Здесь мы предлагаем протокол интратрахеальной доставки липополисахаридов (ЛПС) с помощью неинвазивной орофарингеальной эндотрахеальной интубации. Этот метод минимизирует травматичность хирургического вмешательства для животного и точно доставляет ЛПС в трахею, а затем в легкие.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Неинвазивная инстилляция липополисахаридов у мышей
* These authors contributed equally
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Модель мышей с острым повреждением легких (ОПЛ), индуцированная липополисахаридом (ЛПС) или эндотоксином, по-прежнему является одной из наиболее часто используемых моделей в исследованиях на животных острого повреждения легких или острого воспаления. В настоящее время наиболее часто используемыми методами в моделях мышей с острым повреждением легких являются внутрибрюшинная инъекция ЛПС и трахеостомия для трахеальной инфузии ЛПС. Однако в первом методе отсутствует нацеливание на легкие и повреждаются другие органы, а второй метод вызывает операционную травму, риск инфекции и низкую выживаемость. Здесь мы рекомендуем неинвазивный метод орофарингеальной эндотрахеальной интубации для инстилляции ЛПС у мышей. В этом методе ЛПС неинвазивно вводится в трахею через ротоглотку для закапывания в легкое с помощью аппарата для эндотрахеальной интубации. Этот метод не только обеспечивает воздействие на легкие, но и позволяет избежать повреждений и риска смерти животных. Мы ожидаем, что этот подход получит широкое распространение в области острого поражения легких.
Введение
Острое повреждение легких (ОПЛ) является распространенным клиническим синдромом. Под действием множества патогенных факторов нарушение физиологического барьера эпителиальных клеток легких и эндотелиальных клеток сосудов приводит к увеличению альвеолярной проницаемости, тем самым вызывая снижение податливости легких, отек легких и тяжелую гипоксемию1. Острый респираторный дистресс-синдром (ОРДС) является наиболее тяжелой формой ОПЛ. Неконтролируемое воспаление и повреждение окислительным стрессом считаются основными причинами ОП и более тяжелого ОРДС2. Когда альвеолярные эпителиальные клетки непосредственно повреждаются и....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Протокол эксперимента на животных был рассмотрен и одобрен Управляющим комитетом Чэндуского университета традиционной китайской медицины (запись No 2021-11). Для настоящего исследования использовали самцов мышей C57/BL (20-25 г, возраст 6-8 недель). Мыши содержались в камере для животных и могли свободно пить и есть во время эксперимента.
1. Подготовка
- Убедитесь, что платформа для интубации состоит из основания, стояка, канцелярской скрепки, двух резинок и нескольких струн. Возьмите веревку, пропустите веревку через два отверстия в верхней части стояка и привяжите два конца веревки соответственно к небольшим высту....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Предложенный способ инстилляции ЛПС у мышей был верифицирован путем оценки экспрессии воспалительного цитокина ФНО-α и соотношения массы сухого и влажного легких через 12 ч после инстилляции ЛПС. В эксперименте было четыре группы: холостой контроль (без какого-либо лечения), хирургическая интубация16, интраназальная17,18 и неинвазивная орофарингеальная интубация (n = 6). По сравнению с холостой контрольной .......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Сначала мы заглянули внутрь ротовой полости, чтобы найти расположение трахеи19. Однако во время этого процесса мы обнаружили, что трахея мышей C57/BL узкая, что затрудняет поиск правильного местоположения этим методом без помощи такого оборудования, как эндоскоп20. При дальнейшем исследовании мы обнаружили, что свет от лампы интубатора может проникать через поверхность тела, позволяя оператору определять положение канюли21.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторам раскрывать нечего.
Благодарности
Эта работа была поддержана Национальным фондом естественных наук Китая (No: 81903902), Китайским фондом постдокторантуры (No: 2019M663457), Сычуаньской научно-технической программой (No: 2020YJ0172) и Исследовательским проектом Xinglin Scholar Premotion Университета ТКМ Чэнду (No: QJRC2022053).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Липополисахарид | MERK | L4130 | |
| Микролитровые шприцы | LPS SHANGHAI GAOGE INDUSTRY AND TRADE CO., LTD | Для доставки канюли для мыши LPS | |
| RWD Life Science | 803-03008-00 | Канюля для мыши | |
| Набор для интубации мыши | RWD Life Science | 903-03027-00 | Включая основание, стояк, интубатор, хирургические щипцы и некоторые нити |
| Пастеровская пипетка | Biosharp life science | BS-XG-03 | Для проверки успешности интубации |
| Пентобарбитал натрия | Beijing Chemical Co., Китай | 20220918 | Для обезболивания мышей |
Ссылки
- Xia, Y., et al. Protective effect of human amnion epithelial cells through endotracheal instillation against lipopolysaccharide-induced acute lung injury in mice. Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi. 33 (1), 7-11 (2017).
- Butt, Y., Kurdowska, A., Allen, T. C.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
