Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Анализ сырых и обработанных образцов корневища ципери методом жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии у крыс с первичной дисменореей

1.9K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/64691

⸱

23 декабря 2022 г.

 ,  ,  ,  ,  , 

В этой статье

Краткое содержание

Здесь представлен сравнительный анализ сырых и обработанных образцов корневища Cyperi (CR) с использованием сверхвысокоэффективной жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии высокого разрешения (UPLC-MS/MS) у крыс с первичной дисменореей. Изменения уровня метаболитов в крови и компонентов образца были исследованы между крысами, получавшими CR, и CR, обработанным уксусом (CRV).

Аннотация

Корневище ципери (КР) широко используется в гинекологии и является общим лекарством для лечения женских заболеваний в Китае. Поскольку обезболивающий эффект CR усиливается после обработки уксусом, CR, обработанный уксусом (CRV), обычно используется клинически. Однако механизм, с помощью которого обезболивающий эффект усиливается при обработке уксусом, неясен. В этом исследовании метод жидкостной хроматографии сверхвысокого давления тандемной масс-спектрометрии (UPLC-MS / MS) использовался для изучения изменений в уровнях экзогенных компонентов и метаболитов в крови между крысами, получавшими CR, и крысами, получавшими CRV, с дисменореей. Результаты показали различные уровни 15 компонентов и двух метаболитов в крови этих крыс. Среди них уровни (-)-миртенола и [(1R,2S,3R,4R)-3-гидрокси-1,4,7,7-тетраметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил]уксусной кислоты в группе CRV были значительно выше, чем в группе CR. CRV снижал уровень простаноидов 2-й серии и лейкотриенов 4-й серии с провоспалительной, агрегационной и вазоконстрикционной активностью и обеспечивал анальгезирующий эффект за счет модуляции метаболизма арахидоновой кислоты и линолевой кислоты и биосинтеза ненасыщенных жирных кислот. Это исследование показало, что обработка уксусом усиливает обезболивающий эффект CR и способствует нашему пониманию механизма действия CRV.

Введение

Первичная дисменорея (БП) является наиболее распространенным заболеванием в клинической гинекологии. Он характеризуется болью в спине, отеком, болью в животе или дискомфортом до или во время менструации без патологии органов малого таза в репродуктивной системе1. Отчет о его распространенности показал, что 85,7% студентов страдают от БП2. Низкие дозы оральных контрацептивов являются стандартной терапией, но их неблагоприятные побочные эффекты, такие как тромбоз глубоких вен, привлекают все большее внимание3. Распространенность тромбоза глубоких вен среди пользователей оральны....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все эксперименты, связанные с животными, проводились с одобрения Комитета по этике экспериментов Чунцинского института ТКМ. В этом эксперименте использовались двадцать четыре самки крыс Sprague Dawley (SD) в возрасте 8-10 недель и весом 200 г ± 20 г.

1. Подготовка экстракции

  1. Вычисление
    1. Запланируйте введение экстракта CR или CRV группе лечения из шести крыс Sprague-Dawley (10 г / [кг ∙ день]) в течение 3 дней. Используйте концентрацию экстракта CR или CRV 1 г / мл (1 мл экстракта получают из 1 г трав).
      ПРИМЕЧАНИЕ: Дозировка CR составляет 6-10 г. В этом исследовании в качестве дозировки использовалась макс....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Анализ модельного эксперимента по дисменорее
В контрольной группе в течение 30 минут не было кривого ответа, потому что этим крысам не вводили внутрибрюшинно окситоцин и бензоат эстрадиола, чтобы вызвать боль. Крысы в группах модели, CR и CRV показали значительные извивающиеся реакции после инъекции окситоцина. Эти результаты демонстрируют эффективность комбинации эстрадиола, бензоата и окситоцина для индукции дисменореи. Различия в уровнях PGF 2α, PGE 2 и PGF2α / PGE 2

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Из-за большого разнообразия и разной природы ТКМ эти травы иногда не работают в клинической практике, и это может быть связано с неправильной обработкой и отваром ТКМ. Механизмы ТКМ становятся все более очевидными с использованием современной науки и техники29,30. Это исследование показывает, что как CR, так и CRV оказывают терапевтическое действие на крыс модели БП и что терапевтический эффект CRV является более существенным. Механизм действия CRV может быть свя.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.

Благодарности

Эта работа была поддержана Научно-техническим проектом китайской медицины Комиссии по здравоохранению и планированию семьи Чунцина (номер проекта: ZY201802297), Общим проектом Чунцинского фонда естественных наук (номер проекта: cstc2019jcyj-msxmX065), Характерным планом создания команды высокоэффективной системы инноваций в области сельскохозяйственных технологий для современной горной местности Чунцина на 2022 год [10] и Проектом строительства ключевой дисциплины Китайской материи муниципальной комиссии по здравоохранению Чунцина Медикаментозная обработка.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Ацетонитрил Fisher Scientific, Питтсбург, Пенсильвания, США 197164
BECKMAN COULTER Microfuge 20Beckman  Коултер, Инк.
Эстрадиола бензоатShanghai Macklin Biochemical Co., LtdC10042616
муравьиной кислотойFisher Scientific, Питтсбург, Пенсильвания, США177799
системой LC 30AShimadzu, Киото, Япония228-45162-46
Оливковое маслоShanghai Yuanye Biotechnology Co., LtdH25A11P111909
Окситоцин синтетическийЧжэцзянская пептидная биология Co., Ltd 
Крыса PGF2α Набор ИФАShanghai lmai Bioengineering Co., Ltd202101
Rat PGFE2 Набор ИФАShanghai lmai Bioengineering Co., LtdEDL202006217
SPF Sprague-Dawley крысыHunan SJA Laboratory Animal Co., LtdНомер сертификата SCXK (Хунань) 2019-0004
Tecan Infinite 200 PRO   Tecan Austria GmbH, Австрия1510002987
системой Triple TOF 4600SCIEX, Фрамингем, Массачусетс, СШАBK20641402
водыFisher Scientific, Питтсбург, Пенсильвания, США152720
MRZ15K0472019092001

Ссылки

  1. Yu, W. Y., et al. Acupuncture for primary dysmenorrhea: A potential mechanism from an anti-inflammatory perspective. Evidence-Based Complementary and Alternative. 2021, 1907009(2021).
  2. Rafique, N., Al-Sheikh, M. H.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Переработка уксусаметабономный анализдифференциальные метаболитыпуть KEGGметод главных компонентортогональный метод частичных наименьших квадратов