В данной статье описана пошаговая процедура создания модели мышей с ороназальным свищом. Ороназальный свищ был создан путем использования горячего офтальмологического прижигания, чтобы повредить срединную часть твердого неба, что привело к образованию отверстия между ротовой и носовой полостями.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Создание модели мышей ороназальной фистулы
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
В данном исследовании представлен метод, использующий офтальмологическое прижигание с подогревом для разработки жизнеспособной модели исследования ороназальных свищей. Мыши C57BL/6 были использованы для создания модели ороназальной фистулы (ONF). Для создания ОНФ мышей обезболивали, обездвиживали и обнажали их твердые нёба. Во время хирургического вмешательства было индуцировано повреждение слизистой оболочки на всю толщину 2,0 х 1,5 мм по средней линии твердого неба с помощью офтальмологического прижигания. Для обеспечения успеха эксперимента было крайне важно контролировать размер ОНФ и свести к минимуму кровотечение. Верификация эффективности модели ОНФ проводилась на 7-е сутки после операции, включая как анатомическую, так и функциональную оценку. Наличие носовой перегородки в полости рта и отток стерильной воды из ноздрей при инъекции в ротовую полость подтвердили успешное создание модели ОНФ. Модель продемонстрировала практичную и успешную ороназальную фистулу, характеризующуюся низким уровнем смертности, значительными изменениями массы тела и минимальными вариациями размера ОНФ. В будущих исследованиях может быть рассмотрен вопрос о применении этой методологии для выяснения механизмов заживления ран неба и изучения новых методов лечения ороназальных свищей.
Введение
Ороназальный свищ (ОНФ), аномальное отверстие между полостью рта и носом, клинически проявляется как дефект в структурной области от альвеолярного отростка до язычка, который обычно возникает как осложнение после коррекции расщелины неба1. У пациентов с ОНФ наблюдается пищевой рефлюкс, нарушения артикуляции и нарушения функции глоточной ки, что значительно влияет на качество их жизни 2,3,4. Частота послеоперационного ОНФ колеблется от 2,4% до 55% из-за таких факторов, как ширина расщелины, тип Во и хирургический метод 5,6,7,8.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Все процедуры на животных в этом исследовании были рассмотрены и одобрены Этическим комитетом Западно-Китайской школы стоматологии Сычуаньского университета. Для настоящего исследования использовали взрослых мышей линии C57BL/6 (самок).
1. Хирургическая подготовка
- Подготовьте необходимые хирургические инструменты для процедуры: проращиватель, офтальмологическое прижигание, микрохирургические ножницы, микрохирургический пинцет, шприцы и иглы (26 г x 0,63 дюйма) (Рисунок 1A, B) (см. Таблицу материалов).
ПРИМЕЧАНИЕ: Перед хирургической процедурой авто....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Чтобы оценить осуществимость и стабильность этого экспериментального метода, та же процедура была проведена на десяти мышах, и были проведены наблюдения за смертностью, изменениями размера раны, массы тела и гистологическим анализом. Мышей усыпили на 7-й день.
Процедура показала низкий уровень летальности. Офтальмологическое прижигание и проращиватель, изображенные на рисунке 1A-C, были ключевыми инструментами, используемыми в это.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Исследователи изучили различные материалы, лекарства и новые методы лечения ОНФ 10,11,12,13,14,15,16,17. Благодаря достижениям в области хирургических процедур частота и рецидивы ОНФ снизились. Однако из-за уникальных характеристик заболевания количество па.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторам нечего раскрывать.
Благодарности
Эта работа была поддержана Программой исследований и разработок Западно-Китайской стоматологической больницы Сычуаньского университета (RD-02-202107), Программой поддержки науки и технологий провинции Сычуань (2022NSFSC0743) и грантом Сычуаньского фонда постдокторантуры (TB2022005) Х. Хуану.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Герминатор | Электронная микроскопия Наук | 66118-20 | Оборудование для обогрева и дезинфекции |
| Латексные перчатки | Allmed | или аналогичные | |
| Огни | Olympus | A1813 | |
| Meloxicam | MedChemExpress | HY-B0261 | дробленые; 5 мг/кг |
| Микрохирургические инструменты (ножницы и пинцеты) | Jiangsu Tonghui Medical Devices Co. | M-Y-0087 | Хирургический инструмент |
| Офтальмологическое прижигание | Suqian Wenchong Medical Equipment Co. | 1.00234E + 13 | Хирургический инструмент |
| стерильный хлопок, | Yancheng Begu Technology Co. | или аналогичная | |
| стерильная металлическая фольга | Biosharp | или аналогичные | |
| стерильные листы | 3M | XH003801129 | или аналогичные |
| хирургические простыни | Yancheng Begu Technology Co. | или аналогичные | |
| шприцы | Yancheng Begu Technology Co. | S-015301 | или аналогичная |
| лента | Bkmamlab | или аналогичная | |
| Устройство для поддержания температуры | Harvard Apparatus | LE-13-2104 | |
| Zoletil50 | Virbac | 80 мг/кг |
Ссылки
- Alonso, V., et al. Three-layered repair with a collagen membrane and a mucosal rotational flap reinforced with fibrine for palatal fistula closure in children. International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology. 127, 109679(2019).
- Garg, R., Shah, S., Uppal, S., Mittal, R. K.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
