая консистенцию каждой опухоли. Это облегчает изучение обобщенной роли развития УВД12,13,14. Кроме того, mATC представляет собой модель опухоли in situ, которая может восстанавливать влияние анатомического расположения и тканеспецифического микроокружения. Таким образом, по сравнению с широко используемыми иммунодефицитными мышами, mATC представляет собой спонтанную мышиную модель с интактной иммунной системой и иммунным микроокружением.

Поэтому мы построили условно-индуцированный mATC со штаммом C57BL/6, который представляет собой мышиную модель, способную воспроизводить патологические особенности дедифференцированной карциномы щитовидной железы. Основываясь на этой модели, мы дали краткий обзор молекулярной основы, идей построения, патологических особенностей и приложений mATC. Кроме того, мы наблюдали и сообщали о росте опухоли, времени выживания, метастазировании и патологических особенностях mATC. Мы считаем, что это будет информационный обзор, который поможет другим исследователям легче использовать эту модель.

Мы построили условную индуцируемую модель mATC, о которой впервые сообщил McFadden15; Первоначально мы сконструировали мышей: TPO-cre/ERT2, Braf flox/wt и Trp53flox/wt. В частности, мыши TPO-cre / ERT2 включали промотор пероксидазы щитовидной железы человека (TPO) (специфический для щитовидной железы промотор), стимулирующий экспрессию гена слияния cre-ERT2 (рекомбиназа cre, слитая с лиганд-связывающим доменом рецептора эстрогена человека). Cre-ERT2 обычно ограничивается цитоплазмой и попадает в ядро только при воздействии тамоксифена, который побуждает cre проявлять активность рекомбинантного фермента. Когда мышей скрещивают с мышами, несущими loxP-фланкированные последовательности, после индукции тамоксифена кре-опосредованная рекомбинация удаляет флоксированные последовательности в клетках щитовидной железы для достижения цели нокаута или выбивания определенных генов.

Кроме того, мыши Braf flox / wt являются аллелем человеческого Braf, основанного на системе cre-loxP. Мышиный транскрипт Brafflox/wt кодируется эндогенными экзонами 1-14 и локсP-фланговыми человеческими экзонами 15-18. После кре-опосредованного иссечения флоксированных областей мутантный экзон 15 (модифицированный аминокислотной заменой V600E, связанной с конститутивно активным BrafV600E при раке человека) и эндогенные экзоны 16-18 используются для генерации транскриптов. Кроме того, мыши Trp53 flox / wt являются нокаутными аллелями человеческого Trp53 и имеют сайты loxP, фланкирующие экзоны 2-10 Trp53. При скрещивании с мышами с кре-рекомбиназой кре-опосредованная рекомбинация удаляет флоксированную последовательность, чтобы нокаутировать Trp53. Затем мышей TPO-cre/ERT2, Braf flox/w и Trp53flox/wt скрещивали для получения туберкулеза (TPO-cre/ERT2; Brafflox/wt) мыши и TBP (TPO-cre/ERT2; Браф-флокс/вес; Trp53flox/вес) мышей, которые можно было бы использовать для генерации PTC и ATC. Примерно через 8 недель мышей индуцировали внутрибрюшинным (в/) введением 150 мг/кг тамоксифена, растворенного в кукурузном масле, в течение двух введений. Рост опухоли можно было контролировать с помощью высокочастотного ультразвукового исследования (первый момент времени УЗИ был зарегистрирован как день 0). Первичное УЗИ проводилось через 40 дней после введения тамоксифена.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Описанные здесь процедуры на животных были выполнены с одобрения Комитета по этике животных Западно-Китайской больницы, Сычуаньского университета, Чэнду, Сычуань, Китай.

1. Индукция мышей TBP

  1. Определите генотип мышей
    1. Примерно через 3 недели отделите самок мышей от мышей-самцов. В то же время используйте зажим для ушной бирки, чтобы зафиксировать ушную бирку. Поместите ушные бирки в нижнюю половину и в среднюю треть уха, избегая области с наибольшей концентрацией капилляров.
    2. Аккуратно, но надежно удерживайте мышей. Крепко возьмитесь за основание мышиного хвоста. Поместите мышей на поверхность, которая позволит им захватывать.
    3. Аккуратно, но твердо положите свободную руку на плечи, затем быстро возьмитесь за загривок между большим и указательным пальцами. Зажмите мизинцем хвост.
    4. Смажьте хвост спиртом. Стерильными ножницами отрежьте образец кожи <5 мм и поместите его в чистый контейнер для образцов с этикеткой. Удалять шерсть мышей не нужно. Сожмите хвост стерильными губками для достижения гемостаза.
    5. Затем лизируют мышиный хвост и проводят полимеразную цепную реакцию (ПЦР) для определения генотипа.
      ПРИМЕЧАНИЕ: После отрезания одного мышиного хвоста поверхность ножниц необходимо протереть спиртовой ватой, чтобы избежать взаимного заражения генов между мышиными хвостами. После помещения их в клетку за мышами необходимо наблюдать в течение 5 минут, чтобы найти какие-либо признаки кровотечения в месте раны. Обратитесь к таблице 1 для списка праймеров и настроек ПЦР, используемых в этом исследовании.
  2. Тамоксифен-индуцированные мыши TBP
    1. Взвесьте 0,3 г тамоксифена и растворите его в 15 мл кукурузного масла с помощью ультразвука (мощность = 20%, продолжительность = 20 мин, температура = 4 °C) в концентрации 20 мг / мл. Хранить при температуре 4 °C.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Тамоксифен чувствителен к свету и должен быть помещен в коричневый контейнер.
    2. Примерно через 8 недель взвесьте мышей с помощью электронных весов и сделайте им внутривенную инъекцию тамоксифена в дозе 150 мг / кг, вводимую дважды с интервалом в 1 неделю.

2. Вскрытие и визуализация опухолей щитовидной железы и метастатических опухолей мыши

  1. Подготовка
    1. Подготовьте инструменты для вскрытия: стерильные ножницы и щипцы, стерильное лезвие, бутылку с распылителем 75% спирта, линейку 20 см, штангенциркуль, бумажные полотенца и спиртовую вату.
    2. Раствор для фиксации тканей мыши: приготовьте 4% раствор для фиксации тканей параформальдегида.
    3. Очистите 10-сантиметровую посуду, наполненную примерно 10 мл стерильного фосфатного буферного физиологического раствора (PBS) для временного хранения тканей, и промойте кровь на поверхности ткани.
  2. Экстракция щитовидной железы
    1. Усыпляют мышей углекислым газом со скоростью потока 2,0 л/мин в течение 5 мин. Извлеките мышей из клетки и выполните вывих шейки матки.
    2. Поместите мышь на рассекающую доску брюшной стороной вверх и головой подальше от экспериментатора и зафиксируйте конечности на рассекающей доске стерильными иглами шприца. Для более удобного удаления ткани щитовидной железы используйте другую стерильную иглу шприца для фиксации головки.
    3. Продезинфицируйте шею тремя чередующимися раундами хлоргексидина или повидон-йодного скраба с последующим добавлением 75% спирта. Затем сделайте небольшой надрез над центром ключицы стерильными ножницами и щипцами.
    4. Продолжайте разрез по средней линии вверх ко рту. Найдите подчелюстную железу и удалите ее, чтобы обнажить анатомическое расположение щитовидной железы, которая находится рядом с щитовидным хрящом и трахеей.
    5. Найдите щитовидную железу, аккуратно рассеките щитовидную железу от остальной части области шеи стерильными ножницами, затем поместите удаленную щитовидную железу в 10-сантиметровую посуду, наполненную 10 мл стерильного PBS.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Во время удаления щитовидной железы будьте осторожны и медленны и избегайте перерезания кровеносных сосудов шеи. Если сосуды шеи перерезаны, шея сразу же наполнится кровью, и кровь необходимо своевременно удалить спиртовыми губками, чтобы обнажить анатомическое расположение щитовидной железы. Перед удалением ткани щитовидной железы внимательно понаблюдайте за характеристиками левой и правой долей щитовидной железы (размер, форма и т. д.), чтобы избежать невозможности различить левую и правую доли щитовидной железы после удаления.
    6. При стерильной ПБС стерильными ножницами удаляют кровь с поверхности ткани щитовидной железы и аккуратно срезают трахею. Затем положите ткань щитовидной железы на стерильную ткань и измерьте размер левой и правой долей щитовидной железы штангенциркулем.
    7. Разделите левую и правую доли щитовидной железы на две части стерильным лезвием. Поместите одну часть в 2 мл 4% раствора параформальдегида для фиксации, а другую часть поместите в жидкий азот для консервации.
  3. Экстракция легких и печени
    1. Продезинфицируйте живот тремя чередующимися раундами хлоргексидина или повидон-йодного скраба и 75% спирта. Затем ущипните чуть выше полового члена мыши и сделайте небольшой разрез, разрежьте по средней линии живота до подключичной кости и обнаживите брюшную полость.
    2. Найдите печень в верхней части живота и аккуратно удалите ее. Поместите печень в стерильный PBS.
    3. Аккуратно разрежьте диафрагму вдоль ребер, чтобы обнажить грудную полость. Затем возьмитесь за грудину и потяните вверх, чтобы еще больше расширить пространство. Найдите легкое и удалите его. Поместите удаленное легкое в стерильный PBS.
    4. Грубо наблюдать, нет ли метастазов в легких и печени. Подсчитайте количество метастазов и сделайте цифровую запись. После этого с помощью стерильного лезвия разделите ткани легких и печени на две части. Поместите одну часть в 3 мл 4% раствора параформальдегида для фиксации, а другую часть в жидкий азот для консервации.
    5. Обезвоживание тканей
      1. Положите салфетки в коробку для обезвоживания. Положите ящик для обезвоживания в корзину при градиентном обезвоживании спиртом следующим образом: 70% спирта в течение 1 часа; 80% спирт в течение 1 ч; 95% спирт в течение 30 мин; 95% спирт в течение 30 мин; безводный этанол I в течение 30 мин; безводный этанол II в течение 30 мин; ксилол I в течение 20 мин; ксилол II в течение 20 мин; парафин I в течение 30 мин; парафин II в течение 1 ч; парафин III в течение 30 мин.
    6. Вставьте пропитанные воском ткани в встраивающую машину.
      1. Сначала положите расплавленный воск во встраиваемую раму. Прежде чем воск затвердеет, извлеките ткань из коробки для обезвоживания и поместите ее во встраиваемую раму, затем прикрепите этикетку.
      2. Дайте воску остыть при -20 °C на морозильном столе. После того, как воск застынет, извлеките восковой блок из встраиваемой рамы и обрежьте его.
    7. Поместите обрезанный восковой блок на парафиновый слайсер, установленный толщиной 5 мкм и размером 2 см х 2 см. После секционирования дайте срезам всплыть на разбрасывателе с теплой водой при температуре 45 ° C, чтобы сгладить ткань. Поднимите ткань горкой и запекайте ломтики в духовке при температуре 65 °C в течение 2 часов.
    8. После того, как вода высохнет и воск растает, удалите предметное стекло с тканью и используйте его для окрашивания гематоксилином и эозином (HE) и иммуногистохимического (IHC) окрашивания16. Убедитесь, что срезы приклеены к предметным стеклам для окрашивания.

3. ОФ окрашивание первичной опухоли и легкого

  1. Депарафинизация
    1. Горки со срезами поместить в ксилол на 10 мин.
    2. Перейдите в безводный спирт (100%) (две бутылки) примерно на 3 минуты каждая.
    3. Перейдите в 95% спирт (две бутылки) примерно на 3 минуты каждая.
    4. Перейдите в 80% спирт примерно на 3 минуты.
    5. Перейдите в 50% спирт примерно на 3 минуты.
    6. Перейдите в водопроводную воду и смойте спирт в течение примерно 1 минуты.
  2. Окрашивание
    1. Переместите предметные стекла в гематоксилин на 8 мин.
    2. Переместите предметные стекла в воду на 1 мин, чтобы смыть гематоксилин; Ткань меняется с синего на красный.
    3. Переместите предметные стекла в 1% спирт соляной кислоты примерно на 30 с.
    4. Переместите горки в воду, промыв в течение 5 мин.
    5. Переместите предметные стекла в эозин на 90 с, затем промойте их водой в течение 5 минут.
    6. Переместите слайды в 50% спирт, 80% спирт, 95% спирт (две бутылки) и безводный спирт (100%) (две бутылки) на 1 минуту каждая.
    7. Переместите горки в ксилол на 5 минут.
    8. После того, как предметные стекла высохнут, запечатайте их нейтральной смолой.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Мы индуцировали mATC для исследования роста опухоли, времени выживания мышей и патологических характеристик. После индукции мышей немедленно приносили в жертву, а образцы (щитовидная железа, легкие и печень) собирали после обнаружения одного из следующих состояний: 1) респираторный дистресс, вызванный компрессией опухоли; 2) снижение аппетита и аномальная вокализация; 3) необычайно вялая вялость; и 4) потеря массы тела более чем на 20%. В процессе отбора проб мы обнаружили, что у всех мышей (12/12) успешно сформировались...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Критические шаги в протоколе вскрытия опухоли щитовидной железы
Во время рассечения нужно правильно понимать анатомическое расположение щитовидной железы. Щитовидная железа представляет собой железу в форме бабочки, расположенную на дорсальной стороне подчелюстной железы рядом со щитовидным хрящом и трахеей. Во время процедуры тщательно избегали перерезания кровеносных артерий с обеих сторон шеи.

Модификация и устранение неисправностей породы mATC
УВД яв...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

У авторов нет конфликтов интересов, о которых можно было бы заявить.

Благодарности

Эта работа была поддержана Национальной программой развития ключевых исследований Китая (2021YFA1301203); Национальный фонд естественных наук Китая (82103031, 82103918, 81973408, 82272933); Инкубационный проект клинических исследований, Западно-Китайская больница, Сычуаньский университет (22HXFH019); Проект международного сотрудничества Муниципального научно-технического бюро Чэнду (2020-GH02-00017-HZ); Фонд естественных наук провинции Сычуань, 2022NSFSC1314; «Проект 1.3.5 по дисциплинам передового опыта, Западно-Китайская больница, Сычуаньский университет» (ZYJC18035, ZYJC18025, ZYYC20003, ZYJC18003); и Сычуаньская научно-техническая программа (2023YFS0098).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
100x  Раствор для извлечения цитратного антигена (PH 6.0)MXBCat# MVS-0101
50x раствор для извлечения антигена EDTA (pH 9.5)ZSGB-GIOCat# ZLI-9071
Brafflox/wt мышейСотрудничество с Институтом наук о жизни, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Чэнду, Китай
Caspase-3BeyotimeCat# AC033
Технология клеточной сигнализацииCD8Cat# 98941; RRID:AB_2756376
CD206Технология клеточной сигнализацииCat# 24595; RRID:AB_2892682
Камера для индукции анестезииRWDlifescience
Enhanced DAB хромогенный наборMXBCat# DAB-2031
Раствор для окрашивания эозинаZSGB-GIOCat# ZLI-9613
F4/80AbcamCat# 100790; RRID:AB_10675322
Технология клеточной сигнализацииFoxp3Cat# 12653; RRID:AB_2797979
Полностью закрытый дегидратор тканейLeica BiosystemsASP300S
раствор для окрашивания гематоксилинаZSGB-GIOCat# ZLI-9610
HistoCore Arcadia полностью автоматическая машина для встраивания тканейLeica Biosystems
Ki67BeyotimeCat# AF1738
Вращающийся слайсерRWDlifescience  Наборы для обнаружения Minux S700
SPlink (Biotin-Streptavidin HRP Detection Systems)ZSGB-GIOCat# SP-9001
TPO-cre/ERT2Сотрудничество с Институтом наук о жизни, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Чэнду, Китай
Trp53flox/wt miceСотрудничество с Институтом наук о жизни, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Чэнду, Китай
Ультразвуковая дробилкаNingbo Xinyi Ultrasound Equipment Co., LtdJY92-IIN
Ультразвуковой гельKepplerKL-250
Ультразвуковая системаVisualSonicsVevo 3100

Ссылки

  1. Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. Cancer statistics, 2019. CA: A Cancer Journal for Clinicians. 69 (1), 7-34 (2019).
  2. Parenti, R., Salvatorelli, L., Magro, G. Anaplastic thyroid carcinoma: Current treatments and potential new therapeutic options with emphasis on TfR1/CD71. International Journal of Endocrinology. 2014, 685396(2014).
  3. Baldini, E., et al. In vitro and in vivo effects of the urokinase plasminogen activator inhibitor WX-340 on anaplastic thyroid cancer cell lines. International Journal of Molecular Sciences. 23 (7), 3724(2022).
  4. Haugen, B. R. American Thyroid Association Management guidelines for adult patients with thyroid nodules and differentiated thyroid cancer: what is new and what has changed. Cancer. 123 (3), 372-381 (2015).
  5. O'Neill, J. P., Shaha, A. R. Anaplastic thyroid cancer. Oral Oncology. 49 (7), 702-706 (2013).
  6. Simoes-Pereira, J., Capitao, R., Limbert, E., Leite, V. Anaplastic thyroid cancer: Clinical picture of the last two decades at a single oncology referral centre and novel therapeutic options. Cancers. 11 (8), 1188(2019).
  7. Fagin, J. A., Wells, S. A. Biologic and clinical perspectives on thyroid cancer. The New England Journal of Medicine. 375 (11), 1054-1067 (2016).
  8. Neff, R. L., Farrar, W. B., Kloos, R. T., Burman, K. D. Anaplastic thyroid cancer. Endocrinology and Metabolism Clinics of North America. 37 (2), 525-538 (2008).
  9. Lareau, C. A., et al. Droplet-based combinatorial indexing for massive-scale single-cell chromatin accessibility. Nature Biotechnology. 37 (8), 916-924 (2019).
  10. Guo, H., et al. Single-cell methylome landscapes of mouse embryonic stem cells and early embryos analyzed using reduced representation bisulfite sequencing. Genome Research. 23 (12), 2126-2135 (2013).
  11. Mooijman, D., Dey, S. S., Boisset, J. -C., Crosetto, N., van Oudenaarden, A. Single-cell 5hmC sequencing reveals chromosome-wide cell-to-cell variability and enables lineage reconstruction. Nature Biotechnology. 34 (8), 852-856 (2016).
  12. Smallridge, R. C., Marlow, L. A., Copland, J. A. Anaplastic thyroid cancer: molecular pathogenesis and emerging therapies. Endocrine-Related Cancer. 16 (1), 17-44 (2009).
  13. Charles, R. -P. Overview of genetically engineered mouse models of papillary and anaplastic thyroid cancers: enabling translational biology for patient care improvement. Current Protocols in Pharmacology. 69, 1-14 (2015).
  14. Tuttle, R. M., Haugen, B., Perrier, N. D. Updated American joint committee on cancer/tumor-nodemetastasis staging system for differentiated and anaplastic thyroid cancer (8th Edition): What changed and why. Thyroid. 27 (6), 751-756 (2017).
  15. McFadden, D. G., et al. p53 constrains progression to anaplastic thyroid carcinoma in a Braf-mutant mouse model of papillary thyroid cancer. Protocols of the National Academy of Sciences. 111 (16), 1600-1609 (2014).
  16. Gunda, V., et al. Combinations of BRAF inhibitor and anti-PD-1/PD-L1 antibody improve survival and tumour immunity in an immunocompetent model of orthotopic murine anaplastic thyroid cancer. British Journal of Cancer. 119 (10), 1223-1232 (2018).
  17. He, Y., et al. High-resolution ultrasonography for the analysis of orthotopic ATC tumors in a genetically engineered mouse model. Journal of Visualized Experiments. (188), e64615(2022).
  18. Zhang, L., et al. Novel recurrent altered genes in Chinese patients with anaplastic thyroid cancer. The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 106 (4), 988-998 (2021).
  19. Luo, H., et al. Pan-cancer single-cell analysis reveals the heterogeneity and plasticity of cancer-associated fibroblasts in the tumor microenvironment. Nature Communications. 13 (1), 6619(2022).
  20. Luo, H., et al. Characterizing dedifferentiation of thyroid cancer by integrated analysis. Science Advances. 7 (31), (2021).
  21. Knostman, K. A. B., Jhiang, S. M., Capen, C. C. Genetic alterations in thyroid cancer: the role of mouse models. Veterinary Pathology. 44 (1), 1-14 (2007).
  22. Kim, C. S., Zhu, X. Lessons from mouse models of thyroid cancer. Thyroid. 19 (12), 1317-1331 (2009).
  23. Champa, D., Di Cristofano, A. Modeling anaplastic thyroid carcinoma in the mouse. Hormones and Cancer. 6 (1), 37-44 (2015).
  24. Cabanillas, M. E., Ryder, M., Jimenez, C. Targeted therapy for advanced thyroid cancer: kinase inhibitors and beyond. Endocrine Reviews. 40 (6), 1573-1604 (2019).
  25. Ljubas, J., Ovesen, T., Rusan, M. A systematic review of phase II targeted therapy clinical trials in anaplastic thyroid cancer. Cancers. 11 (7), 943(2019).
  26. Huang, N. -S., et al. An update of the appropriate treatment strategies in anaplastic thyroid cancer: a population-based study of 735 patients. International Journal of Endocrinology. 2019, 8428547(2019).
  27. Subbiah, V., et al. Dabrafenib and trametinib treatment in patients with locally advanced or metastatic BRAF V600-mutant anaplastic thyroid cancer. Journal of Clinical Oncology. 36 (1), 7-13 (2018).
  28. Baldini, E., et al. Effects of selective inhibitors of Aurora kinases on anaplastic thyroid carcinoma cell lines. Endocrine-Related Cancer. 21 (5), 797-811 (2014).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Спонтанная мышиная модель анапластического рака щитовидной железы
Свяжитесь с нами
Рекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

Авторские права © 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.