3D-биопечать фотонастраиваемых гидрогелей для изучения активации фибробластов

Alicia E. Tanneberger; Layla Blair; Duncan Davis-Hall; Chelsea M. Magin

doi:10.3791/65639

Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

3D-биопечать фотонастраиваемых гидрогелей для изучения активации фибробластов

2.5K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/65639

⸱

30 июня 2023 г.

Alicia E. Tanneberger¹ , Layla Blair¹ , Duncan Davis-Hall¹ , Chelsea M. Magin¹^,²^,³

¹Department of Bioengineering, University of Colorado Denver | Anschutz Medical Campus, ²Department of Pediatrics, University of Colorado Anschutz Medical Campus, ³Division of Pulmonary Sciences and Critical Care Medicine, Department of Medicine, University of Colorado Anschutz Medical Campus

В этой статье

Краткое содержание

В данной статье описывается, как выполнить 3D-биопечать фотонастраиваемых гидрогелей для изучения жесткости внеклеточного матрикса и активации фибробластов.

Аннотация

Фотонастраиваемые гидрогели могут трансформироваться пространственно и во времени в ответ на воздействие света. Включение этих типов биоматериалов в платформы клеточных культур и динамический запуск изменений, таких как увеличение жесткости микросреды, позволяет исследователям моделировать изменения во внеклеточном матриксе (ВКМ), которые происходят во время прогрессирования фиброзного заболевания. Представлен метод 3D-биопечати фотонастраиваемого гидрогелевого биоматериала, способного к двум последовательным реакциям полимеризации в ванне с желатиновой подложкой. Техника биопечати Freeform Reversible Embedding of Suspended Hydrogels (FRESH) была адаптирована путем регулировки pH опорной ванны для облегчения реакции присоединения по Майклу. Во-первых, биочернила, содержащие полиэтиленгликоль-альфа-метакрилат (ПЭГαМА), реагировали вне стехиометрии с клеточным разлагаемым сшивающим агентом с образованием мягких гидрогелей. Эти мягкие гидрогели позже подвергались воздействию фотоинициатора и света, чтобы вызвать гомополимеризацию непрореагировавших групп и сделать гидрогель более жестким. Этот протокол охватывает синтез гидрогеля, 3D-биопечать, фоторестирирование и характеризацию конечных точек для оценки активации фибробластов в 3D-структурах. Представленный здесь метод позволяет исследователям напечатать на 3D-принтере различные материалы, которые подвергаются реакциям полимеризации, катализируемым pH, и может быть реализован для создания различных моделей тканевого гомеостаза, заболеваний и репарации.

Введение

3D-биопечать — это революционная технология, которая позволяет исследователям точно депонировать клетки и биоматериалы в 3D-объемах и воссоздавать сложную иерархическую структуру биологических тканей. За последнее десятилетие достижения в области 3D-биопечати позволили создать биющиеся сердечные ткани^{человека1,} функциональные модели тканей почек², модели газообмена в легких³ и модели опухолей для исследования рака⁴. Изобретение встроенных методов 3D-биопечати, таких как реверсивное встраивание взвешенных гидрогелевых биопринтов Freeform (FRESH), позволило воспроизвести в 3D....