Количественная оценка выработки глюкозы в печени, уреагенеза и липолиза с использованием модели перфузионной печени мышей

Marie Winther-Sørensen; Ida Marie Kemp; Hanne Cathrine Bisgaard; Jens Juul Holst; Nicolai J. Wewer Albrechtsen

doi:10.3791/65596

Методическая статья

Количественная оценка выработки глюкозы в печени, уреагенеза и липолиза с использованием модели перфузионной печени мышей

2.9K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/65596

⸱

6 октября 2023 г.

Marie Winther-Sørensen¹^,²^,³ , Ida Marie Kemp¹^,³ , Hanne Cathrine Bisgaard⁴ , Jens Juul Holst¹^,⁵ , Nicolai J. Wewer Albrechtsen²^,³

¹Department of Biomedical Sciences, Faculty of Health and Medical Sciences, University of Copenhagen, ²NNF Center for Protein Research, Faculty of Health and Medical Sciences, University of Copenhagen, ³Department for Clinical Biochemistry, Copenhagen University Hospital - Bispebjerg and Frederiksberg, ⁴Department of Cellular and Molecular Medicine, Faculty of Health and Medical Sciences, University of Copenhagen, ⁵NNF Center for Basic Metabolic Research, Faculty of Health and Medical Sciences, University of Copenhagen

В этой статье

Краткое содержание

В данной работе мы представляем надежный метод перфузии печени мышей in situ для изучения острой и прямой регуляции метаболизма печени без нарушения печеночной архитектуры, но при отсутствии внепеченочных факторов.

Аннотация

Печень выполняет множество функций, включая метаболизм питательных веществ. В отличие от других моделей исследования печени in vitro и in vivo , изолированная перфузионная печень позволяет изучать биологию и метаболизм печени в целом печени с интактной печеночной архитектурой, отделенной от влияния внепеченочных факторов. Перфузии печени были первоначально разработаны для крыс, но метод был адаптирован и к мышам. Здесь мы опишем протокол перфузии печени мыши in situ . Печень перфузируется антеградно через воротную вену оксигенированным бикарбонатным буфером Кребса-Хензелейта, а выход собирается из надпеченочной нижней полой вены с пережатием подпеченочной нижней полой вены для замыкания контура. С помощью этого метода можно оценить прямое воздействие исследуемого соединения на печень с подробным временным разрешением. Функция и жизнеспособность печени стабильны в течение, по крайней мере, 3 ч, что позволяет включить внутренний контроль в тот же эксперимент. Экспериментальные возможности с использованием этой модели многочисленны и могут помочь понять физиологию печени и ее заболевания.

Введение

Печень является важным органом в обмене веществ. Он играет ключевую роль в контроле энергетического баланса всего организма, регулируя метаболизм глюкозы, липидов и аминокислот. Рост числа заболеваний печени во всем мире становится серьезным глобальным бременем для здравоохранения, и необходимо больше знаний о патофизиологии и ее последствиях для функций печени.

Для исследований печени были разработаны различные модели in vitro, дополняющие исследования in vivo. Широко используются выделенные и культивируемые первичные гепатоциты грызунов и человека. Непаренхиматозные клетки могут быть отделены от гепатоцитов с помощью диф....