В данной работе мы представляем комплекс массажных манипуляций на крысиной модели ДЦП, которые позволяют значительно улучшить двигательную функцию крыс с ДЦП.
Методическая статья
В данной работе мы представляем комплекс массажных манипуляций на крысиной модели ДЦП, которые позволяют значительно улучшить двигательную функцию крыс с ДЦП.
Детский церебральный паралич (ДЦП) – заболевание с высокой инвалидизацией и заболеваемостью. Клиническими симптомами детского церебрального паралича являются двигательная дисфункция и нарушение осанки, часто сопровождающиеся когнитивными нарушениями. Массаж, традиционная терапия китайской медицины, может координировать Цзан и Фу, регулировать Ци и кровь, заставлять внутренние органы работать более гладко и успокаивать Инь и Ян. Кроме того, это эффективный метод лечения ДЦП в клинической практике. В данной работе обобщен набор простых и стандартизированных манипуляций массажа для молодых крыс с ДЦП, которым легко следовать. Процедура следующая: сначала массаж четырех акупунктурных точек конечностей, в том числе Цючи (LI11) и Зусанли (ST36); во-вторых, массаж акупунктурных точек живота Чжунвань (RN12), Тяньшу (ST25), Гуаньюань (CV4) и Цихай (CV6); И, наконец, массаж живота крыс. Этот комплекс методов массажа значительно улучшил двигательную функцию молодых крыс с ДЦП и является простым, стандартизированным и легким в применении. Мы адаптировали этот набор методов манипуляций на животных моделях, чтобы способствовать интернационализации и стандартизации массажа.
Детский церебральный паралич (ДЦП) – заболевание с высокой инвалидизацией и заболеваемостью. Эпидемиологическое исследование детского церебрального паралича показывает, что на 1000 новорожденных из 1000 детей приходится 3-5детей. Типичными симптомами церебрального паралича являются стойкое нарушение развития центральной моторики и осанки2, ограничение активности с сенсорной3, восприятием, познанием4, коммуникацией5, поведенческим расстройством, эпилепсией и вторичной проблемой опорно-двигательного аппарата1. До сих пор не существует лекарства от этой пожизненной инвалидизирующей болезни. Современные методы лечения включают ЛФК6, гидротерапию7, функциональную электростимуляцию8, экзоскелетмышц 9, терапию клетками пуповинной крови10, инъекции ботулотоксина и хирургическое вмешательство11. Однако клиническая реабилитация занимает много времени и потребляет много энергии, а реабилитация требует активного сотрудничества со стороны пациентов, что затрудняет ее воспроизведение на животных моделях. Хирургическое вмешательство имеет ограничения, показания и необратимость. Пероральные препараты имеют низкую эффективность в лечении двигательной функции у детей с церебральным параличом12. Терапия мышечным экзоскелетом и терапия пуповинной кровью имеют высокие экономические затраты и трудно себе позволить, что делает критически важным поиск подходящих стратегий лечения.
Массаж является неинвазивным, не имеющим побочных эффектов, широко признанным и экономически эффективным методом лечения детей. Как в клинических экспериментах13 , так и в экспериментах на животных было доказано, что он улучшает дисфункцию ДЦП. Традиционная китайская медицина считает, что массаж может улучшить дисфункцию ДЦП, регулируя органы и разблокируя меридианы15. Как эффективный метод лечения ТКМ, массаж требует современных медицинских методов исследований, чтобы объяснить механизм его действия, чтобы продвигать его в мире. Тем не менее, существуют объективные исследовательские ограничения и этические ограничения в изучении соответствующих механизмов у детей с ДЦП. Поэтому изучение соответствующих механизмов массажа для улучшения ХП у животных более удобно. Несмотря на то, что животные отличаются от детей, исследование воздействия массажа на животных требует соблюдения фундаментальных теорий ТКМ. С точки зрения клинической и экспериментальной зоологии, мы будем воспроизводить эту технологию на теле человека на теле животного, чтобы изучить эффективность массажа, что поможет способствовать применению массажной терапии.
Во-первых, традиционная китайская медицина считает, что ДЦП относится к симптомам «пяти опозданий» и «пяти мягкостей»16. Причинами ДЦП являются врожденная дисфункция плода, печеночная и почечная недостаточность, недостаток эссенции и ци или приобретенный дефицит питательных веществ15. Почки доминируют в росте, развитии, регенерации и восстановлении органов и тканей человека, и эти вещества имеют решающее значение для роста, развития, восстановления тканей и возрождения организма. Эссенциальная ци почек является основой роста и развития. Недостаточное содержание почек может привести к недостаточности костного мозга, нарушениям ци и крови, недостатку питания во внутренних органах тела, мышцах и костях. Дети с ДЦП склонны к задержке роста и развития, снижению подвижности суставов конечностей и повышенному мышечному напряжению. Кроме того, длительная болезнь может привести к чрезмерному дефициту и застою крови, вызывая обструкцию меридианов, приводящую к умственной отсталости, замедленной реакции, двигательным нарушениям, неоднозначности речи, слабости глотания и симптомам слюнотечения, таким как нарушения движений конечностей.
Селезенка управляет циркуляцией и трансформацией, служа источником ци и биохимии крови, а также основой приобретенных способностей. Человеческие меридианы, соединяющие внутренние органы, руки и ноги, являются путями, по которым циркулируют ци и кровь, сообщается вверх и вниз и регулируются инь и ян. Массаж меридиана Жэнь может улучшить функцию почек и регулировать ци и кровь. Использование акупунктурных точек на меридиане селезенки стопы Тай-Инь, меридиане желудка стопы Ян-Мин и меридиане толстой кишки руки Ян-Мин в массажных техниках улучшает функцию селезенки и желудка, что способствует циркуляции Ци и крови. Массаж использует меридианы, определенные части и акупунктурные точки для обеспечения щадящей физической стимуляции тела ребенка, вызывая реактивные изменения от поверхности внутрь и от внешнего к внутреннему, тем самым улучшая местное и общее кровообращение, восстанавливая нормальную возбудимость и торможение мозга и достигая соответствующего баланса в функции висцеральной и тканевой крови. Согласно этой теории, мы в основном используем массаж акупунктурных точек, таких как живот, Чжунвань (RN12), Тяньшу (ST25), Гуаньюань (CV4) и Цихай (CV6). Массаж живота может улучшить клинические симптомы у детей с ДЦП17,18,19 и, скорее всего, будет способствовать восстановлению повреждений головного мозга через путь мозг-кишечник20. Поскольку селезенка и желудок являются основой послеродового развития, они могут способствовать восстановлению после черепно-мозговой травмы, укрепляя селезенку, принося пользу желудку и восполняя ци и кровь.
Мы воспроизвели эту технику на крысах, чтобы максимально смоделировать вмешательство ТКМ в ДЦП, и обнаружили, что массаж живота может улучшить дисфункцию крыс с ДЦП. Таким образом, мы представляем комплекс методов изучения массажа живота для изучения соответствующих механизмов улучшения ДЦП с помощью массажа живота. Поскольку существование множества жанров массажа очень затрудняет изучение массажных механизмов, необходимо стандартизировать методы массажа.
Комитет по этике животных больницы Цзиньшань, связанной с Фуданьским университетом в Шанхае, одобрил это исследование. Молодые крысы породы Sprague Dawley (SD) выращивались в помещении для животных с SPF при освещении с 08:00 до 20:00, темноте с 20:00 до 08:00, контролируемой температурой 22 °C и относительной влажностью в помещении 40%-50%. У них был свободный доступ к еде и воде. Все экспериментальные операции на животных соответствуют этике благополучия экспериментальных животных и правилам безопасности при проведении экспериментов на животных.
1. Гипоксически-ишемическая энцефалопатия новорожденных животная модель 21
2. Параметры техники массажа
ПРИМЕЧАНИЕ: Основные техники массажа включают надавливание и растирание в качестве основных техник вмешательства. Перед экспериментом исследователи опирались на работу тестера техники, который собирал техники у эксперта по массажу живота из Тяньцзиня Ван Цзиньгуя.
3. Массажная манипуляция
ПРИМЕЧАНИЕ: Убедитесь, что давление большого пальца исследователя на акупунктурные точки является стабильным и длительным.
4. Локализация акупунктурных точек
ПРИМЕЧАНИЕ: Для крыс, родившихся в течение 2 недель, вес и длина крыс такие же, как и у мышей. Поэтому мы использовали методы мышиного массажа в соответствующей литературе для массажа крыс в течение 8-15 дней крыс24.
5. Весовой и поведенческий тест
После завершения моделирования ишемии и гипоксии27,28,29,30 (эксперимент был завершен в комнате для животных с SPF) мозг молодых крыс через 48 ч выживания был взят для поиска отека, разжижения и других явлений, как показано на рисунке 3. Изменения веса молодых крыс в симуляционной и массажной группах сравнивали с таковыми в модельной группе (Дополнительная таблица S1). Увеличение массы тела в модельной группе происходило медленнее, чем в группе массажа (рис. 4), что показало, что массаж улучшает рост и развитие молодых крыс с ДЦП. Результаты испытаний на бревне показали, что модельной группе потребовалось больше времени, чтобы пересечь балку, чем группам симуляции и массажа (рис. 5A и дополнительная таблица S2).
Более того, количество скольжений задних конечностей в модельной группе значительно увеличилось по сравнению с фиктивной группой (Дополнительная таблица S3). Напротив, количество соскальзываний задних конечностей значительно уменьшилось в группе массажа по сравнению с модельной группой (рис. 5B и дополнительная таблица S3). Массаж значительно улучшил рост и двигательную функцию крыс с ДЦП.

Рисунок 1: Процесс моделирования животных и связанное с ним поведенческое тестирование . (А) Удаление блуждающего нерва во время моделирования. (Б) Массаж 5-недельных крыс. (В) Крысы после завершения ишемии. (D) Испытание балансирной балкой. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 2: Отображение некоторых акупунктурных точек, связанных с массажем живота26. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 3: Отек одной стороны мозга через 48 ч после установки модели. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 4: Влияние массажной терапии на вес. Средний вес детенышей крыс (n = 6) измеряли от Р7 до Р40, а на Р7 проводили гипоксически-ишемическое вмешательство. После моделирования ГИЭ скорость роста массы тела в модельной группе значительно снизилась, а массажная терапия значительно улучшила ее (р < 0,05). Данные представлены в виде среднего ± SD; #p < 0,05 Массажная группа по сравнению с модельной группой. *p < 0,001 модельной группы по сравнению с фиктивной группой. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 5: Влияние массажа на двигательную дисфункцию у крыс с церебральным параличом. (A) Время, необходимое крысам для пересечения луча (n = 6). (Б) Число соскальзываний задних конечностей крыс. По результатам рисунка 4А, Б моторная работоспособность группы массажа была достоверно лучше, чем в модельной группе (р < 0,05). Данные представлены в виде среднего ± SD; *p < 0,001 Модельная группа по сравнению с фиктивной группой. #p < 0,01 Группа массажа по сравнению с модельной группой. **p < 0,0001 Модельная группа по сравнению с фиктивной группой. ##p < 0.0001 Группа массажа в сравнении с модельной группой. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.
| ЛИ11 | Внутреннее углубление лучевой мышцы-разгибателя запястья и | ||||
| СДЖ5 | наружное углубление локтевого сустава при лучелоктевой впадине дистальной точки 5/6 на воображаемом | ||||
| ЛИ4 | линия, соединяющая запястье и локоть, сзади от разгибателя Сухожилие Digitorum communis | ||||
| Пакет обновления 9 (SP9) | на первом дорсальном интеркостсее, медиально к середине второго пястная кость, в передней части стопы | ||||
| СТ36 | при впадине ниже медиального мыщелка большеберцовой кости, между большеберцовой и икроножной мышцами | ||||
| Пакет обновления 6 (SP6) | в проксимальной одной пятой точке на линии от ST35 до передней боковая часть сгиба лодыжки | ||||
| ЛР3 | в проксимальной конечной точке дистальной одной пятой на воображаемой линии соединение SP9 и медиальной лодыжки большеберцовой кости | ||||
| ЦВ4 | в проксимальном конце впадины между первым и вторым плюсневые кости | ||||
| СТ25 | в точке 3/5 вниз по вентральной срединной линии, соединяющей пупок к лобковому бугорку | ||||
| ЦВ6 | латерально от пупка, в средней точке от пупка до линии соска в точке 3/10 вниз по вентральной срединной линии, соединяющей пупок к лобковому бугорку | ||||
Таблица 1: Анатомические положения различных акупунктурных точек26.
Дополнительная таблица S1: Исходные данные о весах всех трех групп крыс. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл.
Дополнительная таблица S2: Исходные данные о времени пересечения балансировочной балки для всех трех групп крыс. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл.
Дополнительная таблица S3: Исходные данные о поскальзывании задних конечностей всех трех групп крыс. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл.
Неонатальная модель ишемии и гипоксии на крысах является наиболее классической моделью для изучения ДЦП27,28,29,30. Мы вмешивались в жизнь крыс с 8-го по40-й день, что примерно эквивалентно вмешательству в жизнь человека от 3 месяцев до 11,5 лет, золотого периода для ростаи развития человека. Полученные результаты свидетельствуют о том, что массаж является эффективным методом улучшения дисфункции ДЦП. Предыдущие эксперименты на животных показали, что массаж может уменьшить воспаление и улучшить двигательные и когнитивные функции у молодых крыс с CP14,32. Некоторые клинические исследования показали, что массаж меридианов спины и мочевого пузыря улучшает двигательную функцию у детей с ДЦП33. Эти результаты также показывают, что массаж может сократить время, за которое молодые крысы с ДЦП проходят через бревно, и уменьшить количество скольжений задних лап. Таким образом, видно, что массаж живота может улучшить двигательную функцию молодых крыс с ДЦП.
Традиционная китайская медицина считает, что ДЦП относится к пяти отсроченным и пяти мягким симптомам, при этом врожденный дефицит ци почек является основополагающим фактором, а приобретенная слабость селезенки и желудка - способствующим фактором. Почка управляет костью и генерирует костный мозг, так что, когда почка наполнена ци, костный мозг становится обильным, а интеллект остается нормальным. Селезенка управляет мышцами и конечностями, поэтому, если селезенка здорова, мышцы будут сильными, а суставы будут свободно двигаться. Поэтому необходимо восполнять селезенку и укреплять почки, улучшать работу желудочно-кишечного тракта, двигать конечностями и суставами, улучшать функцию. Во-первых, теория ТКМ утверждает, что живот является корнем всех болезней. Массаж живота может очищать вверх и вниз, разделять инь и ян, удалять старое и создавать новое, обогащать пять внутренних органов, изгонять внешнее зло и устранять внутренние болезни. Во-вторых, исследования показали, что дети с ДЦП имеют более низкую массу тела и склонны к недоеданию, включая чрезмерное или несбалансированное потребление, энергию или нутритивный статус34,35,36,37. Задержка роста и недостаточность питания часто встречаются у детей с ДЦП и напрямую связаны с более тяжелой двигательной дисфункцией37. Риск недостаточности питания тесно связан с прогнозом пациентов с ХП34,38,39. В настоящее время основной областью исследований абдоминального массажа является улучшение желудочно-кишечных симптомов, таких как функциональная диспепсия, запор, диарея и детская анорексия 33,40,41,42. В конце концов, многочисленные исследования показывают, что стимуляция Чжунвань, Тяньшу, Гуаньюань и Цихай может лечить желудочно-кишечные заболевания, способствовать всасыванию и улучшать пищевой статус43,44,45. Точки живота могут лечить заболевания, связанные с желудочно-кишечным трактом, расчесывать механизм ци центрального энерджайзера, восполнять силу первичной ци и способствовать биохимии ци и крови. Поэтому мы ввели массаж живота в экспериментальный метод улучшения двигательной дисфункции у молодых крыс с ДЦП.
Массаж живота в основном сочетается с точками живота, дополненными точками конечностей, такими как Цючи и Зусанлы. Наружные коллатерали и суставы акупунктурных точек четырех конечностей соединены с внутренними органами, а для достижения наилучшего терапевтического эффекта используется массаж живота. С одной стороны, экспериментальные исследования на животных показывают, что иглоукалывание Зусанли новорожденных крыс с гипоксически-ишемической ХП может улучшить функцию молодых крыс с ХП46. С другой стороны, клинические исследования показывают, что иглоукалывание в Hegu47и других акупунктурных точках может эффективно усиливать развитие ДЦП. Цюйчи и Цзусанли являются акупунктурными точками в толстой кишке Ян-Мин меридиана48 и Стоп-Ян-Мин на соматостатине49, которые являются наиболее часто используемыми акупунктурными точками в клиническом лечении инсульта в Китае для улучшения паралича конечностей50, 51. См. Кроме того, Цючи и Зусанлы являются точками слияния меридианов толстой кишки и желудка соответственно. Из этой точки меридиан ци достигает внутренних органов и соединяется с верхней и нижней частями, а также с меридианами и коллатералями. Кроме того, иглоукалывание и прижигание в сочетании с массажем показали лучший эффект на улучшение состояния детей с ДЦП в результатах клинических исследований52. Подводя итог, можно сказать, что ТКМ-терапия может помочь улучшить дисфункцию пациентов с ДЦП.
Несмотря на то, что было проведено множество исследований о том, как массаж может улучшить ДЦП, разнообразие техник массажа стало огромной проблемой. Существует множество школ массажа, и различия в силе, направлении и других факторах создают множество проблем. Мы изучили множество техник массажа и изучили набор простых и легких техник массажа. Тем не менее, мы не можем имитировать различные техники массажа. Во-вторых, время массажа является важным этапом в развитии молодых крыс. Его вес и быстрый рост различных систем организма приводят к постоянному изменению силы наших пальцев у крыс на разных стадиях. Необходимо продолжать усилия по изучению стабильности массажа.
У авторов нет конфликта интересов, который можно было бы раскрыть.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Аппарат для анестезии животных | RWD OF SCIENCE | R550 | |
| Экспериментальные перчатки | Sri Trang Gloves (Thailand) Co.,Ltd | 0169 | |
| Изофлуран | RWD OF SCIENCE | R510-22-10 | |
| Rat | Shanghai Jihui Experimental Animal Breeding Co., Ltd. | ||
| Манипулятивный тестер YF-3 | Разработан совместно Шанхайским университетом Фудань и Шанхайским университетом традиционной китайской медицины | Номер патента Китайской Народной Республики (ZL200710187403.1) |