В данной статье представлена манипуляция для лечения хронической компрессии ганглия заднего корешка у крыс с помощью терапии Туйна, а также метод оценки ее эффективности на основе болевого поведения и гистопатологических результатов.
Методическая статья
* These authors contributed equally
В данной статье представлена манипуляция для лечения хронической компрессии ганглия заднего корешка у крыс с помощью терапии Туйна, а также метод оценки ее эффективности на основе болевого поведения и гистопатологических результатов.
Нейропатическая боль является распространенным состоянием, которое поражает 6,9%-10% населения и возникает в результате повреждения нервов различной этиологии, таких как грыжа межпозвоночного диска поясничного отдела, стеноз позвоночного канала и стеноз межпозвонкового отверстия. Несмотря на то, что Туйна, традиционная китайская мануальная терапия, показала обезболивающий эффект в клинической практике для лечения нейропатической боли, лежащие в ее основе нейробиологические механизмы остаются неясными. Животные модели необходимы для выяснения основных принципов Туины. В этом исследовании мы предлагаем стандартизированный протокол Tuina для крыс с компрессией ганглия заднего корешка (DRG), который включает в себя индуцирование компрессии DRG путем введения стержня из нержавеющей стали в межпозвонковое отверстие, выполнение манипуляций Tuina с определенными параметрами локализации, интенсивности и частоты в контролируемой среде, а также оценку поведенческих и гистопатологических исходов лечения Tuina. В этой статье также обсуждаются потенциальные клинические последствия и ограничения исследования и предлагаются направления для будущих исследований Tuina.
В клинических условиях часто наблюдается неврологическая патологическая боль, вызванная компрессией нервных корешков по разным причинам. Наиболее типичной формой этой нейропатической боли является грыжа межпозвоночного диска поясничного отдела позвоночника (ЛДГ), которая часто является постоянной, рецидивирующей и трудно излечимой. Примерно 9% населения мира страдают от ЛДГ, что приводит к значительному социальному и экономическому бремени1. Частота возникновения этого типа нейропатической боли увеличивается с каждым годом, с тенденцией к более молодому возрасту пациентов из-за изменений в производстве и образе жизничеловека. Несмотря на применение нестероидных обезболивающих, симптомы пациентов не могут быть полностью облегчены. В результате, альтернативные методы лечения, такие как Tuina, для лечения боли, вызванной ЛДГ, привлекают все большее внимание.
Терапия Tuina, форма консервативного лечения ЛДГ, широко рекомендована в различных клинических руководствах по всему миру для профилактики и лечения боли в пояснице 3,4. Исследования показали, что Tuina может значительно снизить уровень воспалительных факторов, таких как сывороточный IL-6 и фактор некроза опухоли-альфа (TNF-α) у пациентов с ЛДГ, одновременно уменьшая боль и нарушение функции поясницы у пациентов5. Тем не менее, конкретный механизм, лежащий в основе обезболивающих эффектов терапии Tuina, остается неясным.
Животные модели являются ценным инструментом для изучения нейропатической боли, вызванной ЛДГ6. Они позволяют проводить поведенческие измерения для оценки эффективности терапии Tuina и предоставляют образцы патологической физиологии ЛДГ. Например, образцы из ганглиев задних корешков бедра могут быть взяты для проверки изменений в ганглиозных клетках задних корешков. Хроническая компрессия модели ганглия заднего корешка (CCD) обычно используется для оценки патологической физиологии ЛДГ, поскольку она вызывает повреждение морфологии ганглиозных клеток дорсальных корешков, которые согласуются с патологическими изменениями, наблюдаемыми в клинических случаях компрессии нерва, вызванной грыжей диска7.
Многие ученые провели несколько экспериментов на животных по точечной анальгезии 8,9,10. Однако при выполнении операций точечного массажа на животных моделях часто имитируют точечный массаж человека. На лечебный эффект точечного массажа влияют такие факторы, как величина, частота и направление приложенной силы11,12,13. Если в эксперименте отсутствует единый стандарт точечного массажа, такой как сила, частота и продолжительность операции, это может привести к некоторым отклонениям в результатах эксперимента. В данной статье представлен набор планов лечения точечным массажем, основанных на характеристиках крыс CCD, и содействие разработке стандартизированных операций точечного массажа на животных моделях.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Эта работа была проведена в лаборатории боли Института нейробиологии Фуданьского университета. Эксперименты были одобрены и строго соблюдались в соответствии с рекомендациями по защите лабораторных животных, установленными Международной ассоциацией по изучению боли (LASP) для всех хирургических процедур и обращения с животными. Для настоящего исследования были использованы чистые крысы Спрэга-Доули (SD), состоящие из 32 самцов в возрасте от 40 до 50 дней, со средним весом 220 ± 1,38 г. Эти крысы были получены из Центра экспериментальных животных Шанхайской академии наук о жизни Китайской академии наук. За животными осуществлялся надлежащий уход и размещение в специальном помещении с независимой вентиляцией, регулируемой температурой (22 ± 1 °C) и влажностью (40%-50%). Крысы имели доступ к достаточному количеству пищи и воды в своих клетках. В комнате для лабораторных животных соблюдался 12-часовой цикл света и темноты, чтобы поддерживать регулярность циркадных ритмов крыс, а специальный персонал регулярно заменял подкладку. Рентген был выполнен в отделении радиологии больницы интегрированной традиционной китайской и западной медицины Юэян, аффилированной с Шанхайским университетом традиционной китайской медицины.
1. Участники исследования и группировка
2. Создание животной модели
3. Туинотерапия
4. Поведенческое тестирование боли
ПРИМЕЧАНИЕ: Поведенческие тесты проводились до моделирования, после моделирования, в 1-й день вмешательства, 3-й день вмешательства, 7-й день вмешательства, 14-й день вмешательства, 17-й день вмешательства и 21-й день вмешательства.
5. Перфузия
6. Скопление ганглия заднего корешка
ПРИМЕЧАНИЕ: После перфузии быстро отрежьте поясничный отдел позвоночника крысы. Найдите межпозвонковое отверстие L5 и L4, соединив самые высокие точки гребня подвздошной кости с обеих сторон с поясничным остистым отростком L5 с помощью этого метода позиционирования, и удалите ганглий заднего корешка из межпозвонкового отверстия. Конкретный метод сбора следующий:
7. Криосекционирование
8. Окрашивание гематоксилином и эозином
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Туйна-терапия может помочь снизить пороги механической и тепловой стимуляции крыс, вызванные ПЗС-моделированием
Через 17 дней терапии Туина наблюдалась достоверная разница в пороговых значениях ЛУП между крысами с ПЗС, получавшими терапию Туйной, и группой, не получавшей ПЗС (P = 0,021, <0,05) (рис. 6 и табл. 1).
У крыс в группе CCD, получавших терапию Tuina, наблюдалось улучшение болевого порога с начала лечения, а...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Наша исследовательская группа провела соответствующие исследования по параметрам манипуляций Туина на ранней стадии. Во-первых, важно установить интенсивность силы для манипуляции Туйна. В клинике Tuina практикующие врачи регулируют интенсивность силы в соответствии со своим опытом и субъективными ощущениями пациентов, достигая наилучшего эффекта Туйна через общение. Однако в экспериментах на животных это невозможно. В экспериментах на животных для определения интенсивности манипуляций с Туиной используется «порог ответа...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Авторам нечего раскрывать.
Эта работа была поддержана Шанхайским проектом строительства критических клинических специальностей (номер гранта: Shslczdzk04001); Парусная программа Шанхайской комиссии по науке и технике (номер гранта: 22YF1444300); Проекты в рамках бюджета Шанхайского университета традиционной китайской медицины (номер гранта: 2021LK091).
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Стержень из нержавеющей стали "L" (длина 4 мм и диаметр 0,4 мм) | ручная работа | Для изготовления моделей CCD | |
| Измерительный аппарат | ALMEMO ahlborn | 2450-1 | Механический тест порога отбора |
| Слайсер постоянной температуры CM-1900 | Leica | 1491950C1US | Для производства образцов |
| Дезинфицирующее средство (йод) 100 мл/бутылка | LIRCON/Shandong Lilkang | / | Для дезинфекции |
| Одноразовый стерильный шприц 5 мл | Шанхай Миша Ва Медицинская промышленность | / | Для инъекций |
| Электронный микроскоп CX-31 | Olympus, Япония | BJ002318 | Для наблюдения за образцами |
| Запись давления пальцами | Сучжоу Changxian Оптоэлектронная технология | CX1003w | Для манипуляций с туиной |
| Пенопластовая доска (35 см х 20 см) | ручной работы | / | Это наш самодельный аппарат для фиксации крыс |
| MERSILK W2512 | Johnson & Johnson | / | Для тканевого шва |
| Нейтральный бальзам | Sinopharm Chemical Reagent | 10004160 | Для производства образцов |
| параформальдегид | China National Chemical Reagent | / | Для производства образцов |
| Пентобарбитал натрия | Sigma-Aldrich | P3761 | Для анестезии крыс |
| Подошвенный тестовый аппарат (метод Харгривза) для мышей и крыс | IITC Life Наука | / | Задержка оттягивания лап |
| Прецизионные электронные весы для эксперимента JY3002 | Shanghai Precision Scientific Instrument | / | Взвешивание |
| крысы Машинка для стрижки шерсти | крысы Philips | HP6341/00 | Бритье шерсти крысы |
| Ограничитель для крыс | Университет Тунцзи (самодельный) | / | Это самодельный аппарат, изготовленный Университетом Тунцзи, который может эффективно обездвижить крыс и полностью обнажить их задние конечности. |
| Ткань-Tek O.C.T. Соединение | SAKURA | 4583 | Для производства образцов |
| Uratan | China National Chemical Reagent | / | Для анестезии |
| крысы рентгеновский детектор XR-600 | Dongguan Kaso Electronic Technology | / | Экспертиза моделей CCD |
| ксилола | Shanghai Sinopharm Group | 100092 | Для производства образцов |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE
Запросить разрешение