Методическая статья

Повышение надежности биобанка опухолей предстательной железы с помощью усовершенствованной техники отбора проб и гистологической характеристики

DOI:

10.3791/65635

⸱

17 ноября 2023 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pathology, Hospital Universitario y Politécnico La Fe, 2Department of Urology, Hospital Universitario y Politécnico La Fe, 3Biobanco La Fe, Instituto de Investigación Sanitaria La Fe, 4Department of Medicine, Jaume I University of Castellon, 5Department of Surgery, University of Valencia, 6Department of Pathology, University of Valencia

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Этот протокол описывает метод облегчения сбора образцов из образцов радикальной простатэктомии. Цель состоит в том, чтобы картировать, охарактеризовать и препарировать образцы тканей на основе анатомопатологических критериев на основе анатомопатологических критериев перед их хранением в биобанке.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Получение свежих и хорошо охарактеризованных образцов опухолевой ткани имеет решающее значение для проведения высококачественных «омиксных» исследований. Тем не менее, это может быть особенно сложно в контексте рака предстательной железы (РПЖ) из-за уникальной природы этого органа и высокой гетерогенности, связанной с этой опухолью. С другой стороны, гистопатологическая характеристика образцов перед их хранением, не вызывающая существенных изменений в тканях, также представляет собой интригующую задачу. В этом контексте мы представляем новый метод получения, картирования, характеристики и микродиссекции резецированной ткани предстательной железы на основе анатомопатологических критериев.

В отличие от ранее опубликованных протоколов, этот метод сокращает время, необходимое для гистопатологического анализа образца предстательной железы без нарушения его структуры, что имеет решающее значение для оценки хирургических краев. Кроме того, он позволяет проводить разграничение и микромакродисперсию свежих образцов ткани предстательной железы, уделяя особое внимание гистологическим областям опухолей, определяемым патологическими критериями, такими как шкала Глисона, предшествующие поражения (интраэпителиальная неоплазия предстательной железы высокой степени злокачественности - PIN) и воспалительные поражения (простатит). Затем эти образцы хранятся в биобанке для последующих исследовательских анализов.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Рак предстательной железы (РПЖ) является2-м по частоте онкологическим заболеванием у мужчин и5-м по значимости причиной смерти во всем мире1. Лечение пациента и прогноз зависят от стадии и классификации опухоли (по шкале Глисона), о чем свидетельствует более высокая 5-летняя выживаемость локализованных и низкодифференцированных опухолей (6-я степень по шкале Глисона) (99%) по сравнению с высокими степенями по шкале Глисона и метастатическими опухолями (31%)2.

Локальный рецидив РПЖ и неудача лечения были связаны с характерной высокой генетической внутриопухолевой гетерогенностью этой опухоли3-го типа. Кроме того, РПЖ считается мультифокальным заболеванием с несколькими опухолевыми очагами, проявляющими различные морфологические, гистологические и молекулярные характеристики4, которые могут возникать независимо или происходить от общего предка опухолевых клеток5. Предыдущие исследования показали, что эволюция опухоли различается у пациентов в зависимости от конкретных генетических факторов, которые могут способствовать метастазированию или ограничивать клеточную линиюпростатой. Таким образом, молекулярная характеристика различных опухолевых очагов имеет решающее значение не только для постановки более точного диагноза и прогноза, но и для подбора эффективного и персонализированного лечения для пациента.

В этом контексте биомедицинские исследования и интегративные мультиомические подходы открывают беспрецедентные возможности для классификации рака по различным подтипам, идентификации диагностических и прогностических биомаркеров, а также обнаружения маркеров, связанных с ответом на лечение. Кроме того, эти подходы способствуют лучшему пониманию биологии этого заболевания 6,7. Биологические образцы, будь то ткани или биожидкости, могут быть проанализированы с использованием различных мультиомиксных платформ (геномика, транскриптомика, протеомика, метаболомика и т.д.) для выявления биологических особенностей, лежащих в основе патофизиологии рака, тем самым устраняя существующие ограничения, связанные с генетической и фенотипической гетерогенностью. Тем не менее, важно учитывать, что качество данных, полученных в результате омиксных исследований, зависит от качества образцов, собранных из опухолей, их точной характеристики, а также последующей обработкии хранения.

В этом контексте получение свежей ткани РПЖ для исследования представляет собой методологическую проблему из-за сложности успешного отбора проб опухоли9. Предыдущие методы включали случайную выборку после радикальной простатэктомии, что давало плохие результаты10. Тем не менее, более поздние подходы включают таргетные протоколы, основанные как на магнитно-резонансной томографии (МРТ), так и на данных биопсии, что приводит к повышению эффективности при сборе образцов опухолей11.

С другой стороны, гистопатологическая характеристика образцов до их хранения без существенного изменения тканей также представляет собой интересную задачу. Следовательно, во многих случаях гистопатологическое определение образцов проводят после их анализа (например, метаболомный анализ HR 1H NMR)12. Такая практика влечет за собой излишние расходы, временные затраты и потерю значительного количества образцов, которые в итоге исключаются из анализа (например, образцов, которые после гистопатологического анализа оказываются не образцами опухоли). В других случаях гистопатологическая характеристика образцов проводится до их анализа. Фактически, в некоторых предыдущих исследованиях была предпринята попытка стандартизировать методы для получения репрезентативных высококачественных исследовательских образцов из образцов радикальной простатэктомии для геномики и метаболомики13,14. Тем не менее, эффективность отбора проб значительно выше при заборе из уже гистологически подтвержденных срезов (88%), которые разрушают ткань, по сравнению с неподтвержденными срезами (45%)1.

В данной работе представлена новая методология для преодоления этих ограничений, направленная на получение свежих и хорошо охарактеризованных образцов ПК перед хранением в биобанке. Этот метод был разработан в результате совместных усилий различных клинических служб (урологии, патологии и биобанка больницы La Fe). Важно подчеркнуть, что биобанки играют важную роль в сборе, обработке, сохранении и хранении биологических образцов, обеспечивая при этом высокое качество образцов и данных, а также соблюдение этических и законодательных требований 8,15,16.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Этот метод был разработан в результате совместных усилий различных клинических служб (урологии, патологии и биобанка больницы La Fe). Исследование было проведено в соответствии с институциональными, национальными и международными рекомендациями по благополучию человека и получило одобрение Комитета по этике биомедицинских исследований при Институте исследований санитарной больницы Университета и Политечки La Fe (Валенсия, Испания). Все образцы хранились в биобанке больницы Ла Фе (PT13/0010/0026). Общая процедура подробно описана на рисунке 1.

figure-protocol-1
Рисунок 1: Общая схема процедуры. Схематическое изображение пошаговой процедуры, описанной в разделе протокола. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

1. Нацеливание на опухоль

  1. Перед операцией используйте многопараметрическую или бипараметрическую магнитно-резонансную томографию (mpMRI или bpMRI)17,18, чтобы определить местоположение опухоли и составить карту ее положения в предстательной железе. Объедините информацию, полученную с помощью МРТ, с результатами трансректального УЗИ или ректального исследования, если последнее дает противоречивые результаты.
  2. Чтобы улучшить локализацию опухоли, ознакомьтесь с результатами предоперационной трансректальной биопсии предстательной железы под контролем УЗИ и МРТ.
    ПРИМЕЧАНИЕ: При диагностике рака предстательной железы биопсия берется непосредственно из предстательной железы через трансректальный доступ. Эти биопсии включают в себя систематический забор образцов из предстательной железы (с использованием цилиндров, распределенных по всей железе) и цилиндров, непосредственно направленных на подозрительные результаты МРТ. Для целенаправленного извлечения этих образцов используется трансректальное ультразвуковое исследование, которое сочетается с результатами МРТ когнитивным способом («когнитивное слияние») или с «реальным программным обеспечением для слияния МРТ-УЗИ», если оно доступно.

2. Радикальная простатэктомия и забор простаты

  1. Выполните стандартизированную роботизированную радикальную простатэктомию с помощью трансперитонеального доступа, следуя шагам, описанным Huynh et al.19.
    1. Начните с абдоминального доступа, инсуффляции и установки порта камеры (см. Таблицу материалов). Поместите оставшиеся пять портов под прямой обзор. Установите пневмоперитонеум на 12 мм.
    2. Освободите мочевой пузырь, надрезав брюшину, и рассеките периректальное пространство.
    3. Откройте тазовую фасцию с каждой стороны.
    4. Выполнить полное рассечение передней и боковой частей простаты и мочевого пузыря.
    5. Проводят вскрытие шейки мочевого пузыря, выявляют и рассекают проксимальный отдел мочеиспускательного канала, чтобы получить доступ к задним частям простаты и мочевого пузыря.
    6. Рассекаем семенные пузырьки и пространство прямой кишки19.
    7. Рассекайте боковые части простаты, щадя сосудисто-нервные пучки.
    8. Обеспечить гемостаз сосудов в заднелобковом пространстве.
    9. Рассеките верхушку и рассеките дистальный отдел мочеиспускательного канала.
    10. Завершите пузырно-оуретальный анастомоз.
    11. Извлечь предстательную железу и выполнить закрытие разреза19.
  2. Соберите свежую простату в сухую емкость. Крайне важно не зафиксировать и не заделать образец с помощью парафина.
  3. Транспортируйте свежий хирургический образец, который включает в себя всю простату, в биобанк для обработки образцов.

3. Обработка предстательной железы и забор образцов

  1. Выберите целевые зоны предстательной железы для забора образцов на основе информации о расположении опухоли, полученной из предоперационной мпМРТ, результатов предоперационной биопсии и прямой пальпации образца простатэктомии. Запишите эту информацию в форму, которая включает идентификационные данные пациента, области предстательной железы, которые были окончательно взяты, и количество собранных образцов.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Когда результаты МРТ, результаты предоперационной биопсии и прямая пальпация образца простатэктомии совпадают, нацеливайте все образцы в то или иное место (от 4 до 6 цилиндров). Если есть какое-либо несоответствие, увеличьте количество цилиндров и отдельно нацельтесь на все зоны, которые подозрительны на воздействие любого из этих методов.
  2. Используйте одноразовую автоматическую иглу (хирурга) для извлечения цилиндрических образцов из выбранных областей (шаг 1.1). Затем определите (патологоанатом) внешнюю зону цилиндра, зажмите цилиндр тканевыми щипцами, поместите его на предметное стекло и отметьте внешнюю зону тканевыми чернилами. Повторите этот процесс со всеми взятыми цилиндрами.
  3. Собранные цилиндры поместите горизонтально на диск держателя образцов (см. Таблицу материалов), заполненный закладной средой для криостата, и перенесите их на охлаждающую плиту микротома для резки.
  4. После установки на рабочую поверхность прикрепите диск держателя образцов к патрону для образцов и разрежьте его осторожными движениями колеса, выполнив следующие действия:
    1. Используйте состав с оптимальной температурой резки (компаунд OCT, см. Таблицу материалов) для встраивания образца ткани перед замораживанием среза в микротом-криостат.
    2. После этого разрежьте образец с помощью криостата-микротома при температуре -25 °C. Соберите тонкие цилиндрические срезы ткани (10 мкм) на обработанные предметные стекла микроскопа. Убедитесь, что вы собрали всего несколько микрон ткани, чтобы обеспечить достаточное количество неповрежденной опухолевой ткани для хранения в биобанке.
    3. Соберите два или три тонких среза на предметное стекло и вручную окрашивайте их, чтобы контролировать окончательную окраску. Глаз техника обеспечивает оптимальное окрашивание, и можно выполнить любое необходимое повторное окрашивание. Выполните следующие действия
      1. Зафиксируйте предметные стекла в 96% этаноле, увлажните в дистиллированной воде и покрасьте гематоксилином Харриса (см. Таблицу материалов) в течение 1 минуты, чтобы окрасить ядра. Удалите излишки гематоксилина, промыв предметные стекла дистиллированной водой.
      2. Обработайте предметные стекла 30% гидроксидом аммония, чтобы гематоксилин стал синим. Излишки раствора удаляют полосканиями дистиллированной водой.
      3. Морилку предметные стекла эозином (см. Таблицу материалов) в течение 30 с.
      4. Затем обезвоживайте предметные стекла с нарастающим титрованием спирта, очистите их ксилолом (100%) и закрепите их DPX (смесь дистирола, пластификатора и ксилола, используемая в качестве монтажного материала из синтетической смолы, заменяющего ксилол-бальзам, см. Таблицу материалов). Во время этих действий опустите горки и выньте их из банки с раствором коплина.
      5. Наконец, поместите покровную ткань поверх окрашенной ткани и используйте среду с подходящим показателем преломления (см. Таблицу материалов) для просмотра под микроскопом.

4. Характеристика образца

  1. Анализируют образец под световым микроскопом (патологоанатомом), различая участки карциномы и определяя оценку опухоли по шкале Глисона. Задокументируйте все эти данные и отметьте на предметных стеклах точные зоны опухоли.
  2. На этом этапе пометьте предметное стекло точным местоположением опухоли и соответствующим показателем по шкале Глисона20. Также отметьте расположение PIN (интраэпителиального новообразования предстательной железы) на основе морфологической идентификации.

5. Микро-макро-диссекция и хранение образцов

  1. Четко обозначьте различные гистологические компоненты четкими маркерами на предметном стекле (патологоанатом) и напрямую соотнесите их с замороженной тканью на диске.
  2. Затем с помощью хирургического лезвия макро-микро препарируют участки образца, отмеченные на предметном стекле внутри ОКТ-диска, разделяя их на опухолевые, околоопухолевые, PIN-и нормальные ткани предстательной железы.
  3. Когда среда для встраивания начнет размораживаться, обработайте ткань щипцами и поместите ее в правильно маркированные криопробирки.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Тщательно храните каждый рассеченный фрагмент в соответствующей пробирке после гистологической диагностики криосрезов.
  4. Храните меченые криопробирки с полностью охарактеризованными гистологическими образцами в Биобанке при температуре -80 °C для последующего использования в научных исследованиях.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Шаги, описанные в этом разделе, могут быть выполнены обученным техником под наблюдением патологоанатома. Хирургический образец должен быть как можно скорее доставлен в биобанк, чтобы предотвратить деградацию тканей и нуклеиновых кислот. Согласно справочным пособиям, необходимо прилагать усилия, чтобы избежать увеличения времени ишемии (>30 мин)21. Образцы могут храниться в биобанке в течение неограниченного срока при условии соблюдения принципов качества образцов.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Результаты показывают, что данная методика позволила получить опухолевый материал в 61% изученных случаев (25 из 41 случая) (табл. 1).

Таблица 1: Гистопатологические данные исследуемых образцов. Резюме гистопатологических данных по образцам, использованным в исследовании. Диагностический цилиндр относится к образцу биопсии предстательной железы, полученному в диагностических целях, в то время как обработанный цилиндр соответствует цилиндру, полученному из обра...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В любом научном исследовании получение качественных образцов является важным требованием для уменьшения систематических погрешностей и получения надежных результатов22. Таким образом, контроль преаналитических переменных, таких как температура, при которой образцы обрабатываются и хранятся, время, прошедшее от сбора образца до хранения, использование стерилизованных материалов или влияние, которое добавление консервантов или других добавок может оказать на образцы, должен быть рассмотрен в любом п...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

А.Л. подтверждает контракт на постдокторскую диссертацию «Маргарита Салас» (номер 21-076), а контракт на проведение исследований с MAM-T «Мария Замбрано» (номер МАЗ/2021/03 UP2021-021). Оба контракта были профинансированы Европейским союзом и ЕС следующего поколения.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Щипцы CadiereIntuitivePN1052082-US 10/2021Номер по каталогу: 471049. 18 использований.
Обычные горкиKnittel Glass2021Ground/ Mated end
Cryostat microtomeThermo Fisher Scientific---Criostato CryoStar NX50
CryotubesGreiner Bio-One GmbHАрт.: 122280.CRYO S. PP, с завинчивающейся крышкой, стерильный.
Хирургическая система Да ВинчиIntuitivePN1052082-US 10/2021XI модель
Инструменты для рассеченияBayer---Два пинцета и хирургическое лезвие 
DPX Eukitt Medizin- und Labortechnik GmbH6.00.01.0001.06.01.01
ЭозинAgilent157252
фенестрированные биполярные щипцыIntuitivePN1052082-US 10/2021Номер по каталогу: 471205. 14 жизней.
Force bipolarIntuitivePN1052082-US 10/2021Номер изделия: 471405. 12 использований.
Морозильные камерыThermo ScientificМОДЕЛЬ 907. -80º C
ГематоксилинAgilent157251
Inmunohistochemistry СлайдыAgilent-DakoK802021-2
Большой игольчатый приводIntuitivePN1052082-US 10/2021Номер детали: 471006. 15 использований.
Биполярные щипцы MarylandIntuitivePN1052082-US 10/2021Номер изделия: 471172. 14 использований.
МикроскопOlympus---Olympus cx40
Лезвия для микротомаPFM Medicala35
Монополярные изогнутые ножницыIntuitivePN1052082-US 10/2021Номер детали: 470179. 10 использований.
ОКТ-компаундNEG-50LOT.117340
PlusSpeed S Одноразовый биопсийный аппарат со скошенным наконечникомPeter Pflugbeil GmbH Щипцы PSS-1825-S
ProGaspIntuitivePN1052082-US 10/2021Номер изделия: 471093. 18 использований.
Держатель образца DiscDavidson Cryo Chuck. BradleyПродукция30 мм 
Тканевые чернилаPelikan2021Ink 4001 brilliant black (301168)
XylolQuimipurRef. 169

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Rawla, P. Epidemiology of prostate cancer. World Journal of Oncology. 10 (2), 63-89 (2019).
  2. Epstein, J. I. The 2019 Genitourinary Pathology Society (GUPS) white paper on contemporary grading of prostate cancer. Archives of Pathology & Laboratory Medicine. 145 (4), 461-493 (2021).
  3. Zhang, W. Intratumor heterogeneity and clonal evolution revealed in castration-resistant prostate cancer by longitudinal genomic analysis. Translational Oncology. 16, 101311(2022).
  4. Haffner, M. C., et al. Genomic and phenotypic heterogeneity in prostate cancer. Nature Reviews Urology. 18 (2), 79-92 (2021).
  5. Woodcock, D. J. Prostate cancer evolution from multilineage primary to single lineage metastases with implications for liquid biopsy. Nature Communications. 11 (1), 5070(2020).
  6. Heo, Y. J., Hwa, C., Lee, G. H., Park, J. M., An, J. Y. Integrative multi-omics approaches in cancer research: from biological networks to clinical subtypes. Molecules and Cells. 44 (7), 433-443 (2021).
  7. Menyhárt, O., Győrffy, B. Multi-omics approaches in cancer research with applications in tumor subtyping, prognosis, and diagnosis. Computational and Structural Biotechnology Journal. 19, 949-960 (2021).
  8. Annaratone, L. Basic principles of biobanking: from biological samples to precision medicine for patients. Virchows Archiv. 479 (2), 233-246 (2021).
  9. King, C. R., Long, J. P. Prostate biopsy grading errors: A sampling problem. International Journal of Cancer. 90 (6), 326-330 (2000).
  10. Jayadevan, R., Zhou, S., Priester, A. M., Delfin, M., Marks, L. S. Use of MRI-ultrasound fusion to achieve targeted prostate biopsy. Journal of Visualized Experiments. 146, e59231(2019).
  11. Heavey, S., et al. Use of magnetic resonance imaging and biopsy data to guide sampling procedures for prostate cancer biobanking. Journal of Visualized Experiments. 152, 60216(2019).
  12. Panach Navarrete, J. Estudio metabolómico en tejido prostático y orina para el diagnóstico y pronóstico del cáncer de próstata. , https://roderic.uv.es/handle/10550/81853 (2022).
  13. Bertilsson, H., et al. A new method to provide a fresh frozen prostate slice suitable for gene expression study and MR spectroscopy. The Prostate. 71 (5), 461-469 (2011).
  14. Show SOP - Biospecimen Research Database. , https://brd.nci.nih.gov/brd/sop/show/522 (2022).
  15. Dagher, G. Quality matters: International standards for biobanking. Cell Proliferation. 55 (8), e13282(2022).
  16. Yüzbaşıoğlu, A., Özgüç, M. Biobanking: sample acquisition and quality assurance for "omics" research. New Biotechnology. 30 (3), 339-342 (2013).
  17. Carpagnano, F. A. Multiparametric MRI: local staging of prostate cancer. Current Radiology Reports. 8 (12), 27(2020).
  18. Christophe, C. Prostate cancer local staging using biparametric MRI: assessment and comparison with multiparametric MRI. European Journal of Radiology. 132, 109350(2020).
  19. Huynh, L. M., Ahlering, T. E. Robot-assisted radical prostatectomy: a step-by-step guide. Journal of Endourology. 32 (S1), S28-S32 (2018).
  20. van Leenders, G. J. L. H., et al. The 2019 International Society of Urological Pathology (ISUP) consensus conference on grading of prostatic carcinoma. The American Journal of Surgical Pathology. 44 (8), e87-e99 (2020).
  21. Liu, A., Collins, C. C., Diemer, S. M. Biobanking metastases and biopsy specimens for personalized medicine. Journal of Biorepository Science for Applied Medicine. 3, 57-67 (2015).
  22. Ellervik, C., Vaught, J. Preanalytical variables affecting the integrity of human biospecimens in biobanking. Clinical Chemistry. 61 (7), 914-934 (2015).
  23. Arellano, H. L., Castillo, C. O., Metrebián, B. E. Diagnostic agreement of the Gleason score in needle biopsy and radical prostatectomy and its clinical consequences. Rev Méd Chile. 132 (8), 971-978 (2004).
  24. Torres Caparó, D. A. Concordancia en los valores de gleason en biopsia prostática transrectal y en prostatectomia radical en pacientes con cáncer de próstata del Hospital Cirujano Mayor Santiago Távara entre enero 2010 - junio del 2018. , Universidad Ricardo Palma. https://repositorio.urp.edu.pe/handle/20.500.14138/1886 (2019).
  25. Chavolla-Canal, A. J., et al. Concordancia del puntaje de Gleason en biopsia transrectal de próstata vs prostatectomía radical. Revista Mexicana de Urología. 81 (2), 1-10 (2021).
  26. Fan, X. J., et al. Impact of cold ischemic time and freeze-thaw cycles on RNA, DNA and protein quality in colorectal cancer tissues biobanking. Journal of Cancer. 10 (20), 4978-4988 (2019).
  27. Vaswani, A., et al. Comparative liquid chromatography/tandem mass spectrometry lipidomics analysis of macaque heart tissue flash-frozen or embedded in optimal cutting temperature polymer (OCT): Practical considerations. Rapid communications in Mass Spectrometry: RCM. 35 (18), e9155(2021).
  28. Zhang, W., Sakashita, S., Taylor, P., Tsao, M. S., Moran, M. F. Comprehensive proteome analysis of fresh frozen and optimal cutting temperature (OCT) embedded primary non-small cell lung carcinoma by LC-MS/MS. Methods (San Diego, Calif). 81, 50-55 (2015).
  29. Boyd, A. E., Allegood, J., Lima, S. Preparation of human tissues embedded in optimal cutting temperature compound for mass spectrometry analysis. Journal of Visualized Experiments. 170, e62552(2021).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи