$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Все экспериментальные процедуры были рассмотрены и одобрены Институциональным наблюдательным советом больницы Бундан Сеульского национального университета. Для экспериментов в этом исследовании было набрано 34 участника с инсультом. От всех участников было получено подписанное информированное согласие. Подписанное информированное согласие было получено от законного представителя, если участник соответствовал критериям, но не мог подписать форму согласия из-за инвалидности.
1. Экспериментальная установка
- Набор пациентов
- Выполните процесс отбора, используя следующие критерии включения:
В возрасте от 18 до 85 лет с наличием нарушений функций верхних конечностей;
Первый в истории ишемический или геморрагический инсульт, подтвержденный компьютерной томографией головного мозга или магнитно-резонансной томографией;
Способность участника следовать инструкциям по клинической оценке и исследованию ЭЭГ;
Отсутствие в анамнезе каких-либо других психических или неврологических заболеваний, кроме инсульта.
- Исключайте пациентов на основании следующего:
Предшествующее заболевание центральной нервной системы (например, черепно-мозговая травма, опухоль головного мозга, болезнь Паркинсона);
Невозможность носить шапочку ЭЭГ; и
Невозможность следовать инструкциям по клинической оценке и исследованию ЭЭГ.
ПРИМЕЧАНИЕ: Критерии включения и исключения были выбраны для отбора участников, способных участвовать в эксперименте, и регулирования демографических факторов, которые могли бы повлиять на результаты.
- Предоставить всем набранным участникам информацию о деталях экспериментальной процедуры.
- Экспериментальная система: ЭЭГ
- Для записи данных используйте ЭЭГ-систему, состоящую из 32 электродов Ag/AgCl для кожи головы, текстильной шапочки для ЭЭГ и программного обеспечения для записи ЭЭГ.
- Используйте персональный компьютер (ПК) с установленным программным обеспечением для записи ЭЭГ и подключите ПК к ЭЭГ-аппарату через Bluetooth.
- Используйте другой компьютер с программным обеспечением для численного анализа и программирования для проектирования (см. Таблицу материалов).
- Для предъявления стимулов подключите ПК к специальному триггерному блоку (рис. 1).
ПРИМЕЧАНИЕ: Подробные технические характеристики двух ПК приведены в таблице материалов.
- Экспериментальная парадигма, основанная на программном обеспечении
ПРИМЕЧАНИЕ: Участники выполняли задание на разгибание рук, используя пораженные и непораженные руки, во время которых измерялись данные ЭЭГ. На рисунке 2 показана экспериментальная парадигма данного исследования.- Предъявите два визуальных стимула, CLOSE и OPEN, в течение 30 секунд каждый, в центре монитора для измерения исходных данных ЭЭГ в состоянии покоя , во время которых испытуемый закрывает и открывает глаза.
Примечание: Поскольку данные ЭЭГ в состоянии покоя относительно менее загрязнены нежелательными физиологическими артефактами, они полезны для проверки качества данных ЭЭГ и идентификации индивидуальных характеристик ЭЭГ по отношению к состоянию покоя.
- Покажите изображение движения руки в течение 3 с, чтобы проинструктировать участника сделать движение разгибания руки, а затем отметку фиксации в течение 5 с для отдыха.
ПРИМЕЧАНИЕ: Эта процедура рассматривалась как пробная и повторялась 10 раз за один сеанс. Каждый участник прошел по 4 сеанса для каждой руки. После каждой тренировки у участника был перерыв, когда он хотел, чтобы предотвратить чрезмерную усталость.

Рисунок 1: Схема установки оборудования. ПК (ПК1), представляющий экспериментальные стимулы, был подключен к триггерной коробке, а другой ПК (ПК2) был подключен к усилителю ЭЭГ. События стимуляции, генерируемые в ПК1, доставлялись на усилитель ЭЭГ через триггерную коробку, подключенную к ПК1. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 2: Экспериментальная парадигма, использованная в данном исследовании. Одно испытание состояло из разгибательного движения руки в течение 3 с с последующим расслаблением в течение 5 с. Этот паттерн повторялся 10 раз за один сеанс. Всего было проведено восемь сеансов; Четыре сеанса включали в себя затронутые движения рук, в то время как остальные четыре включали в себя незатронутые движения рук. Этот рисунок был адаптирован из Shim et al.17 с разрешения Mary Ann Liebert, Inc. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
2. Запись данных ЭЭГ, связанных с движением
- Настройка ЭЭГ
- Усадите участника в удобное кресло перед монитором.
ПРИМЕЧАНИЕ: Расстояние между участником и монитором должно быть не менее 60 см, чтобы предотвратить усталость глаз. Тем не менее, следует избегать чрезмерной дистанции (например, >150 см), так как она может отвлечь внимание участника.
- Для точного ношения шапочки для измерения ЭЭГ определите местоположение Cz по международной системе 10-20 по пересечению продольной линии, соединяющей нос и инион, и поперечной линии, соединяющей верхнюю часть обоих ушных раковин.
ПРИМЕЧАНИЕ: Шапочка для ЭЭГ может не потребоваться в зависимости от оборудования для измерения ЭЭГ. В этом случае электроды ЭЭГ прикрепляются непосредственно к коже головы по международной системе 10-2015.
- Для точного измерения ЭЭГ используйте шапочку для ЭЭГ соответствующего размера в соответствии с размером головы участника и разместите ее так, чтобы положение электрода Cz находилось на индивидуальном месте Cz.
- Зафиксируйте подбородочный ремень с соответствующей затяжкой; Это предотвратит дискомфорт участника во время глотания и моргания в эксперименте. После этого убедитесь, что положения электродов Т9 и Т10 шапочки ЭЭГ находятся в височной области над обеими ушными раковинами, а положение электрода Fpz шапочки ЭЭГ расположено посередине лба.
ПРИМЕЧАНИЕ: Если эти электроды находятся вне указанного места, подумайте о замене колпачка. В нашем исследовании использовались три размера шапочки для ЭЭГ (54 см: маленькая, 56 см: средняя, 58 см: большая).
- После правильного надевания шапочки для ЭЭГ прикрепите 32 электрода для кожи головы Ag/AgCl по расширенной международной системе 10-10, при этом основной и референсный электроды находятся на Fpz и FCz соответственно16.
ПРИМЕЧАНИЕ: Расположение электрода сравнения (FCz) относительно меньше зависит от различных физиологических артефактов, таких как электроокулография, электромиография и электрокардиография, потому что он расположен вокруг центральной области (Cz) кожи головы.
- Отрегулируйте уровень импеданса между электродами ЭЭГ и кожей головы с помощью проводящего геля и зафиксируйте волосы гелем, чтобы предотвратить препятствие между электродами ЭЭГ и кожей головы.
ПРИМЕЧАНИЕ: Важно подтвердить, не образуется ли какой-либо мост между соседними электродами ЭЭГ из-за утечки геля.
- Используйте программное обеспечение для регистрации ЭЭГ.
- Включите ЭЭГ-систему и выполните Настройка > Выбор усилителя. Выберите Liveamp > > усилитель > подключитесь. Найдите функцию Liveamp для беспроводного соединения (рис. 3).
- Выполните функцию проверки импеданса, чтобы контролировать уровень импеданса для каждого электрода.
ПРИМЕЧАНИЕ: Рекомендуется проводить эксперимент с уровнем импеданса <20 кОм (рис. 4).
- Выполните функцию мониторинга , чтобы убедиться, что ЭЭГ всех электродов имеют одинаковые уровни амплитуды с помощью мониторинга сигнала ЭЭГ в режиме реального времени (рис. 5).
ПРИМЕЧАНИЕ: Амплитуда сигнала ЭЭГ обычно составляет от 10 мкВ до 100 мкВ, а мощность альфа-канала (8-12 Гц) увеличивается вокруг затылочной области, когда глаза закрыты. Поэтому качество данных ЭЭГ можно качественно подтвердить, контролируя уровень амплитуды и альфа-колебания на каналах вокруг затылочной области при закрытых глазах.
- Настройка парадигмы
- Для получения стабильных данных ЭЭГ используйте два отдельных ПК для представления внешних стимулов и записи данных ЭЭГ (см. рис. 1).
- Чтобы представить экспериментальные стимулы участникам, создайте программу стимуляции, основанную на экспериментальной парадигме, используя программное обеспечение для программирования (представлено в шаге 1.3).
ПРИМЕЧАНИЕ: В этом исследовании была создана программная программа стимуляции, но другое программное обеспечение может быть использовано в зависимости от их совместимости с оборудованием ЭЭГ, используемым в эксперименте, а также удобства пользователя. Программный сценарий стимулирования представлен в Дополнительном файле 1 (Experimental_stimulus.m). Информация о событии, указывающая на точку начала стимулов, генерируется собственным программным обеспечением, передается на усилитель ЭЭГ через триггерную коробку и, в конечном итоге, в программное обеспечение для записи ЭЭГ (рис. 1).
- Запустите программу, представляющую экспериментальные стимулы в режиме мониторинга (см. подпункт 2.1.10). Затем убедитесь, что информация о событии своевременно отмечена в нижней части программного обеспечения для записи ЭЭГ каждый раз, когда предъявляется стимул, как показано на рисунке 6.
ПРИМЕЧАНИЕ: Информация о временном моменте записывается всякий раз, когда предъявляется новый стимул, и впоследствии используется для сегментации данных. Поэтому важно максимально получить точные временные точки экспериментальных событий, чтобы не допустить неточной сегментации данных, которая привела бы к недостоверным результатам при анализе.
- Запустите программное обеспечение для регистрации ЭЭГ, затем самостоятельно запустите программу предъявления стимулов, разработанную на основе экспериментальной парадигмы, используя программное обеспечение для предотвращения упущения данных.
ПРИМЕЧАНИЕ: Для удобства анализа данных рекомендуется создавать имена файлов с согласованным правилом хранения данных (например, Sub1_Session1).
- Запись ЭЭГ
- Измерьте ЭЭГ с частотой дискретизации 1000 Гц в соответствии с экспериментальной парадигмой, представленной в шаге 1.3.
ПРИМЕЧАНИЕ: Частота дискретизации может быть изменена в зависимости от диапазона частот ЭЭГ, который исследователь хочет исследовать. Как правило, рекомендуется использовать частоту дискретизации >200 Гц, где информация о ЭЭГ может быть исследована на частоте ≤100 Гц на основе теоремы Найквиста. Это связано с тем, что большая часть информации ЭЭГ существует при частоте ниже 100 Гц.
- Поддерживайте одинаковые условия эксперимента (например, экспериментальное место, оборудование, комнатную температуру и т. д.) как можно дольше между участниками и проинструктируйте их свести к минимуму ненужные движения во время измерения ЭЭГ.

Рисунок 3: Беспроводное соединение между усилителем ЭЭГ и ПК с программным обеспечением для записи ЭЭГ. Выполните действия по порядку: (A) выберите усилитель, (B) подключите усилитель, (C) найдите подключенный усилитель для беспроводного подключения, (D) подключение завершено. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 4: Процедура проверки импеданса для каждого канала. Все каналы должны быть настроены на зеленый цвет для стабильного измерения ЭЭГ. Рекомендуется проводить эксперимент с импедансом менее 20 кОм. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 5: Процедура мониторинга данных в режиме реального времени для каждого канала. Сигналы со всех измеряемых каналов можно отслеживать в режиме реального времени и увеличивать/уменьшать масштаб с помощью опции (красное поле) на верхней панели. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 6: Снимок экрана для мониторинга информации о событиях. Красными полосами обозначены создатели событий, которые представляются каждый раз, когда стимул предоставляется ПК1. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.
3. Анализ данных ЭЭГ
ПРИМЕЧАНИЕ: Данное исследование дает точные рекомендации по воспроизведению концепции исследования. Таким образом, в нем дается краткое описание процесса анализа и репрезентативные результаты. Подробные сведения о процессах и связанных с ними результатах можно найти в предыдущем исследовании17. Это свидетельствует о том, что компания Mary Ann Liebert, Inc. предоставила разрешение на использование материалов, защищенных авторским правом.
- Предварительная обработка
- Удаление артефактов, связанных с глазами, из исходных данных ЭЭГ с помощью математических процедур, основанных на анализе главных компонент, реализованных в программном обеспечении предварительной обработки данных ЭЭГ18,19 (см. таблицу материалов).
ПРИМЕЧАНИЕ: Если какая-либо эпоха показывала заметные артефакты (± 100 мкВ), даже после предварительной обработки на любом из электродов, она исключалась из дальнейшего анализа. Среднее число отвергнутых эпох, включая их стандартное отклонение, составило 3,69 ± 7,15 для задания на движение рук и 1,62 ± 3,95 для задания на движение рук без изменений.
- Примените полосовой фильтр в диапазоне от 0,1 Гц до 55 Гц. Сегментируйте предварительно обработанные данные ЭЭГ от -1 с до 3,5 с для каждого испытания в зависимости от начала задачи, чтобы содержать базовый период, используемый для анализа спектральных возмущений, связанных с событиями (ERSP) и функционального сетевого анализа.
- Анализ ERSP
ПРИМЕЧАНИЕ: Измеренные данные ЭЭГ были проверены с помощью ERSP-анализа для низкобета-диапазона частот (12-20 Гц), связанного с произвольными движениями.- Провести кратковременное преобразование Фурье для каждого испытания для вычисления спектральных мощностей ЭЭГ, для чего использовалась функция newtimef инструментария EEGLAB в программном обеспечении 20 (неперекрывающееся окно Хэннинга, размер окна250 мс).
- Нормализуйте спектр мощности в каждом испытании, вычитая среднюю мощность базового периода (от -1 до 0 с), чтобы исследовать изменения спектральных мощностей между задачей движения руки и базовым периодом.
- Оценка базовых нормализованных карт ERSP для каждого пациента путем усреднения нормализованных спектров мощности по испытаниям.
- Функциональный сетевой анализ
ПРИМЕЧАНИЕ: Функциональный сетевой анализ был проведен для изучения изменений ЭЭГ с точки зрения мозговой сети. Для вычисления взвешенных индексов сети всего мозга на основе теории графов сначала вычислялась связь мозга между различными областями, используя значение фазовой синхронизации (PLV). Затем была вычислена функциональная матрица связности с использованием результатов анализа связности на основе PLV, которая впоследствии была использована для вычисления индексов сети всего мозга17. Все функциональные сетевые анализы выполнялись с помощью программного обеспечения.- Вычислите значение фазовой автоподстройки (PLV) на основе преобразования Гильберта для полосы частот с низким бета-коэффициентом (12-20 Гц) с использованием собственной функции21,22. Собственная функция для вычисления PLV на основе преобразования Гильберта приведена в Дополнительном файле 2 (myPLV.m).
- Оцените PLV между всеми возможными парами 32 электродов ЭЭГ в каждый момент времени в течение периода задания (0-3,5 с) и создайте симметричную матрицу смежности (32 x 32, количество электродов = 32) путем усреднения PLV за период задания. Используйте матрицу PLV в качестве входных данных для сетевого анализа17,23.
- Оцените четыре взвешенных индекса глобальной сети на основе теории графов с помощью инструментария Brain Connectivity Toolbox (https://sites.google.com/site/bctnet): (1) сила, (2) коэффициент кластеризации, (3) длина пути и (4) малость мира 17,24,25.