Методическая статья

ВЭЖХ в сочетании с химическими отпечатками пальцев для распознавания нескольких образов для идентификации подлинности Clematidis Armandii Caulis

DOI:

10.3791/64690

⸱

11 ноября 2022 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1School of Pharmacy, The Second Class Laboratory of Traditional Chinese Medicine Pharmaceutics, National Administration of Traditional Chinese Medicine, Chengdu Medical College, 2Pengzhou Second People's Hospital

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Здесь мы представляем протокол для создания высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в сочетании с химическим распознаванием отпечатков пальцев с несколькими образами, который обеспечивает новую стратегию эффективной идентификации подлинных сортов Clematidis Armandii Caulis и его фальсификаторов.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Метод идентификации китайских лекарственных материалов и связанных с ними фаяльсий был построен на примере Clematidis Armandii Caulis (Chuanmutong, повсеместно используемая традиционная китайская медицина). Десять партий подлинных сортов Чуаньмутонг и пять партий родственных фальсификатов были проанализированы и сопоставлены на основе высокоэффективных отпечатков пальцев жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в сочетании с хемометрией, включая кластерный анализ (CA), анализ главных компонентов (PCA) и ортогональный частичный анализ дискриминации наименьших квадратов (OPLS-DA). Кроме того, определяли содержание β-ситостерина. Контрольный химический отпечаток Чуаньмутонга был установлен, и было идентифицировано 12 общих пиков. Сходство между отпечатком пальца 10 партий подлинных разновидностей Chuanmutong и контрольным отпечатком пальца составляло 0,910-0,989, в то время как сходство пяти партий фальсификатов составляло всего 0,133-0,720. Основываясь на общих пиках в хроматограмме, 15 партий образцов были классифицированы по трем уровням содержания PCA и были агрегированы в четыре категории CA, что позволило провести четкое различие между подлинными chuanmutong и фальсификатами Chuanmutong. Кроме того, семь дифференциальных компонентов, которые могут эффективно идентифицировать подлинный Чуаньмутонг и фальсификаторы Чуаньмутонга, были обнаружены с помощью OPLS-DA. Содержание β-ситостерина в 10 партиях подлинных сортов Чуаньмутонг составляло 97,53-161,56 мкг/г, в то время как содержание β-ситостерола в пяти партиях фальсификатов сильно варьировалось, среди которых содержание β-ситостерола в Клематис петера Хэнд.-Мазз. и Клематис гуриана Роксб. Var. finetii Rehd. и Уилс. был значительно ниже, чем у аутентичных сортов Чуаньмутонг. Содержание компонентов индекса ВЭЖХ и химический метод распознавания нескольких образов отпечатков пальцев, установленный в этом исследовании, обеспечивают новую стратегию эффективной идентификации подлинных китайских лекарственных материалов и связанных с ними фальсификатов.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Чуаньмутонг, сухой каулис клематиса армандии Франч. или Clematis montana Buch.-Ham., является традиционной китайской медициной, обычно используемой в клиниках 1,2,3. Он используется для лечения проблем с мочеиспусканием, отеков, язв на языке и во рту, снижения секреции молока, жесткости суставов и мышечной боли, вызваннойвлажным теплом 4. Чуаньмутонг всегда получали из диких сортов, в основном распространенных на юго-западе Китая, особенно в провинции Сычуань, где лучшее качество можно найти 5,6. Трудно отличить аутентичные сорта от их близкородственных фальсификаторов из-за их схожих характеристик 7,8,9,10. Стандарт качества Chuanmutong в издании Китайской фармакопеи 2020 года предусматривает только свойства, микроскопическую идентификацию и тонкослойную идентификацию без определения содержания, которая не может эффективно идентифицировать фальсификаторов и, следовательно, имеет потенциальные риски. Кроме того, существует мало сообщений, сравнивающих и идентифицирующих Чуаньмутонг и родственные растения. Следовательно, метод контроля качества для обеспечения подлинности Chuanmutong заслуживает дальнейшего изучения.

Химические компоненты Chuanmutong в основном состоят из пентациклических тритерпеноидов типа олеана и их гликозидов, флавоноидов и органических кислот 11,12,13,14. Среди них олеаноловая кислота, β-ситостерин, стигмастерин и эргостерин обладают мочегонным действием различной интенсивности, которые могут быть потенциальными фармакодинамическими веществами для стимулирования диуреза и облегчения странгурии15,16. Химические отпечатки пальцев получают путем разделения и обнаружения многих химических компонентов, содержащихся в образцах, с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), газовой хроматографии (ГХ) и т.д. Принятие соответствующих методов статистического анализа для анализа характеристик Chuanmutong может определить общий контроль качества и научную идентификацию традиционной китайской медицины 17,18,19.

В этом исследовании было собрано 10 партий аутентичных сортов Чуаньмутонг и пять партий фальсификатов. Их качество сравнивалось и анализировалось методом отпечатков пальцев ВЭЖХ в сочетании с распознаванием нескольких образов, включая кластерный анализ (CA), анализ главных компонентов (PCA), ортогональный частичный анализ дискриминации наименьших квадратов (OPLS-CA) и определение содержания фармакодинамического компонента. Этот протокол устанавливает метод идентификации аутентичных сортов с высокой специфичностью, новую стратегию научной идентификации аутентичных сортов и фальсификатов китайских лекарственных материалов.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Методы химического обнаружения отпечатков пальцев

  1. Хроматографические условия
    1. Подготовьте подвижную фазу ацетонитрила (А)/воды (В). Установите градиентную программу следующим образом в программном обеспечении ВЭЖХ: 0-20 мин, 3%А-10%А; 20-25 мин, 10%А-13%А; 25-65 мин, 13%А-25%А; 65-75 мин, 25%А-40%А; 75-76 мин, 40%А-3%А; 76-85 мин, 3%А-3%А.
    2. Поддерживать скорость потока подвижной фазы на уровне 1,0 мл/мин.
    3. Проводят хроматографическое разделение на колонке C18 (250 мм x 4,6 мм, 5 мкм), поддерживаемой при 30 °C.
    4. Установите объем инъекции на 10 мкл.
    5. Обнаружение образцов на длине волны 205 нм.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Для конкретных настроек хроматографических условий обратитесь к процедурам работы рабочего программного обеспечения высокоэффективной жидкостной хроматографии (Таблица материалов).
  2. Приготовление пробного раствора
    1. Измельчите сырье до однородного размера частиц, пропуская их через нейлоновую сетку с внутренним диаметром 850 мкм ± 29 мкм.
    2. Поместите 2 г измельченного сырья (точно взвешенного) в коническую колбу объемом 50 мл с пробкой и добавьте 50 мл метанола. Поместите пробку на колбу и ультразвук (600 Вт, 40 кГц) на 30 мин.
    3. Затем охладите колбу до комнатной температуры (RT). Снова взвесьте образцы и восполните первоначальный вес, заменив потерянный экстрагент.
    4. Перелейте 4 мл раствора метанола, содержащего лекарственные экстракты, в объемную колбу объемом 10 мл. Добавить 6 мл H2O, перемешать и дать ему отстояться в течение 10 мин.
    5. Наконец, отфильтруйте супернатант через фильтрующую мембрану 0,45 мкм и поместите его в режим ожидания.
  3. Валидация методов обнаружения отпечатков пальцев
    1. Подготовьте образец, как описано выше (этап 1.2), и подвергайте его анализу ВЭЖХ (этап 1.1) шесть раз в день. Для оценки точности рассчитайте относительное стандартное отклонение (RSD) относительного времени удержания и относительных пиковых областей, как описано в шаге 1.3.5.
    2. Оцените стабильность образца раствора путем анализа того же образца раствора, хранящегося в RT в течение 0, 2, 4, 6, 8, 12 и 24 ч, и рассчитайте RSD относительного времени удержания и относительных пиковых областей, как описано в шаге 1.3.5.
    3. Возьмите шесть реплик одного и того же образца (CMT-4), подготовьте образец раствора в соответствии с вышеуказанной процедурой (шаг 1.2) и обнаружите его отпечаток пальца в ВЭЖХ после шага 1.1. Рассчитайте RSD относительного времени удержания и относительных пиковых областей и оцените его повторяемость, как описано в шаге 1.3.5.
    4. Затем используйте пиковое число 10 на рисунке 1B в качестве эталонного пика и рассчитайте RSD относительного времени удержания и относительной пиковой области каждого общего пика, как описано в шаге 1.3.5.
    5. Используйте формулы, упомянутые ниже, чтобы рассчитать относительное время удержания и относительную пиковую площадь каждого общего пика:
      Tre = Tхарактеристика/Tссылка
      Are = Характеристика/Ссылка A
      Где Tre = относительное время удержания, T-характеристика = характерное время удержания пика, Treference = контрольное время удержания пика, Are = относительная пиковая площадь, A характеристика = характерная пиковая область и Areference = опорная пиковая область.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Создание отпечатков пальцев традиционной китайской медицины обычно требует выбора хроматографического пика, который легко получить и имеет высокое разрешение. Это используется в качестве эталонного пика для идентификации отпечатков пальцев и изучения их стабильности и воспроизводимости.

2. Установление анализа отпечатков пальцев и сходства Chuanmutong

  1. Используйте 10 партий аутентичных образцов и пять партий фальсификатов, таких как Clematis argentilucida (Levl. et Vant.) W. T. Wang (CC), Clematis apiifolia var. obtusidentata Rehd. и Уилс. (DC), Клематис петере Хэнд.-Мазз. (DE), Клематис гуриана Роксб. Var. finetii Rehd. et Wils (XS) и Clematis finetiana Levl. и Ваниот. (SMT) в качестве образцов для анализа отпечатков пальцев.
  2. Подготовьте образцы решений, как описано в шаге 1.2. Выполните анализ отпечатков пальцев всех образцов растворов методом ВЭЖХ в соответствии с условиями, описанными на этапе 1.1.
  3. Импорт соответствующих данных в систему оценки сходства хроматографических отпечатков пальцев традиционной китайской медицины (SESCF-TCM, версия 2012 года). Система будет обозначать пики с разумной высотой и хорошим разрешением в хроматограммах всех образцов как общие пики.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Программное обеспечение SESCF-TCM можно загрузить после регистрации на веб-сайте Китайской фармакопейной комиссии (http://114.247.108.158:8888/login).
    1. В программном обеспечении нажмите кнопку Установить опорный спектр в меню.
    2. Затем в окне Параметры параметров установите ширину временного окна равным 0,5 и выберите Метод генерации контрольного спектра в качестве Метода медианы.
    3. Нажмите « Многоточечная калибровка» в главном меню, затем выберите «Пиковое соответствие» как «Полное сопоставление пикового спектра».
    4. Наконец, нажмите «Создать элемент управления», чтобы сгенерировать эталонный хроматографический отпечаток аутентичного вида Chuanmutong.
  4. Импортируйте время хранения и пиковую область 10 партий подлинных образцов Chuanmutong и пяти партий фальсификатов в SESCF-TCM для анализа. Конкретные операции заключаются в следующем:
    1. В программном обеспечении нажмите на кнопку Установить опорный спектр в главном меню.
    2. В окне Параметры установите эталонный хроматографический отпечаток аутентичного вида Chuanmutong в качестве эталона, выберите Метод генерации контрольного спектра в качестве Медианного метода и установите ширину временного окна равным 0,5.
    3. Нажмите « Многоточечная калибровка» в главном меню, затем выберите «Пиковое соответствие» как «Полное сопоставление пикового спектра».
    4. Наконец, нажмите «Рассчитать сходство», чтобы рассчитать сходство на основе отпечатков пальцев эталонной хроматограммы Chuanmutong. Наконец, рассчитайте сходство отпечатков пальцев с помощью системы оценки хроматографических отпечатков пальцев китайской медицины (версия 2012 года).
      ПРИМЕЧАНИЕ: Для конкретных операций обратитесь к эксплуатационным спецификациям для системы оценки хроматографических отпечатков пальцев китайской медицины (версия 2012 года).

3. Мульти-распознавание образов отпечатка пальца Chuanmutong

  1. Кластерный анализ (CA)
    1. Используйте пиковые области 12 общих пиков в отпечатках пальцев 10 партий подлинных образцов Chuanmutong и их пяти партий фальсификатов в качестве переменных и введите их в программное обеспечение статистического анализа для систематического кластерного анализа (CA).
    2. Выберите метод between-Groups и используйте коэффициент корреляции Пирсона в качестве классификационной основы для построения диаграммы кластерного анализа Chuanmutong и его фальсификатов. Конкретные операции заключаются в следующем:
      1. В программном обеспечении для статистического анализа нажмите Файл, чтобы импортировать данные.
      2. Нажмите «Анализ » в меню, а затем выберите «Кластеризация системы в классификации».
      3. Выберите общую пиковую область в качестве переменной и установите число кластеров равным четырем.
      4. Щелкните Метод, выберите метод кластеризации как Межгрупповое соединение, выберите интервал измерения как Корреляция Пирсона и нажмите кнопку ОК , чтобы нарисовать карту ЦС.
  2. Анализ главных компонентов (PCA)
    1. Импортируйте относительную общую пиковую область аутентичных сортов и их фальсификатов в аналитическое программное обеспечение для анализа PCA и используйте карту баллов PCA для оценки матричной карты различий выборки. Конкретные операции заключаются в следующем:
      1. Откройте программное обеспечение для анализа данных, нажмите на Файл в меню и создайте новый обычный проект. Импортируйте пиковую область из 12 общих пиков в электронную таблицу (например, в формате Excel) из системы ВЭЖХ. Затем нажмите «Готово», чтобы завершить импорт данных.
      2. Нажмите кнопку Создать , чтобы создать новую модель, чтобы задать тип модели с помощью PCA. Нажмите «Автоподбор » и «Добавить », чтобы соответствовать данным, затем нажмите « Оценки», чтобы получить карту оценок PCA.
  3. Ортогональный частичный анализ дискриминации наименьших квадратов (OPLS-DA)
    1. Используйте метод ортогонального частичного дискриминационного анализа наименьших квадратов с режимом наблюдения для дальнейшего анализа относительных пиковых пиковых пиков аутентичных разновидностей Чуаньмутонг и фальсификаторов и составления карты классификационных показателей OPLS-DA всех образцов. Конкретные операции заключаются в следующем:
      1. В программном обеспечении для анализа данных нажмите Файл в меню, чтобы импортировать файл и создать новый обычный проект. Импортируйте пиковую область из 12 распространенных пиков в электронную таблицу из системы ВЭЖХ, затем нажмите «Готово», чтобы завершить импорт данных.
      2. Нажмите кнопку Создать , чтобы создать новую модель, чтобы задать тип модели с помощью PCA. Нажмите «Автоподбор» и «Добавить », чтобы соответствовать данным. Затем нажмите « Баллы», чтобы получить карту баллов PCA.
      3. Нажмите « Создать» и выберите «Создать как модель один », чтобы задать тип модели с помощью OPLS-DA.
      4. Нажмите « Масштаб» и установите тип с помощью Par for All. Сначала нажмите «Автоподбор», а затем нажмите « Оценки», чтобы получить карту оценок OPLS-DA.
    2. Чтобы определить влияние каждого общего пика в Чуаньмутонге на результаты его классификации и разницу между подлинными материалами Чуаньмутонг и связанными с ними фальсификаторами, используйте переменную важность в проекции (VIP) для анализа.
    3. Нарисуйте VIP-карту различных компонентов Chuanmutong. Используйте полученную КАРТУ VIP для оценки влияния каждой переменной на классификацию и отсеивания компонентов, которые вносят значительный вклад в различия между группами. Конкретные операции заключаются в следующем:
      1. В программном обеспечении для анализа данных нажмите «Анализ» в меню и нажмите « Перестановки», установите число перестановок равным 200 и получите R2 и Q2 карты оценок OPLS-DA.
      2. Нажмите на VIP и выберите VIP Predictive , чтобы получить VIP-карту.

4. Определение β-ситостерина в Чуаньмутонге методом ВЭЖХ

  1. Хроматографические условия (см. шаг 1.1)
    1. Подготовьте подвижную фазу: метанол-вода (97:3).
    2. Установите скорость потока подвижной фазы на уровне 1,0 мл/мин.
    3. Проводят хроматографическое разделение на колонке C18 (250 мм x 4,6 мм, 5 мкм), поддерживаемой при 30 °C.
    4. Установите объем инъекции на 10 мкл.
    5. Обнаружение компонента на длине волны 204 нм.
  2. Приготовление пробного раствора
    1. Готовят стандартный раствор β-ситостерина (0,1 мг/мл) путем растворения точно взвешенного количества соответствующего эталона в метаноле.
    2. Измельчите анализируемый образец сырья до однородного размера частиц, пропуская образец через нейлоновую сетку с внутренним диаметром 180 мкм ± 7,6 мкм.
    3. Поместите 2 г измельченного сырья (точно взвешенного) в колбу с круглым дном и добавьте в нее 50 мл хлороформа.
    4. Подключите колбу к конденсатору рефлюкса и нагревайте ее на кипящей водяной бане (умеренное кипячение) в течение 60 мин. Процедите экстракционный раствор фильтровальной бумагой размером 15-20 мкм.
    5. Выпаривают фильтрат почти до сухости на кипящей водяной бане (умеренное кипячение) около 10 мин.
    6. Растворить остаток и восполнить объем до 5 мл с помощью метанола. Наконец, пропустите супернатант через фильтрующую мембрану 0,45 мкм и поместите его в режим ожидания.
  3. Проверка метода
    1. Возьмите готовый раствор β-ситостерина, приготовленного на подстадии 4.2.1, разбавьте его 100% метанолом и приготовьте растворы с концентрациями 100 мкг/мл, 80 мкг/мл, 60 мкг/мл, 50 мкг/мл, 40 мкг/мл, 30 мкг/мл и 20 мкг/мл.
    2. Вводят образцы в хроматографических условиях, описанных на этапе 4.1, для определения площади пика, выполняют регрессионный анализ с пиковой площадью к объему впрыска и получают уравнение регрессии и коэффициент корреляции для оценки его линейности.
    3. Подготовьте образцы, как описано выше (этап 4.2), и подвергните их анализу ВЭЖХ (этап 4.1) шесть раз в тот же день. Затем рассчитайте RSD пиковых областей для оценки точности.
    4. Оцените стабильность образца раствора путем анализа тех же образцов растворов, хранящихся в RT в течение 0, 2, 4, 6, 8, 12 и 24 ч, как описано на этапе 4.1. Затем рассчитайте RSD пиковых областей, как описано в шаге 1.3.5.
    5. Исследуют повторяемость путем растворения одного и того же образца (CMT-4) в секступликате, приготовленном, как описано на этапе 4.2, и подвергая их анализу ВЭЖХ, как описано на этапе 4.1. Затем рассчитайте RSD содержания β-ситостерина в шести образцах.
    6. Оцените точность метода, используя стандартный метод сложения. Для этого добавьте β-ситостериновые эталонные растворы к образцам на 80%, 100% и 120% от содержания β-ситостерина и повторите каждое состояние три раза, как описано на этапе 4.1. Оцените точность метода, рассчитав среднее извлечение и RSD.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Формула расчета коэффициента извлечения (РР) выглядит следующим образом:
      RR % = [(Mt - M0) / Ms] × 100
      Где Mt = качество β-ситостерина после добавления стандарта, M0 = качество пробного раствора, а M s = качество добавленного β-ситостерина.
  4. Определение содержания β-ситостерина в образцах
    1. Возьмите 10 партий аутентичных китайских лекарственных материалов и пять партий связанных фальсификатов для приготовления образцов растворов в соответствии с этапом 4.2.
    2. Затем вводят каждый образец раствора и β-ситостерола эталонным раствором для определения пиковой площади в условиях, описанных на этапе 4.1, и рассчитывают содержание β-ситостерина в каждом образце с использованием внешнего стандартного одноточечного метода.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Хроматографический отпечаток чуаньмутонга и анализ подобия (SA)
Значения RSD относительного времени удержания точности, повторяемости и стабильности были ниже 0,46%, 1,65% и 0,53% соответственно; значения RSD относительной пиковой области были ниже 4,23%, 3,56% и 3,96% соответственно. Как показано на рисунках 1A, B, было 12 различных общих пиков (от пика 1 до пика 12) в отпечатках ВЭЖХ в 10 подлинных образцах Chuanmutong. Поскольку пиковая область No 10 б...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Сбор образцов для исследований является первым ключевым шагом к построению многоконтактного распознавания в определении подлинности китайских лекарственных материалов. Благодаря исследованию рынка мы обнаружили, что Сычуань Яань, Ляншань и Лэшань являются основными районами добычи диких ресурсов Чуаньмутуна. Родственные сорта одного рода также имеют одинаковое географическое распространение 6,20; CC, DC, DE, XS и SMT часто неправильно используются как Chuangmuton...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта работа была поддержана Проектом Администрации традиционной китайской медицины провинции Сычуань (No 2020JC0088, No 2021MS203).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Уксусная кислотаZhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Тяньцзинь, Китай2017381038
ацетонитрилSigma-Aldrich  Trading Co., Ltd., Шанхай, КитайWXBD5243V
β-SitosterolMeisai Biological Technology Co., Ltd., Чунцин, Китай20210201
  C18 колонкаYuexu Material Technology Co., Ltd., Шанхай, КитайWelch Ultimate LP
ChuanmutongGuoqiang Chinese Herbal Pieces Co., Ltd., Сычуань, Китай 19020103CMT-1
ChuanmutongHongya Wawushan Pharmaceutical Co., Ltd., Сычуань, Китай 200701CMT-2
ChuanmutongHongpu Pharmaceutical Co., Ltd., Сычуань, Китай 200701CMT-3
ChuanmutongHongpu Pharmaceutical Co., Ltd., Сычуань, Китай 200901CMT-4
ChuanmutongXinrentai Pharmaceutical Co., Ltd., Сычуань, Китай 210701CMT-5
ChuanmutongHaobo Pharmaceutical Co., Ltd., Сычуань, Китай 210401CMT-6
ChuanmutongXinrentai Pharmaceutical Co., Ltd., Сычуань, Китай 200901CMT-7
ChuanmutongWusheng Pharmaceutical Group Co., Ltd., Сычуань, Китай 201201CMT-8
ChuanmutongLimin Chinese Herbal Pieces Co., Ltd., Сычуань, Китай 201001CMT-9
ChuanmutongYuhetang Pharmaceutical Co., Ltd., Сычуань, Китай210501CMT-10
Clematis argentilucida (Levl. et Vant.) W. T.Wang Madzi Bridge, поселок Саньлан, округ Тяньцюань, Сычуань, Китай -CC
Clematis apiifolia var. obtusidentata Rehd. et Wils.Деревня Хэйлинь, поселок Цилипин, уезд Хунъя, Сычуань, Китай -DC
Clematis peterae Hand.-Mazz.Деревня Хуанму, поселок Хуанму, уезд Ханьюань, провинция Сычуань, Китай -DE
Clematis gouriana Roxb. Var. finetii Rehd. et WilsMixedang Mountain, поселок Хуанвань, уезд Эмэй, Сычуань, Китай -XS
Clematis finetiana Levl. et Vaniot.Деревня Ваньнянь, поселок Хуанвань, уезд Эмэй, провинция Сычуань, Китай -Электронные
весыHaozhuang Hengping Scientific Instrument Co., Ltd., Шанхай,   Китай FA1204
ErgosterolMeisai Biological Technology Co., Ltd, Чунцин, Китай20210201
этанолKelon Chemical Co., Ltd., Чэнду, Китай2021112602
этилацетатZhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Тяньцзинь, Китай2017042043
муравьиной кислотойKelon Chemical Co., Ltd., Чэнду, Китай2016062901
Высокоэффективная жидкостная хроматографияAgilent, США.1260
IBM SPSS Statistics версия 26.0International Business Machines Corporation, США-Метанол
Sigma-Aldrich  Trading Co., Ltd., Шанхай, КитайWXBD6409V
метанолKelon Chemical Co., Ltd., Чэнду, Китай202010302
н-бутиловый спиртZhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Тяньцзинь, Китай2020071047
Нефтяной эфирZhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd., Тяньцзинь, Китай2020090125
фосфорной кислотеComeo Chemical Reagent Co., Ltd., Тяньцзинь, Китай20200110
SESCF-TCM версия 2012Национальная фармакопейная комиссия, Китай-http://114.247.108.158:8888/login
StigmasterolMeisai Biological Technology Co., Ltd., Чунцин, Китай20210201
TrichloromethaneSinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd., Шанхай, Китай20200214
версия Umetrics SIMCA 14.1.0.2047Umetrics,Швеция-https://www.sartorius.com/en/products/process-analytical-technology/data-analytics-software/mvda-software/simca/simca-free-trial-download
Машина для сверхчистой водыYoupu Ultrapure Technology Co., Ltd., Сычуань, КитайUPH-II-10T
Ультразвуковой очистительKunshan Hechuang Ultrasound Instrument Co., Ltd., Цзянсу, КитайKH3200E
SMT

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chen, C. R. Chinese Medicine Specimen Picture Book. , Shanghai World Book Company. Shanghai. 116(1935).
  2. Xiong, J., et al. Lignans from the stems of Clematis armandii ("Chuan-Mu-Tong") and their anti-neuroinflammatory activities. Journal of Ethnopharmacology. 153 (3), 737-743 (2014).
  3. Pan, L. L., et al. a lignan from the Chinese medicinal plant Clematis armandii, inhibits A431 cell growth via blocking p70S6/S6 kinase pathway. Integrative Cancer Therapies. 16 (3), 351-359 (2017).
  4. Chinese Pharmacopoeia Commission. Pharmacopoeia of The People's Republic of China: (Edition 2020). , The Medicine Science and Technology Press of China. China., Beijing. 38(2020).
  5. Wang, D. G., Guo, J. L. Textual research on the materia medica and authenticity of Clematidis armandii. Lishizhen Medicine and Materia Medicine Research. 18 (11), 2696(2007).
  6. Fang, Q. M., Zhang, M., Zhong, Y. Y. The natural resources and exploitation of Caulis Clematidis Armandii in Sichuan. West China Journal of Pharmaceutical Sciences. 20 (5), 404-406 (2005).
  7. Bai, M. N., Dai, Y. X., Wang, Y., Ren, Y. Y., Tan, R. Study on the identification of Caulis Clematidis Armandii. Research and Practice on Chinese Medicines. 31 (3), 13-16 (2017).
  8. Zhou, P. J., Li, X. F., Fu, D. H., Pu, X. Y., Zhu, G. Q. Pharmacognosy identification of Ethnomedicine Clematis ranunculoides Franchet. Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine. 34 (3), 432-436 (2017).
  9. Guo, J. L., Tang, Y., Pei, J., Wang, D. G. Study on random amplified polymorphic DNA and sequence characterized amplified regions of Caulis Clematidis Armandii. Journal of Chengdu Medical College. 6 (4), 283-286 (2011).
  10. Liu, M. Z., Li, M. N., Yao, H., Liu, P. Molecular identification of Clematidis Armandii Caulis and its adulterants and closely related species by ITS2 sequence. Global Traditional Chinese Medicine. 4 (6), 446-450 (2011).
  11. Liu, J. J., Chen, X., Wei, Z. Q., Li, B. Chemical constituents and identification of the caules of Clematis armandii Franch.and Clematis montana Buch.-Ham. Natural Product Research and Development. 22 (6), 998-1000 (2010).
  12. Yang, T. R., Xu, Z., Shi, Y. N. Studies on four compounds from Clematis Montana. Journal of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine. 10 (4), 142-143 (2008).
  13. Yan, L. H., Xu, L. Z., Zhou, Z. M., Yang, S. L. Chemical constituents from stems of Clematis armandii(I). Chinese Traditional and Herbal Drugs. 38 (3), 340-342 (2007).
  14. Li, X., et al. Traditional uses, phytochemistry, pharmacology, and toxicology of Akebiae Caulis and its synonyms: A review. Journal of Ethnopharmacology. 277, 114245(2021).
  15. Ye, X., et al. Diuretic effect and material basis of Clematidis Armandii Caulis in rats. China Journal of Chinese Materia Medica. 44 (9), 1889-1894 (2019).
  16. Kuang, Y., et al. Consistency study of Caulis Clematidis Armandii and its traditionally used products and counterfeit species based on efficacy and pharmacognosy. Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica. 36 (3), 115-121 (2020).
  17. Li, Y., et al. Quality assessment of Asarum heterotropoides var. mandshuricum based on HPLC multi-component determination and multiple pattern recognition method of fingerprint. Chinese Traditional and Herbal Drugs. 53 (1), 238-243 (2022).
  18. Li, Y., et al. Determination of multi-components of Paeoniae Alba Radix based on fingerprints and chemical pattern recognition. Chinese Traditional and Herbal Drugs. 53 (1), 231-237 (2022).
  19. Li, H. H., et al. Comparative investigation for raw and processed products of Euodiae Fructus based on high-performance liquid chromatography fingerprints and chemical pattern recognition. Chemistry & Biodiversity. 18 (8), 2100281(2021).
  20. Dong, L. J., et al. Study on suitable distribution areas of Kawa Kimichi produced in Sichuan province-based on remote sensing and GIS-A case study of Clematis Armandii. Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica-World Science and Technology. 17 (11), 2398-2404 (2015).
  21. Tang, S. W., Pei, J., Li, F. Y. Morphological and histological identification of Chuanmutong. West China Journal of Pharmaceutical Sciences. 15 (1), 19-21 (2000).
  22. Li, B., Chen, X., Fang, Q. M., Zhang, B. J., Wei, Z. Q. Quality Research of Chuanmutong. Journal of Sichuan of Traditional Chinese Medicine. 27 (6), 58-60 (2009).
  23. Wu, W. J., Wan, M. M., Cao, Y. H., Tan, R., Song, L. K. Research on the Quality Standard of Chuanmutong. Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine. 33 (2), 313-315 (2015).
  24. Wei, Z. Q., Chen, X., Li, B., Dong, X. P. Determination of stigmasterol in Clematis armandii Franch and Clematis montana Buch-Ham. by HPLC. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research. 20 (3), 574-575 (2009).
  25. Qing, L. S., et al. Determination of oleanolic acid in Caulis clematidis armandii by HPLC. West China Journal of Pharmaceutical Sciences. 21 (3), 273-274 (2006).
  26. Yang, S. D., Wang, R., Fu, D. Y., Guo, J. J., Tan, W. Y. Determination on oleanolic acid in caulis clematidis armandii by microwave assisted extraction-HPLC/MS. Anhui Academy of Agricultural Sciences. 38 (13), 6929-6931 (2010).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

ChuanmutongOPLS DA

Похожие статьи