Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Хроническое прерывистое воздействие паров этанола в сочетании с выбором двух бутылок для моделирования расстройства, связанного с употреблением алкоголя

2.3K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/65320

⸱

23 июня 2023 г.

 ,  ,  ,  , 
1Department of Basic Medical Sciences, College of Veterinary Medicine, Purdue University, 2The Scripps Research Institute, 3Purdue Institute for Integrative Neuroscience, 4Weldon School of Biomedical Engineering, Purdue University, 5Purdue Institute of Inflammation, Immunology, and Infectious Disease

В этой статье

Краткое содержание

Здесь представлен протокол для модели алкогольной зависимости 2BC/CIE у мышей для изучения расстройств, связанных с употреблением алкоголя.

Аннотация

Расстройство, связанное с употреблением алкоголя (AUD) - это хроническое расстройство, связанное с алкоголем, которое обычно проявляется в виде неконтролируемого употребления алкоголя и увлечения алкоголем. Ключевым компонентом исследований AUD является использование трансляционно релевантных доклинических моделей. За последние несколько десятилетий для изучения AUD использовались различные животные модели. Одной из известных моделей AUD является модель хронического прерывистого воздействия паров этанола (CIE), которая представляет собой хорошо зарекомендовавший себя подход к индуцированию алкогольной зависимости у грызунов посредством повторяющихся циклов воздействия этанола через вдыхание. Чтобы смоделировать AUD у мышей, воздействие CIE сочетается с добровольным выбором двух бутылок (2BC) алкоголя и воды для измерения эскалации употребления алкоголя. Процедура 2BC/CIE включает в себя чередование недель употребления алкоголя 2BC и CIE, которые повторяются до тех пор, пока не будет достигнута эскалация употребления алкоголя. В настоящем исследовании мы описываем процедуры проведения 2BC/CIE, включая ежедневное использование испарительной камеры CIE, и приводим пример повышенного употребления алкоголя у мышей C57BL/6J с использованием этого подхода.

Введение

Расстройство, связанное с употреблением алкоголя (AUD), которое включает в себя хроническое чрезмерное употребление алкоголя, является одним из самых распространенных психических расстройств и глобальной проблемой. Симптомы AUD включают в себя повторяющиеся циклы опьянения, абстиненции и тяги к алкоголю и характеризуются постоянным употреблением алкоголя без учета социальных, профессиональных и медицинских последствий1,2,3,4,5,6,7. Расстройство, связанное с употреблением алкоголя, часто возникает в сочетании с другими распространенными, стойкими и ухудшающими психическими расстройствами8, такими как ADHD9, anxiety10, или depression11 и является причиной примерно 88 000 смертей ежегодно только в Соединенных Штатах2. Чрезмерное или частое употребление алкоголя может повлиять на статус работы и социальные отношения человека12 и может привести к росту насилия13. Физически острая абстиненция от алкоголя может привести к тревоге, возбуждению, тремору, чрезмерному потоотделению, изменению сознания и галлюцинациям14,15. Кроме того, люди могут испытывать симптомы абстиненции при сокращении или прекращении употребления алкоголя и становиться раздражительными или капризными16. Кроме того, хроническое употребление алкоголя может вызвать потерю памяти17 и может привести к дефициту тиамина, также известному как синдром Вернике-Корсакова (WKS), который вносит значительный вклад в вызванную алкоголем деменцию18.

Для дальнейшего продвижения исследований AUD необходимо иметь трансляционно релевантные животные модели заболевания. Наиболее распространенной моделью AUD у грызунов является хроническое прерывистое воздействие паров этанола (CIE), которое является хорошо зарекомендовавшим себя подходом для индуцирования алкогольной зависимости путем повторного вдыхания алкоголя vapor4,19,20,21,22,23,24,25,26,27,28,29,30. Процедуры CIE у грызунов вызывают симптомы абстиненции, такие как судороги, вызванные обращением31, гипервозбудимость, раздражительное поведение, тревожное поведение и нарушения сна, и приводят к эскалации употребления алкоголя22,32,33,34,35. Более того, CIE приводит к значительному росту добровольного потребления алкоголя, отражая компульсивное потребление, наблюдаемое у человека AUD36. Во время фаз интоксикации мыши демонстрируют поведенческие и физиологические признаки, соответствующие алкогольной интоксикации у людей, включая атаксию, седативный эффект и нарушение гипотермии37,38,39. Эти результаты подчеркивают полезность модели CIE для охвата как нейробиологических, так и поведенческих аспектов алкогольной зависимости, что делает ее ценным инструментом для выяснения механизмов AUD и тестирования потенциальных терапевтических вмешательств. В доклинических моделях AUD, таких как хроническое прерывистое воздействие паров этанола (CIE), мыши демонстрируют поведенческие и физиологические признаки, которые параллельны алкогольной интоксикации и зависимости от алкоголя у человека. Во время фаз интоксикации у мышей могут проявляться такие признаки, как атаксия, седативный эффект, снижение исследовательского поведения и нарушение рефлекса выпрямления. Учитывая эти риски, за животными внимательно следили во время и после воздействия паров этанола для выявления признаков тяжелой интоксикации или ухудшения здоровья.

У крыс модель CIE часто включает в себя оперантное самостоятельное введение алкоголя для измерения возрастания потребления40,41,42, тогда как мышиная модель включает CIE и выбор двух бутылок (2BC) drinking43,44. Доклинические модели алкогольной зависимости последовательно показывают, что животные увеличивают потребление этанола после хронического воздействия паров этанола23,45,46,47. В частности, на мышах, было показано, что повторяющиеся циклы CIE увеличивают добровольное потребление этанола3,21,48,49,50. В целом, предыдущие исследования показывают, что модель CIE достаточна для увеличения потребления этанола и модели AUD у грызунов.

Это исследование направлено на то, чтобы выделить метод CIE для изучения AUD и, в частности, сосредоточиться на модели мыши 2BC/CIE. Мы подробно рассмотрим процесс выполнения 2BC/CIE и представим пример эскалации употребления алкоголя после CIE.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все процедуры были одобрены Комитетом по уходу за животными и их использованию Университета Пердью. В настоящем исследовании использовались мыши C57BL/6J в возрасте 8 недель. В группе CIE было 5 мышей (3 самца, 2 самки), а в группе Air было 10 мышей (5 самцов и 5 самок). Животные были получены из коммерческого источника (см. Таблицу материалов) и содержались в группах по 12-часовому циклу «свет-темнота» с доступом к пище. Масса тела мышей измерялась один раз в неделю на протяжении всего эксперимента.

1. Общий дизайн эксперимента

ПРИМЕЧАНИЕ: Выбор двух бутылок (2BC)/хроническое прерывистое воздействие паров этанола (CIE) - это доклиническая мышиная модель для исследования зависимости от этанола51.

  1. В течение недели до н.э. убедитесь, что мыши имеют доступ к бутылке с этанолом (15% по массе) и бутылке с водой в течение 2 часов ежедневно (с понедельника по пятницу), начиная с 2 часов темного цикла.
  2. Сначала дайте мышам пить минимум 2 недели до тех пор, пока не будет достигнут стабильный уровень потребления этанола. В зависимости от экспериментальных потребностей, разделите мышей на две группы (группу CIE и группу Air) или более, если включены дополнительные методы лечения на основе среднего исходного потребления этанола.
  3. После исходной недели 2BC подвергайте мышей из группы CIE воздействию паров этанола (CIE) в течение четырех дней подряд (с понедельника по четверг) с 16 последовательными часами включения пара и 8 последовательными часами выключения пара. Для обеспечения стабильной и устойчивой концентрации этанола в крови в течение всего периода воздействия, пиразол применяли одновременно в качестве ингибитора алкогольдегидрогеназы, тем самым предотвращая быстрый метаболизм этанола и способствуя стабильному системному уровню этанола><. Примечание: Для контроля потенциальных переменных, специфичных для камеры, таких как освещение, вибрация, шум и температура, мыши в группе Air были помещены в идентичную камеру в тех же условиях окружающей среды, что и в группе CIE, но без воздействия паров алкоголя.
  4. Во время недели CIE/Air убедитесь, что 2BC не происходит. После 1 недели CIE/Air возобновите прием мышей на 2BC на следующий период с понедельника по пятницу.
  5. Дайте мышам чередовать недели CIE/Air и 2BC в течение оставшейся части процедуры до тех пор, пока у мышей не произойдет эскалация употребления алкоголя. Собирайте кровь у мышей не реже одного раза в неделю CIE, чтобы определить их концентрацию этанола в крови (BEC)52.

2. Подготовка к эксперименту

  1. Приобретите все следующие принадлежности до начала исследования: мыши, клетки/металлические крышки клеток, бутылки для питья, чтобы вместить по две в клетке рядом, подстилку, корм, весы, хроническую прерывистую испарительную камеру, а также аппарат Analox или другой метод анализа БЭК (см. Таблицу материалов).
  2. Убедитесь, что все необходимые химические вещества готовы к эксперименту: питьевая вода, 95% этанол, пиразол, гепарин и стерильный физиологический раствор.

3. Привыкание животных

  1. Если мыши еще не размещены в том же месте, где проводились эксперименты, дайте им не менее 1 недели, чтобы они акклиматизировались к новой среде><. ПРИМЕЧАНИЕ: В этот период мышей также следует приучать к бережному обращению, чтобы свести к минимуму связанные со стрессом помехи и улучшить благополучие животных. Сеансы дрессировки проводились один раз в день в течение пяти дней подряд, каждый из которых длился примерно 2-3 минуты на животное. Мышей осторожно направляли в руки экспериментатора без поднятия хвоста, что позволяло им свободно исследовать руку дрессировщика. Этот метод облегчает рутинное взаимодействие, снижает стресс во время последующих экспериментальных процедур и обеспечивает более надежные поведенческие данные. Кроме того, животных ежедневно переводили в экспериментальную зону на 30 минут для дальнейшей акклиматизации к тестовой среде.
  2. Убедитесь, что мышам дается 1 неделя на выбор из двух бутылок, обе бутылки должны быть наполнены водой, чтобы они могли приспособиться к различным условиям клетки и помещены в индивидуальную клетку для питья.

4. Выбор из двух бутылок с 15% этанола и водой

  1. Привыкание к выбору двух флаконов
    1. Парадигма тестирования с двумя бутылками одинакова на протяжении всей недели: выбор двух бутылок с водой и последующее тестирование с водой и этанолом. Переместите мышей, содержащихся в группе, в их индивидуальные клетки для питья за 30 минут до выключения света, а затем дайте мышам поить в течение 2 часов.
    2. Записывайте объемы каждой бутылки до и после 2-часового периода питья. Каждая группа проходит 2BC в течение 5 дней, с понедельника по пятницу.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Цель недели привыкания состоит в том, чтобы позволить животным привыкнуть к двум бутылкам, находящимся в клетке, чтобы свести к минимуму любое смещение, вызванное естественным боковым положением одной бутылки. В течение этой недели обе бутылки наполняются водой. Если прилагаемый металлический бункер рассчитан на хранение только одной бутылки, аккуратно используйте пространство между его брусками, прилегающее к первой бутылке, чтобы освободить место для второй бутылки. Бутылки, используемые для экспериментов с питьем, изготавливаются по индивидуальному заказу с использованием пипеток объемом 10 мл и 25 мл с обрезанными концами, позволяющими вставить прямой глоток с шарикоподшипником, из которого мыши могут пить. Использование связующих зажимов для крепления бутылок к проволочной крышке гарантирует, что бутылки не будут двигаться во время питья (дополнительный рисунок 1 и дополнительный рисунок 2).
  2. Базовый выбор из двух бутылок
    1. После привыкания дайте мышам пройти не менее 2 недель исходного питья 2BC, чтобы установить стабильное потребление этанола. Во время базового питья тестируйте мышей в течение 2 часов в день и 5 дней в неделю (с понедельника по пятницу) с одной бутылкой воды и второй бутылкой с 15% этанола. Запишите объем каждой бутылки до и после 2-часового периода питья.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Чтобы установить стабильный базовый уровень потребления этанола, повторяйте недели 2BC до тех пор, пока у каждой мыши не будет примерно менее 15% вариации потребления между днями.
    2. После того, как мыши достигнут стабильного базового уровня потребления этанола, равномерно разделите мышей на основе потребления этанола на группы, не зависящие от этанола (обработка воздухом) и зависимые от этанола (обработка CIE). После того, как исходное потребление этанола было установлено, мыши подвергаются воздействию CIE (или воздействию воздуха) на следующей неделе><. Примечание: Не все эксперименты требуют включения независимой группы, и это должно быть определено в зависимости от направленности исследования. Например, более подходящим сравнением могут быть мыши, зависимые от этанола, со специфическим лечением и без него.
  3. Выбор из двух бутылок (2BC)
    1. Возобновите процедуру 2BC, выполняемую во время исходного употребления алкоголя, после первой недели CIE.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Двухфлаконная питьевая формула для мышей представляет собой смесь этанола 15% (1 л): 95% этанола (195 мл) и мышиной питьевой воды (805 мл).

5. Хроническое прерывистое воздействие паров этанола (CIE)

  1. Приготовьте следующие материалы: изготовленные на заказ испарительные камеры CIE (дополнительный рисунок 3), 95% этанол, раствор этанола-пиразола (68,1 мг/кг пиразола, смешанного с 20% этанолом), раствор физиологического раствора-пиразола (68,1 мг/кг пиразола, смешанного с физиологическим раствором), шприцы (1 мл) и иглы.
  2. Процедура хронического прерывистого использования паров этанола (CIE)
    1. Перед помещением в испарительные камеры для CIE внутрибрюшинно вводите мышам раствор этанола-пиразола (0,0075 мл/г), который используется для создания начальной этаноловой интоксикации, ингибирования этанолдегидрогеназы и блокирования метаболизма этанол53.
    2. Вводите во все контрольные группы Air и другие группы с одинаковой дозой пиразола, смешанной с физиологическим раствором (0,0075 мл/г) вместо этанола. Рекомендуется давать половинную дозу (0,00375 мл/г) раствора пиразола в первый и последний день приема КИЭ каждую неделю.
    3. После инъекций верните мышей Air/Control в их домашние клетки и поместите клетки для группы CIE внутрь испарительной камеры.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Учитывая потенциальные риски для здоровья, связанные с хроническим воздействием паров этанола, за животными внимательно следили на протяжении всего протокола, чтобы обеспечить их благополучие и выявить любые побочные эффекты. Мышей взвешивали не реже двух раз в неделю, а оценка состояния здоровья включала наблюдение за клиническими признаками дистресса. Считалось, что животные, демонстрирующие потерю массы тела более чем на 20% от исходного уровня или демонстрирующие такие признаки, как сгорбленная осанка, вялость, пилоэрекция или неопрятная шерсть, достигли гуманных конечных точек и были немедленно исключены из исследования в соответствии с утвержденными институциональными рекомендациями по уходу за животными и их использованию. Во время CIE мыши наиболее восприимчивы к плохим последствиям для здоровья ближе к концу недели, когда они вступают в длительный период отмены после прекращения воздействия этанола. Чтобы свести к минимуму тяжесть абстиненции, половину дозы пиразола вводят в последний день воздействия паров каждую неделю. Кроме того, половинная доза вводится в начале каждого нового цикла CIE, чтобы облегчить возвращение животных к воздействию этанола. Пиразол, ингибитор алкогольдегидрогеназы, используется для стабилизации и продления концентрации этанола в крови; дозы обычно находятся в диапазоне от 0,00375 мл/г до 0,0075 мл/г и могут быть скорректированы для достижения желаемой концентрации этанола в крови.
    4. После того, как мыши будут помещены в испарительные камеры, заприте дверцы и установите насос на соответствующий уровень пара (например, 1-3). Задайте время выполнения эксперимента. В настоящем исследовании эксперимент начинался в 17:00 и заканчивался в 09:00 утра, при этом использовалась настройка насоса 1-2 (использовалась на протяжении всего исследования).
    5. Затем нажмите кнопку «Пуск» на экране управления испарительной камерой CIE, чтобы начать эксперимент.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Этот шаг может варьироваться в зависимости от используемой камеры и различий в конфигурации. Здесь, после того как все мыши будут введены и помещены в камеру с этанолом, камера должна начать закачивать 95% этанола в стеклянную колбу и нагревать жидкий этанол до уровня пара. Пар проходит через камеру, где мыши содержатся в течение 16 часов в день в течение 4 дней (с вечера понедельника до утра пятницы). Каждый день мыши ощущают 8-часовое отключение пара. Затем мышей удаляют из камеры в конце четвертого дня (в пятницу утром) и начинают 2BC в следующий понедельник. В зависимости от конкретной системы испарительной камеры и конфигурации могут быть различия в БЭК, вызванные различными настройками/уровнями пара. Причиной этого могут быть различные факторы, такие как небольшие различия в компонентах системы, потоке воздуха, выхлопе и т.д. Регулировка уровня паров этанола вместо дозы пиразола подходит для поддержания БЭК в целевом диапазоне. По мере развития допусков БЭК может быть слишком низким, и может потребоваться регулировка уровня пара. Если градиент между уровнями паров слишком крут для увеличения БЭК, то рекомендуется соответствующим образом скорректировать дозу пиразола для изменения БЭК
      6. .
    6. Измеряйте БЭК (см. шаг 5.3) у мышей не реже одного раза в неделю во время КЭЭ. Выполняйте забор крови за 30 минут до остановки пара, чтобы убедиться, что БЭК не начали снижаться><. ПРИМЕЧАНИЕ: Во время эксперимента может потребоваться корректировка уровня пара, так как толерантность к этанолу увеличивается в течение нескольких недель. БЭК следует проверять до и после регулировки параметров пара.
    7. Вернитесь к тестированию 2BC на следующей неделе после CIE. Повторите шаги 4 и 5. Продолжайте чередовать CIE и 2BC мышей в течение четырех-восьми циклов (8-16 недель) до тех пор, пока у них не произойдет значительного увеличения потребления этанола по сравнению с их исходным объемом питья.
  3. Измерения крови
    1. Приготовьте следующие материалы: оборудование для измерения БЭК, такое как система Analox, лезвие, пробирка (0,2 мл), гепарин/ЭДТА и центрифуга (см. Таблицу материалов).
    2. Обрежьте мышей CIE один раз в течение недели CIE, за 30 минут до выключения паровой системы, чтобы собрать кровь для определения BEC. Забор крови может быть выполнен несколькими методами в зависимости от предпочтений lab54.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Кровь собирается в гепаринизированные или покрытые ЭДТА пробирки объемом 0,5 мл (см. Таблицу материалов).
    3. Храните собранные образцы крови при температуре 4 °C до обработки.
    4. Для обработки образцов сначала центрифугируйте при 208 x g в течение 10 минут при 4 °C для отделения плазмы.
    5. Определяйте концентрацию этанола в крови с помощью анализатора этанола со скоростью кислорода (см. Таблицу материалов) или других систем, способных определять БЭК.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

В данном репрезентативном исследовании потребление этанола (г/кг) в ходе 2BC регистрировалось во время базового периода потребления и после нескольких недель CIE (после воздействия паров). Кратко, как описано в протоколе, во время 2BC мыши имели доступ к двум бутылкам: одна содержала воду, а другая — 15% (масс./об.) этанол. После определения базовых показателей потребления субъекты были разделены и равномерно распределены в группы CIE или Air. Начальное базовое потребление этанола в течение 3-недельного периода стабилизи...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Расстройства, связанные с употреблением алкоголя, представляют собой глобальную проблему общественного здравоохранения с высокой распространенностью и затратами для общества56. Для изучения AUD на доклинических животных моделях распространенным методом на мышах является 2BC/CIE 20,34,43,44,51,57,58,59....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Мори Коул является владельцем и оператором компании La Jolla Alcohol Research Inc.

Благодарности

Эта работа была поддержана грантами Национальных институтов здравоохранения (NIH) AA027301 и AA029985.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
500 трубок Eppendorf EppendorfL203896J
95% этанолаDecon laboratories2816
Машина AnaloxИнструментыAnalox-AM1
Весы для взвешивания животных KentScientificSCL-4000
Связующие зажимы Офисныйсклад560394
мышей C57BL/6J Jackson Laboratory000664
CentrifugeEppendorf5418R
Хроническая испарительная камера периодического действияLa Jolla Alcohol Research IncИзготовленные на заказ материалы
Heparin/EDTASagent PharmaceuticalsTS/DRUGS/2/2015
Подстилка для мышейBed-o' Початки8Bнаполнить 1/8-дюймовой глубиной
Мышиная поилкаИзготовленные на заказ материалы
ПиразолСигма-Олдричbccc6397
Teklad global 18% белка (корм для мышей)Teklad globalEnvigo 2018

Ссылки

  1. Koob, G. F., Volkow, N. D. Neurobiology of addiction: A neurocircuitry analysis. Lancet Psychiatry. 3 (8), 760-773 (2016).
  2. Witkiewitz, K., Litten, R. Z., Leggio, L. Advances in the science and treatment of alcohol use disorder. Science Advances. 5 (9), 4043(2019).
  3. Becker, H. C. Alcohol dependence, withdrawal, and relapse. Alcohol Research and Health. 31 (4), 348-361 (2008).
  4. Becker, H. C. Effects of alcohol dependence and withdrawal on stress responsiveness and alcohol consumption. Alcohol Research. 34 (4), 448-458 (2012).
  5. Erickson, E. K., Grantham, E. K., Warden, A. S., Harris, R. A. Neuroimmune signaling in alcohol use disorder. Pharmacology, Biochemistry, and Behavior. 177, 34-60 (2019).
  6. Aalsma, M., et al. Adolescent suicide assessment and management in primary care. BMC Pediatrics. 22 (1), 389(2022).
  7. Grant, B. F., et al. Epidemiology of DSM-5 alcohol use disorder: Results from the National Epidemiologic Survey on Alcohol and Related Conditions III. JAMA Psychiatry. 72 (8), 757-766 (2015).
  8. Helle, A. C., Watts, A. L., Trull, T. J., Sher, K. J. Alcohol use disorder and antisocial and borderline personality disorders. Alcohol Research. 40 (1), (2019).
  9. Luderer, M., Ramos Quiroga, J. A., Faraone, S. V., Zhang James, Y., Reif, A. Alcohol use disorders and ADHD. Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 128, 648-660 (2021).
  10. Ribadier, A., Varescon, I. Anxiety and depression in alcohol use disorder individuals: The role of personality and coping strategies. Substance Use and Misuse. 54 (9), 1475-1484 (2019).
  11. McHugh, R. K., Weiss, R. D. Alcohol use disorder and depressive disorders. Alcohol Research. 40 (1), (2019).
  12. Le Berre, A. P. Emotional processing and social cognition in alcohol use disorder. Neuropsychology. 33 (6), 808-821 (2019).
  13. Sontate, K. V., et al. Alcohol, aggression, and violence: From public health to neuroscience. Frontiers in Psychology. 12, 699726(2021).
  14. Prescrire International. Alcohol withdrawal syndrome: how to predict, prevent, diagnose and treat it. Prescrire International. 16 (87), 24-31 (2007).
  15. Mendelson, J. H. The effect of Alcohol on the nervous system. Alcohol Health and Research World. 19 (1), 28-29 (1995).
  16. Murray, T. D., Berger, A. Alcohol withdrawal. Virginia Medical Quarterly. 124 (3), 184-187 (1997).
  17. Fama, R., et al. Memory impairment in alcohol use disorder is associated with regional frontal brain volumes. Drug and Alcohol Dependence. 228, 109058(2021).
  18. Kopelman, M. D. The Korsakoff syndrome. British Journal of Psychiatry. 166 (2), 154-173 (1995).
  19. Griffin, W. C. Alcohol dependence and free-choice drinking in mice. Alcohol. 48 (3), 287-293 (2014).
  20. Griffin, W. C., Lopez, M. F., Yanke, A. B., Middaugh, L. D., Becker, H. C. Repeated cycles of chronic intermittent ethanol exposure in mice increases voluntary ethanol drinking and ethanol concentrations in the nucleus accumbens. Psychopharmacology. 201 (4), 569-580 (2009).
  21. Kimbrough, A., et al. CRF(1) receptor-dependent increases in irritability-like behavior during abstinence from chronic intermittent ethanol vapor exposure. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 41 (11), 1886-1895 (2017).
  22. Kimbrough, A., et al. Brain-wide functional architecture remodeling by alcohol dependence and abstinence. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 117 (4), 2149-2159 (2020).
  23. O'Dell, L. E., Roberts, A. J., Smith, R. T., Koob, G. F. Enhanced alcohol self-administration after intermittent versus continuous alcohol vapor exposure. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 28 (11), 1676-1682 (2004).
  24. Pleil, K. E., et al. Effects of chronic ethanol exposure on neuronal function in the prefrontal cortex and extended amygdala. Neuropharmacology. 99, 735-749 (2015).
  25. Warden, A. S., et al. Microglia control escalation of drinking in alcohol-dependent mice: Genomic and synaptic drivers. Biological Psychiatry. 88 (12), 910-921 (2020).
  26. Gilpin, N. W., Koob, G. F. Neurobiology of alcohol dependence: Focus on motivational mechanisms. Alcohol Research and Health. 31 (3), 185-195 (2008).
  27. Kreifeldt, M., et al. Central amygdala corticotropin-releasing factor neurons promote hyponeophagia but do not control alcohol drinking in mice. Molecular Psychiatry. 27 (5), 2502-2513 (2022).
  28. Sidhu, H., Kreifeldt, M., Contet, C. Affective disturbances during withdrawal from chronic intermittent ethanol inhalation in C57BL/6J and DBA/2J male mice. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 42 (7), 1281-1290 (2018).
  29. Kononoff, J., et al. Systemic and intra-habenular activation of the orphan G protein-coupled receptor GPR139 decreases compulsive-like alcohol drinking and hyperalgesia in alcohol-dependent rats. eNeuro. 5 (3), (2018).
  30. Avegno, E. M., et al. Central amygdala circuits mediate hyperalgesia in alcohol-dependent rats. Journal of Neuroscience. 38 (36), 7761-7773 (2018).
  31. de Guglielmo, G., et al. Recruitment of a neuronal ensemble in the central nucleus of the amygdala is required for alcohol dependence. Journal of Neuroscience. 36 (36), 9446-9453 (2016).
  32. Liang, J., et al. Chronic intermittent ethanol-induced switch of ethanol actions from extrasynaptic to synaptic hippocampal GABAA receptors. Journal of Neuroscience. 26 (6), 1749-1758 (2006).
  33. Becker, H. C. Animal models of alcohol withdrawal. Alcohol Research and Health. 24 (2), 105-113 (2000).
  34. Kimbrough, A., Kim, S., Cole, M., Brennan, M., George, O. Intermittent access to ethanol drinking facilitates the transition to excessive drinking after chronic intermittent ethanol vapor exposure. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 41 (8), 1502-1509 (2017).
  35. Koob, G. F., Colrain, I. M. Alcohol use disorder and sleep disturbances: A feed-forward allostatic framework. Neuropsychopharmacology. 45 (1), 141-165 (2020).
  36. Becker, H. C., Lopez, M. F. An animal model of alcohol dependence to screen medications for treating alcoholism. International review of neurobiology. 126, 157-177 (2016).
  37. Sharpe, A. L., Tsivkovskaia, N. O., Ryabinin, A. E. Ataxia and c-Fos Expression in Mice Drinking Ethanol in a Limited Access Session. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 29, 1419-1426 (2005).
  38. Koob, G. F. Alcoholism: allostasis and beyond. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 27 (2), 232-243 (2003).
  39. Chen, Y. C., Holmes, A. Effects of Topiramate and Other Anti-Glutamatergic Drugs on the Acute Intoxicating Actions of Ethanol in Mice: Modulation by Genetic Strain and Stress. Neuropsychopharmacol. 34, 1454-1466 (2009).
  40. Risher, M. L., et al. Long-term effects of chronic intermittent ethanol exposure in adolescent and adult rats: Radial-arm maze performance and operant food reinforced responding. PLoS One. 8 (5), e62940(2013).
  41. Van Skike, C. E., Novier, A., Diaz-Granados, J. L., Matthews, D. B. The effect of chronic intermittent ethanol exposure on spatial memory in adolescent rats: The dissociation of metabolic and cognitive tolerances. Brain Research. 1453, 34-39 (2012).
  42. Ho, A. M., et al. Chronic intermittent ethanol exposure alters behavioral flexibility in aged rats compared to adult rats and modifies protein and protein pathways related to Alzheimer's disease. ACS Omega. 7 (50), 46260-46276 (2022).
  43. Piggott, V. M., Lloyd, S. C., Perrine, S. A., Conti, A. C. Chronic intermittent ethanol exposure increases ethanol consumption following traumatic stress exposure in mice. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 14, 114(2020).
  44. Quijano Carde, N. A., De Biasi, M. Behavioral characterization of withdrawal following chronic voluntary ethanol consumption via intermittent two-bottle choice points to different susceptibility categories. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 46 (4), 614-627 (2022).
  45. Rimondini, R., Arlinde, C., Sommer, W., Heilig, M. Long-lasting increase in voluntary ethanol consumption and transcriptional regulation in the rat brain after intermittent exposure to alcohol. FASEB Journal. 16 (1), 27-35 (2002).
  46. Becker, H. C. Influence of stress associated with chronic alcohol exposure on drinking. Neuropharmacology. 122, 115-126 (2017).
  47. Zhao, Y., Weiss, F., Zorrilla, E. P. Remission and resurgence of anxiety-like behavior across protracted withdrawal stages in ethanol-dependent rats. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 31 (9), 1505-1515 (2007).
  48. Becker, H. C., Lopez, M. F. Increased ethanol drinking after repeated chronic ethanol exposure and withdrawal experience in C57BL/6 mice. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 28 (12), 1829-1838 (2004).
  49. Kreifeldt, M., Le, D., Treistman, S. N., Koob, G. F., Contet, C. BK channel beta1 and beta4 auxiliary subunits exert opposite influences on escalated ethanol drinking in dependent mice. Frontiers in Integrative Neuroscience. 7, 105(2013).
  50. Pringuey, D., et al. Comorbidity of affective disorders and alcohol use disorder. Encephale. 40, S3-S7 (2014).
  51. Okhuarobo, A., et al. A novel mouse model for vulnerability to alcohol dependence induced by early-life adversity. Neurobiology of Stress. 13, 100269(2020).
  52. Dilley, J. E., Nicholson, E. R., Fischer, S. M., Zimmer, R., Froehlich, J. C. Alcohol drinking and blood alcohol concentration revisited. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 42 (2), 260-269 (2018).
  53. Feierman, D. E., Cederbaum, A. I. Oxidation of the alcohol dehydrogenase inhibitor pyrazole to 4-hydroxypyrazole by microsomes. Effect of cytochrome P-450 inducing agents. Drug Metabolism and Disposition. 15 (5), 634-639 (1987).
  54. Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. Blood sample collection in small laboratory animals. Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).
  55. Armstrong, R. A. When to use the Bonferroni correction. Ophthalmic and Physiological Optics. 34 (5), 502-508 (2014).
  56. Rehm, J., et al. Alcohol use disorders in primary health care: What do we know and where do we go. Alcohol and Alcoholism. 51 (4), 422-427 (2016).
  57. Gorini, G., Roberts, A. J., Mayfield, R. D. Neurobiological signatures of alcohol dependence revealed by protein profiling. PLoS One. 8 (12), e82656(2013).
  58. Frie, J. A., Khokhar, J. Y. An open source automated two-bottle choice test apparatus for rats. HardwareX. 5, 00061(2019).
  59. Smith, R. J., et al. Dynamic c-Fos changes in mouse brain during acute and protracted withdrawal from chronic intermittent ethanol exposure and relapse drinking. Addiction Biology. 25 (6), e12804(2020).
  60. Sachdeva, A., Choudhary, M., Chandra, M. Alcohol withdrawal syndrome: Benzodiazepines and beyond. Journal of Clinical and Diagnostic Research. 9 (9), (2015).
  61. Huitron-Resendiz, S., et al. Effects of withdrawal from chronic intermittent ethanol exposure on sleep characteristics of female and male mice. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 42 (3), 540-550 (2018).
  62. Gatch, M. B., Lal, H. Effects of ethanol and ethanol withdrawal on nociception in rats. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 23 (2), 328-333 (1999).
  63. Saitz, R. Introduction to alcohol withdrawal. Alcohol Health and Research World. 22 (1), 5-12 (1998).
  64. Emmerson, R. Y., Dustman, R. E., Shearer, D. E., Chamberlin, H. M. EEG, visually evoked and event related potentials in young abstinent alcoholics. Alcohol. 4 (4), 241-248 (1987).
  65. Gauvin, D. V., Youngblood, B. D., Holloway, F. A. The discriminative stimulus properties of acute ethanol withdrawal (hangover) in rats. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 16 (2), 336-341 (1992).
  66. George, O., Le Moal, M., Koob, G. F. Allostasis and addiction: Role of the dopamine and corticotropin-releasing factor systems. Physiology and Behavior. 106 (1), 58-64 (2012).
  67. Koob, G. F., Le Moal, M. Addiction and the brain antireward system. Annual Review of Psychology. 59, 29-53 (2008).
  68. Koob, G. F., Le Moal, M. Drug addiction, dysregulation of reward, and allostasis. Neuropsychopharmacology. 24 (2), 97-129 (2001).
  69. Nieto, S. J., Grodin, E. N., Aguirre, C. G., Izquierdo, A., Ray, L. A. Translational opportunities in animal and human models to study alcohol use disorder. Translational Psychiatry. 11 (1), 496(2021).
  70. Kuhns, L., Kroon, E., Lesscher, H., Mies, G., Cousijn, J. Age-related differences in the effect of chronic alcohol on cognition and the brain: A systematic review. Translational Psychiatry. 12 (1), 345(2022).
  71. Becker, H. C., Mulholland, P. J. Neurochemical mechanisms of alcohol withdrawal. Handbook of Clinical Neurology. 125, 133-156 (2014).
  72. Chen, M. M., et al. Intoxication by intraperitoneal injection or oral gavage equally potentiates postburn organ damage and inflammation. Mediators of Inflammation. , 971481(2013).
  73. Livy, D. J., Parnell, S. E., West, J. R. Blood ethanol concentration profiles: A comparison between rats and mice. Alcohol. 29 (3), 165-171 (2003).
  74. Jin, L., Batra, S., Jeyaseelan, S. Diminished neutrophil extracellular trap (NET) formation is a novel innate immune deficiency induced by acute ethanol exposure in polymicrobial sepsis, which can be rescued by CXCL1. PLoS Pathogens. 13 (9), e1006637(2017).
  75. Crabbe, J. C., Harris, R. A., Koob, G. F. Preclinical studies of alcohol binge drinking. Annals of the New York Academy of Sciences. 1216, 24-40 (2011).
  76. Blomstrand, R., et al. Pyrazoles as inhibitors of alcohol oxidation and as important tools in alcohol research: An approach to therapy against methanol poisoning. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 76 (7), 3499-3503 (1979).
  77. Domi, A., Stopponi, S., Domi, E., Ciccocioppo, R., Cannella, N. Sub-dimensions of alcohol use disorder in alcohol preferring and non-preferring rats, a comparative study. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 13, 3(2019).
  78. de Guglielmo, G., et al. Voluntary and forced exposure to ethanol vapor produces similar escalation of alcohol drinking but differential recruitment of brain regions related to stress, habit, and reward in male rats. Neuropharmacology. 222, 109309(2023).
  79. Haggerty, D. L., et al. The role of anterior insular cortex inputs to dorsolateral striatum in binge alcohol drinking. Elife. 11, 77411(2022).
  80. Slivicki, R. A., et al. Oral oxycodone self-administration leads to features of opioid misuse in male and female mice. Addiction Biology. 28 (1), e13253(2023).
  81. Godynyuk, E., Bluitt, M. N., Tooley, J. R., Kravitz, A. V., Creed, M. C. An open-source, automated home-cage sipper device for monitoring liquid ingestive behavior in rodents. eNeuro. 6 (5), (2019).
  82. Simpson, S., et al. The hidden brain: Uncovering previously overlooked brain regions by employing novel preclinical unbiased network approaches. Frontiers in Systems Neuroscience. 15, 595507(2021).
  83. Smith, L. C., Kimbrough, A. Leveraging neural networks in preclinical alcohol research. Brain Sciences. 10 (9), 578(2020).
  84. Hwa, L., Besheer, J., Kash, T. Glutamate plasticity woven through the progression to alcohol use disorder: A multi-circuit perspective. F1000Research. 6, 298(2017).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Модель алкогольной зависимостипарадигма CIEповедение мышей при потреблении алкоголяконцентрация этанола в кровисимптомы отменыдоклиническая модель AUDвапоризационная камера
Хроническое прерывистое воздействие паров этанола в сочетании с выбором двух бутылок для моделирования расстройства, связанного с употреблением алкоголя
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.