Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Внутрикожный микродиализ: подход к исследованию новых механизмов микрососудистой дисфункции у человека

2.4K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/65579

⸱

21 июля 2023 г.

 ,  ,  , 
1Department of Kinesiology, The Pennsylvania State University

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Внутрикожный микродиализ — это минимально инвазивный метод, используемый для исследования функции микрососудов в норме и при заболеваниях. Для изучения механизмов вазодилатации и сужения сосудов в кожном кровообращении могут быть использованы как протоколы «доза-реакция», так и протоколы локального нагревания.

Аннотация

Кожная сосудистая сеть является доступной тканью, которая может быть использована для оценки функции микрососудов у человека. Внутрикожный микродиализ – это минимально инвазивный метод, используемый для исследования механизмов гладкой мускулатуры и функции эндотелия сосудов в кожном кровообращении. Данная методика позволяет провести фармакологическое препарирование патофизиологии эндотелиальной дисфункции микрососудов, которая выражается снижением вазодилатации, опосредованной оксидом азота, что является индикатором риска развития сердечно-сосудистых заболеваний. При этом методе микродиализный зонд помещается в дермальный слой кожи, а над зондом помещается локальный нагревательный блок с лазерным доплеровским флоуметрическим зондом для измерения потока эритроцитов. Локальная температура кожи зажимается или стимулируется прямым применением тепла, а фармакологические агенты перфузируются через зонд для стимуляции или ингибирования внутриклеточных сигнальных путей, чтобы вызвать вазодилатацию или вазоконстрикцию или исследовать интересующие механизмы (кофакторы, антиоксиданты и т. д.). Количественно оценивается кожная сосудистая проводимость и очерчиваются механизмы эндотелиальной дисфункции при болезненных состояниях.

Введение

Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) являются основной причиной смертив Соединенных Штатах 1. Гипертония (АГ) является независимым фактором риска инсульта, ишемической болезни сердца и сердечной недостаточности и, по оценкам, затрагивает более ~50% населения Соединенных Штатов 2. АГ может развиваться как самостоятельное ССЗ (первичная АГ) или в результате другого состояния, такого как поликистоз почек и/или эндокринные нарушения (вторичная АГ). Широта этиологии АГ затрудняет изучение основных механизмов и повреждений органов-мишеней, наблюдаемых при АГ. Необходимы разнообразные и новые исследовательские подходы к патофизиологии поражения органов-мишеней, ассоциированного с АГ.

Одним из самых ранних патологических признаков ССЗ является эндотелиальная дисфункция, характеризующаяся нарушением вазодилатации, опосредованной оксидом азота (NO) 3,4,5. Дилатация, опосредованная потоком, является распространенным подходом, используемым для количественной оценки эндотелиальной дисфункции, связанной с сердечно-сосудистыми заболеваниями, но эндотелиальная дисфункция в микрососудистых руслах может быть как независимой, так и предшествующей дисфункции крупных кондуитных артерий 6,7,8. Кроме того, артериолы резистентности более непосредственно воздействуют на местные ткани, чем кондуитные артерии, и имеют более непосредственный контроль над доставкой богатой кислородом крови. Микрососудистая функция является прогностическим фактором выживаемости без неблагоприятных сердечно-сосудистых событий 9,10,11. Кожное микроциркуляторное русло представляет собой доступное сосудистое русло, которое может быть использовано для изучения ответов на физиологические и фармакологические сосудосуживающие или сосудорасширяющие раздражители. Внутрикожный микродиализ – это малоинвазивная методика, целью которой является исследование механизмов как гладкой мускулатуры сосудов, так и функции эндотелия в кожном микроциркуляторном русле с помощью целенаправленной фармакологической диссекции. Этот метод отличается от других методов, таких как постокклюзионная реактивная гиперемия, которая не допускает фармакологического вскрытия, и ионофорез, который позволяет проводить фармакологическую доставку, но менее точен по механизму действия (подробно рассмотрено в другом месте12).

Обоснование разработки и использования этого метода подробно рассмотрено в другом месте13. Этот подход был первоначально разработан для использования в неврологических исследованиях на грызунах, а затем впервые был применен к людям для изучения механизмов, лежащих в основе активной вазодилатации с точки зрения терморегуляции. В конце 1990-х годов этот метод использовался для изучения как нервных, так и эндотелиальных механизмов в отношении локального нагрева кожи. С тех пор этот метод используется для исследования ряда нейроваскулярных сигнальных механизмов в коже.

Используя этот метод, наша группа и другие исследовали механизмы эндотелиальной дисфункции в микроциркуляторном русле нескольких клинических популяций, включая, помимо прочего, дислипидемию, первичное старение, диабет, хроническую болезнь почек, синдром поликистозных яичников, преэклампсию, большое депрессивное расстройство 14,15,16,17,18,19 и артериальную гипертензию 20,21,22,23,24. Например, предыдущее исследование показало, что у нормотензивных женщин с преэклампсией в анамнезе, которые подвержены повышенному риску сердечно-сосудистых заболеваний, наблюдалось снижение NO-опосредованной вазодилатации в кожном кровообращении по сравнению с женщинами с нормотензивной беременностью в анамнезе. В другом исследовании у взрослых с диагнозом первичная АГ наблюдалась повышенная чувствительность к ангиотензину II в микроциркуляторном русле по сравнению со здоровыми контрольными группами21, а было показано, что хроническая антигипертензивная фармакотерапия у пациентов с первичной АГ снижает артериальное давление и улучшает как сероводородную, так и NO-опосредованную вазодилатацию22. Wong et al.23 обнаружили нарушение сенсорно-опосредованной и NO-опосредованной вазодилатации у взрослых с прегипертензией, что совпало с нашим выводом о прогрессировании эндотелиальной дисфункции с увеличением стадий АГ, как это классифицируется в рекомендациях Американской кардиологической ассоциации и Американского колледжа кардиологов2017 г. 24.

Метод внутрикожного микродиализа позволяет проводить строго контролируемые механистические исследования функции микрососудов в здоровых и болезненных состояниях. Поэтому целью данной статьи является описание техники внутрикожного микродиализа, применяемой нашей группой и другими. Мы подробно описываем процедуры фармакологической стимуляции эндотелия ацетилхолином () для изучения соотношения «доза-эффект» и физиологической стимуляции продукции эндогенного оксида азота с помощью протокола локального теплового стимула 39 °C или 42 °C. Мы представляем репрезентативные результаты для каждого подхода и обсуждаем клинические последствия выводов, полученных с помощью этого метода.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все процедуры утверждаются Институциональным наблюдательным советом Университета штата Пенсильвания перед набором участников.

1. Настройка оборудования

  1. Включите локальный нагревательный блок и лазерный доплеровский расходомер.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Перед сбором данных оба должны быть откалиброваны в соответствии с инструкциями производителя. Лазерный доплеровский расходомер должен быть подключен к оборудованию для сбора данных с частотой дискретизации 100 Гц (100 образцов/мин) и непрерывной записью в программном обеспечении для сбора данных. Несмотря на то, что можно использовать другое оборудование и программное обеспечение для сбора данных, для простоты остальные инструкции отражают возможности аппаратного обеспечения PowerLab и программного обеспечения LabChart.
  2. Откройте файл программы LabChart.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Необходимо заранее подготовить справочный файл с требуемыми возможностями ввода данных и непрерывного сбора данных. Для каждого лазерного допплера и локального нагревателя должна быть одна панель, которая соответствует каждому участку микродиализа, а панели должны соответствовать соответствующим входам каналов в аппаратном блоке сбора данных.

2. Размещение микродиализных волокон

  1. Определите крупные, видимые кровеносные сосуды кожи в вентральной части предплечья и обозначьте их перманентным маркером (при необходимости используйте жгут для визуализации сосудов; идентификация сосудов в темнопигментированной коже может потребовать большей зависимости от пальпации).
  2. Проведите мазок с области, охватывающей отметины, и большую часть окружающей области с помощью тампонов с бетадином. Протрите бетадин спиртовыми тампонами. Накройте стерилизованный участок кожи стерильной простыней и приложите лед на ~5 минут, чтобы обезболить область.
  3. Снимите лед и введите иглу-проводник (23 G, длина 25 мм) скосом вверх в дермальный слой кожи на глубину 2-3 мм (в зависимости от толщины кожи). Продвигайте иглу, стараясь оставаться в дермальном слое, и выходите из кожи на расстоянии ~20 мм от места введения.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Чтобы подтвердить надлежащую глубину введения в кожу, форма иглы должна быть видна и легко прощупываться, но цвет иглы должен быть скрыт. Если для эксперимента требуется более одного микродиализного зонда, любые две иглы интродьюсера должны быть размещены на расстоянии ≥2,5 см друг от друга и позиционированы перед введением микродиализного зонда. Зонды не должны располагаться вдоль одного и того же крупного сосуда.
  4. Оставив иглу на месте, подсоедините зонд (через замок Люэра) к шприцу, содержащему лактатный раствор Рингера. Пропустите противоположный конец зонда через иглу проводника до тех пор, пока полупроницаемая мембрана зонда не окажется рядом, но все еще за пределами отверстия иглы проводника. Медленно вводите небольшое количество раствора Рингера через волокно до тех пор, пока раствор не пройдет через поры мембраны, чтобы подтвердить целостность мембраны.
  5. При использовании микродиализного зонда Harvard Bioscience и иглы-проводника выполните шаги 2.5.1-2.5.2.
    1. После подтверждения функции зонда далее подавайте зонд через иглу интродьюсера до тех пор, пока мембрана полностью не будет содержаться в дермальном слое кожи внутри иглы интродьюсера.
    2. Пальцем закрепите зонд на месте проксимальнее иглы и извлеките иглу в направлении, противоположном введению. Заклейте внешнюю часть волокна скотчем на коже, чтобы предотвратить смещение полупроницаемой мембраны во время эксперимента.
  6. При использовании микродиализного зонда Bioanalytical Systems и иглы проводника выполните шаги 2.6.1-2.6.2.
    1. После подтверждения функции зонда возьмитесь одной рукой за ступицу иглы проводника и дистальную часть микродиализного зонда и одновременно извлеките иглу в направлении, противоположном направлению введения, переместив микродиализный зонд на место.
    2. Отрегулируйте зонд по мере необходимости, чтобы убедиться, что полупроницаемая мембрана полностью погружена в кожу. Заклейте внешнее волокно скотчем на коже, чтобы предотвратить смещение полупроницаемой мембраны во время эксперимента.

3. Гиперемия

  1. В ожидании спада гиперемической реакции на введение иглы (~60-90 мин) поместите одноразовый шприц в лоток шприцедержателя на микроинфузионных насосах. Перфузионный лактатный раствор Рингера, физиологический раствор или раствор носителя (раствор, в котором растворяют экспериментальное фармакологическое средство; 2 мкл/мин) во время фазы гиперемии.
    ПРИМЕЧАНИЕ: В то время как зонды для микродиализа не могут быть удалены в течение этой фазы ~60-90 минут, участник может изменить положение своего тела или пошевелить рукой, или замок Луэра зонда может быть снят со шприца и закреплен скотчем на руке участника, чтобы дать ему свободный диапазон движений, чтобы ненадолго встать. После оснащения локальными нагревателями и датчиками лазерной допплеровской флоуметрии (LDF) и после начала сбора данных датчики LDF не могут быть перемещены.
  2. Когда покраснение кожи, которое является индикатором гиперемической реакции на травму иглой, стихнет, прикрепите локальный нагревательный блок к коже, покрывающей полупроницаемую мембрану, с помощью адгезивного диска зонда, убедившись, что центр нагревателя совпадает с траекторией микродиализного зонда.
  3. Поместите зонд LDF в отверстие в центре локального нагревателя так, чтобы лазер был перпендикулярен поверхности кожи. После того, как зонды LDF размещены и закреплены, нажмите кнопку «Пуск » в программном обеспечении для сбора данных, чтобы непрерывно записывать и отображать значения потока эритроцитов (поток эритроцитов; перфузионные единицы, PU). Если гиперемия полностью утихла, поток эритроцитов будет стабилен на уровне ~5-20 PU (пульсация сосудов ниже зонда LDF может отражаться небольшими возвышениями в PU, совпадающими с сердцебиениями).
  4. Наденьте автоматическую манжету для измерения артериального давления на руку субъекта, который не был оборудован инструментом.
  5. Установите локальные нагреватели на 33 °C, чтобы удерживать температуру кожи в термонейтральном диапазоне25, тем самым устраняя любые колебания влияния тепловых раздражителей. Чтобы добавить комментарий к непрерывной записи в программном обеспечении для обозначения событий в эксперименте, нажмите на текстовое поле в правом верхнем углу экрана, введите комментарий, выберите, какие каналы должны получать комментарий, и нажмите « Добавить».

4. Протокол ацетилхолина «доза-эффект»

  1. После того, как поток эритроцитов стабилизируется в ответ на локальное нагревание 33 °C, начинается сбор исходных данных, которые в файле программного обеспечения для сбора данных обозначаются комментарием begin baseline. Для анализа данных требуется не менее 5-10 минут стабильной базы; При необходимости перезапустите базовый план в любой момент на этом этапе сбора данных и отметьте это в файле LabChart. На последней минуте базового уровня соберите данные об измерении артериального давления и введите значения в комментарий в файле LabChart.
  2. По истечении 5-10 минут сбора исходных данных измерьте и запишите исходное артериальное давление и введите комментарий к исходному исходному уровню в программное обеспечение для сбора данных.
  3. Выключите микроинфузионные насосы, а шприцы, наполненные лактатным раствором Рингера, замените на шприц, наполненный наименьшей концентрацией АЧ (10−10 М).
  4. Закрепите новые шприцы на месте и подтвердите перфузию жидкости через конец зонда, прежде чем снова включать микроинфузионные насосы. Введите комментарий begin −10 в запись программного обеспечения для сбора данных.
  5. Каждая концентрация АХа будет перфузионироваться в течение 5-10 мин при 2 мкл/мин. На последней минуте перфузии для каждой концентрации измерьте и запишите артериальное давление. По истечении времени перфузии для данной концентрации замените шприц следующей по величине концентрацией (например, 10−10 М раствор АХг заменяют на 10−9 М раствор), как описано в шагах 4.2-4.4.
  6. Сразу после перфузии конечная концентрация АЧ (10−1 М) заменить шприц АЧ шприцем, содержащим раствор Рингера, и повысить температуру локального нагревателя до 43 °С. После того, как поток эритроцитов стабилизируется, замените раствор Рингера нитропруссидом натрия (28 мМ), чтобы получить как тепловую, так и фармакологически индуцированную максимальную локальную вазодилатизацию. Измеряйте и записывайте артериальное давление каждые ~3 минуты в течение этой фазы максимального расширения сосудов.
  7. Как только наступит максимальное плато потока эритроцитов (~5 мин стабильного PU), эксперимент завершите. Нажмите кнопку «Стоп » в правом нижнем углу программного обеспечения для сбора данных, чтобы завершить непрерывный сбор данных.

5. Протокол локального отопления

  1. Как только поток эритроцитов стабилизируется после гиперемии, начните сбор исходных данных и укажите это в файле программного обеспечения для сбора данных с комментарием. На последней минуте базового уровня соберите данные измерения артериального давления и введите значения в комментарии в файл программного обеспечения для сбора данных.
  2. Увеличьте температуру локальных нагревателей до 39 °C или 42 °C, в зависимости от потребностей протокола (описано в разделе обсуждения).
  3. После того, как поток эритроцитов выйдет на плато в ответ на локальное применение тепла (~40-60 мин нагрева), перфузируйте N G-нитро-l-аргинин метиловый эфир (L-NAME; 15 мМ, растворенный в растворе Рингера; 2 мкл/мин; ингибитор NO-синтазы) через зонд (зонды) для микродиализа.
  4. После того, как поток эритроцитов выйдет на плато в ответ на L-NAME (~15-25 мин перфузии), увеличьте локальные нагреватели до 43 °C.
  5. После того, как поток эритроцитов выйдет на плато в ответ на 43 °C (плато ~2-5 мин наступает после ~20-45 мин нагревания), перфузируют нитропруссид натрия (28 мМ, растворенный в растворе Рингера) через зонд (зонды) для микродиализа.
  6. Как только наступит максимальное плато потока эритроцитов (~5 мин стабильного PU), эксперимент завершите. Нажмите кнопку «Остановить » в правом нижнем углу программного обеспечения для сбора данных, чтобы завершить сбор данных.

6. Снятие микродиализных зондов

  1. После окончания эксперимента используйте хирургические ножницы, чтобы разрезать микродиализные зонды. Осторожно снимите зонды LDF с нагревателей и снимите нагреватели с кожи. Аккуратно снимите ленту, удерживающую зонды на месте, на коже.
  2. Визуально определите, в каком месте прокола по обе стороны от зонда образовался наименьший сгусток крови. Отрежьте часть зонда рядом с участком с меньшим сгустком, оставив ~1 дюйм зонда за пределами кожи неразрезанным.
  3. Очистите участок кожи, окружающий места входа и выхода зонда, спиртовым тампоном, а также зонд длиной ~1, оставленный на менее свернутом участке.
  4. Дайте спирту высохнуть на коже. Затем возьмитесь за часть зонда, идущую от места прокола с большим сгустком, напротив участка ~1 дюйм на менее свернутом конце. Медленно потяните зонд к большему сгустку крови.
  5. Наложите стерильную марлю на любое кровотечение, возникшее в результате извлечения зонда, и надавите на него.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Ацетилхолин протокол «доза-ответ»

На рисунке 1А изображена схема, подробно описывающая протокол АЧ «доза-реакция». На рисунке 1B показана репрезентативная трассировка значений потока эритроцитов (единиц перфузии, PU; среднее значение 30 с) из стандартизированного протокола ACh «доза-ответ» для одного субъекта с течением времени. На рисунке 1С показан файл необработанных данных протокола A...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Техника внутрикожного микродиализа является универсальным инструментом в исследовании сосудов человека. Исследователи могут изменить протокол, чтобы еще больше диверсифицировать его применение. Например, мы описываем протокол АХГ «доза-реакция», но в других исследованиях механизмов вазоконстрикции или вазомоторного тонуса, а не только вазодилатации, использовались подходы «доза-ответ» норадреналина или нитропруссида натрия 26,27,28,29,30,31.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

У авторов нет конфликта интересов и нечего раскрывать.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Шприцы1 мл BD Шприцы302100
АцетлихолинСША Фармакопея1424511Пилотные данные, собранные в нашей лаборатории, указывают на то, что сушка ацетилхолина увеличивает вариабельность реакции ЦВК; не сушите, храните в влагопоглотителе
Спиртовые тампоныMckesson191089
Baby Bee Syringe DriveBioanalytical Systems, IncorporatedMD-1001В данном исследовании был использован дополнительный 3-шприцевой кронштейн (катальг-номер MD-1002):
CMA 30 Linear Microdialysion ProbesApparatus Harvard ApparatusCMA8010460
Connex Spot MonitorWelchAllyn74CT-BАвтоматизированный монитор артериального давления
Hive Шприцевой насос Контроллербиоаналитических систем, IncorporatedMD-1020Controls до 4 Baby Bee Шприц
Drive LabChart 8AD Instruments** Аппаратное обеспечение PowerLab и программное обеспечение LabChart должны быть совместимыми версиями
Lactated Ringer's SolutionAvantor (VWR)76313-478
Лазерный допплеровский расходомеркрови Moor InstrumentsMoorVMS-LDF
Набор для калибровки лазерного допплеровского зондаMoor InstrumentsCAL
Лазерный допплер VP12 ЗондMoor InstrumentsVP12
Зонды для линейного микродиализаBioanalytical Systems, Inc.MD-2000
NG-нитро-l-аргинин метиловый эфирSigma Aldrich483125-ML-NAME
Повидон-йод/бетадинDynarex1202
PowerLab C Устройство сбора данныхAD InstrumentsPLC01**
PowerLab C Интерфейс инструментаAD InstrumentsPLCI1** Зонд
клейкие дискиMoor Instrumentsприкрепляет локальный нагревательный блок к коже
Контроллер обогревателякожи Moor InstrumentsmoorVMS-HEAT 1.3
Малый нагревательный щупMoorInstruments VHP2
Стерильные простыниHalyard89731
Стерильная марляDukal Corporation2085
Стерильные хирургические перчаткиEsteem Каталожный номер Cardinal Health8856N, за которым следуют инициалы размера перчатки, затем буква «B» (например, 8856NMB для средних)
Хирургические ножницыCole-ParmerUX-06287-26

Ссылки

  1. Xu, J. Q., Murphy, S. L., Kochanek, K. D., Arias, E. Mortality in the United States, 2021. NCHS Data Brief. 456, (2022).
  2. Tsao, C. W., et al. Heart disease and stroke statistics-2023 update: A report from the American heart association. Circulation. 147 (8), e93(2023).
  3. Cohuet, G., Struijker-Boudier, H. Mechanisms of target organ damage caused by hypertension: Therapeutic potential. Pharmacology & Therapeutics. 111 (1), 81-98 (2006).
  4. Park, K. H., Park, W. J. Endothelial dysfunction: Clinical implications in cardiovascular disease and therapeutic approaches. Journal of Korean Medical Science. 30 (9), 1213-1225 (2015).
  5. Levy, B. I., Ambrosio, G., Pries, A. R., Struijker-Boudier, H. A. Microcirculation in hypertension: a new target for treatment. Circulation. 104 (6), 735-740 (2001).
  6. Sara, J. D., et al. Prevalence of coronary microvascular dysfunction among patients with chest pain and nonobstructive coronary artery disease. Journal of the American College of Cardiology: Cardiovascular Interventions. 8 (11), 1445-1453 (2015).
  7. Weis, M., Hartmann, A., Olbrich, H. G., Hör, G., Zeiher, A. M. Prognostic significance of coronary flow reserve on left ventricular ejection fraction in cardiac transplant recipients. Transplantation. 65 (1), 103-108 (1998).
  8. Rossi, M., et al. Investigation of skin vasoreactivity and blood flow oscillations in hypertensive patients: Effect of short-term antihypertensive treatment. Journal of Hypertension. 29 (8), 1569-1576 (2011).
  9. Pepine, C. J., et al. Coronary microvascular reactivity to adenosine predicts adverse outcome in women evaluated for suspected ischemia results from the National Heart, Lung and Blood Institute WISE (Women's Ischemia Syndrome Evaluation) study. Journal of the American College of Cardiology. 55 (25), 2825-2832 (2010).
  10. Matsuda, J., et al. Prevalence and clinical significance of discordant changes in fractional and coronary flow reserve after elective percutaneous coronary intervention. Journal of the American Heart Association. 5 (12), e004400(2016).
  11. Gupta, A., et al. Integrated noninvasive physiological assessment of coronary circulatory function and impact on cardiovascular mortality in patients with stable coronary artery disease. Circulation. 136 (24), 2325-2336 (2017).
  12. Roustit, M., Cracowski, J. L. Assessment of endothelial and neurovascular function in human skin microcirculation. Trends in Pharmacological Sciences. 34 (7), 373-384 (2013).
  13. Low, D. A., Jones, H., Cable, N. T., Alexander, L. M., Kenney, W. L. Historical reviews of the assessment of human cardiovascular function: interrogation and understanding of the control of skin blood flow. European Journal of Applied Physiology. 120 (1), 1-16 (2020).
  14. Kenney, W. L., Cannon, J. G., Alexander, L. M. Cutaneous microvascular dysfunction correlates with serum LDL and sLOX-1 receptor concentrations. Microvascular Research. 85, 112-117 (2013).
  15. Holowatz, L. A., Thompson, C. S., Minson, C. T., Kenney, W. L. Mechanisms of acetylcholine-mediated vasodilatation in young and aged human skin. Journal of Physiology. 563, 965-973 (2005).
  16. Sokolnicki, L. A., Roberts, S. K., Wilkins, B. W., Basu, A., Charkoudian, N. Contribution of nitric oxide to cutaneous microvascular dilation in individuals with type 2 diabetes mellitus. American Journal of Physiology - Endocrinology and Metabolism. 292 (1), E314-E318 (2007).
  17. DuPont, J. J., Ramick, M. G., Farquhar, W. B., Townsend, R. R., Edwards, D. G. NADPH oxidase-derived reactive oxygen species contribute to impaired cutaneous microvascular function in chronic kidney disease. American Journal of Physiology - Renal Physiology. 306 (12), F1499-F1506 (2014).
  18. Sprung, V. S., et al. Nitric oxide-mediated cutaneous microvascular function is impaired in polycystic ovary syndrome but can be improved by exercise training. Journal of Physiology. 591 (6), 1475-1487 (2013).
  19. Greaney, J. L., Saunders, E. F. H., Santhanam, L., Alexander, L. M. Oxidative stress contributes to microvascular endothelial dysfunction in men and women with major depressive disorder. Circulatory Research. 124 (4), 564-574 (2019).
  20. Stanhewicz, A. E., Jandu, S., Santhanam, L., Alexander, L. M. Increased angiotensin II sensitivity contributes to microvascular dysfunction in women who have had preeclampsia. Hypertension. 70 (2), 382-389 (2017).
  21. Greaney, J. L., et al. Impaired hydrogen sulfide-mediated vasodilation contributes to microvascular endothelial dysfunction in hypertensive adults. Hypertension. 69 (5), 902-909 (2017).
  22. Dillon, G. A., Stanhewicz, A. E., Serviente, C., Greaney, J. L., Alexander, L. M. Hydrogen sulfide-dependent microvascular vasodilation is improved following chronic sulfhydryl-donating antihypertensive pharmacotherapy in adults with hypertension. Journal of Physiology. 321 (4), H728-H734 (2021).
  23. Wong, B. J., et al. Sensory nerve-mediated and nitric oxide-dependent cutaneous vasodilation in normotensive and prehypertensive non-Hispanic blacks and whites. American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 319 (2), H271-H281 (2020).
  24. Dillon, G. A., Greaney, J. L., Shank, S., Leuenberger, U. A., Alexander, L. M. AHA/ACC-defined stage 1 hypertensive adults do not display cutaneous microvascular endothelial dysfunction. American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 319 (3), H539-H546 (2020).
  25. Gagge, A. P., Stolwijk, J. A., Hardy, J. D. Comfort and thermal sensations and associated physiological responses at various ambient temperatures. Environmental Research. 1 (1), 1-20 (1967).
  26. Greaney, J. L., Stanhewicz, A. E., Kenney, W. L., Alexander, L. M. Lack of limb or sex differences in the cutaneous vascular responses to exogenous norepinephrine. Journal of Applied Physiology. 117 (12), 1417-1423 (2014).
  27. Greaney, J. L., Stanhewicz, A. E., Kenney, W. L., Alexander, L. M. Impaired increases in skin sympathetic nerve activity contribute to age-related decrements in reflex cutaneous vasoconstriction. Journal of Physiology. 593 (9), 2199-2211 (2015).
  28. Alba, B. K., Greaney, J. L., Ferguson, S. B., Alexander, L. M. Endothelial function is impaired in the cutaneous microcirculation of adults with psoriasis through reductions in nitric oxide-dependent vasodilation. American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 314 (2), H343-H349 (2018).
  29. Greaney, J. L., Surachman, A., Saunders, E. F. H., Alexander, L. M., Almeida, D. M. Greater daily psychosocial stress exposure is associated with increased norepinephrine-induced vasoconstriction in young adults. Journal of the American Heart Association. 9 (9), e015697(2020).
  30. Nakata, T., et al. Quantification of catecholamine neurotransmitters released from cutaneous vasoconstrictor nerve endings in men with cervical spinal cord injury. American Journal of Physiology - Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 324 (3), R345-R352 (2023).
  31. Tucker, M. A., et al. Postsynaptic cutaneous vasodilation and sweating: Influence of adiposity and hydration status. European Journal of Applied Physiology. 118 (8), 1703-1713 (2018).
  32. Craighead, D. H., Alexander, L. M. Menthol-induced cutaneous vasodilation is preserved in essential hypertensive men and women. American Journal of Hypertension. 30 (12), 1156-1162 (2017).
  33. Brunt, V. E., Minson, C. T. KCa channels and epoxyeicosatrienoic acids: Major contributors to thermal hyperaemia in human skin. Journal of Physiology. 590 (15), 3523-3534 (2012).
  34. Choi, P. J., Brunt, V. E., Fujii, N., Minson, C. T. New approach to measure cutaneous microvascular function: An improved test of NO-mediated vasodilation by thermal hyperemia. Journal of Applied Physiology. 117 (3), 277-283 (2014).
  35. Johnson, J. M., Kellogg, D. L. Jr Local thermal control of the human cutaneous circulation. Journal of Applied Physiology. 109 (4), 1229-1238 (2010).
  36. Jung, F., et al. Laser Doppler flux measurement for the assessment of cutaneous microcirculation-Critical remarks. Clinical Hemorheology and Microcirculation. 55 (4), 411-416 (2013).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

сосуды кожиэндотелиальная дисфункциявазодилатация под действием оксида азоталазерная допплеровская флоуметриялокальный нагревфармакологическая диссекциягладкие мышцы сосудовмикрососудистая функция
Внутрикожный микродиализ: подход к исследованию новых механизмов микрососудистой дисфункции у человека
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.