Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Автоматизированный импактор для модели ушиба спинного мозга у мышей

3.5K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/65656

⸱

19 января 2024 г.

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Здесь представлено новое автоматизированное устройство для ушиба спинного мозга для мышей, которое может точно воспроизводить модели ушиба спинного мозга различной степени.

Аннотация

Повреждение спинного мозга (ТСМ) из-за травматических повреждений, таких как автомобильные аварии и падения, связано с постоянной дисфункцией спинного мозга. Создание контузионных моделей травмы спинного мозга путем воздействия на спинной мозг приводит к патологиям, сходным с большинством травм спинного мозга в клинической практике. Точные, воспроизводимые и удобные животные модели травмы спинного мозга имеют важное значение для изучения травмы спинного мозга. Мы представляем новое автоматизированное устройство для ушиба спинного мозга для мышей, интеллектуальную систему травм спинного мозга Университета Гуанчжоу Цзинань, которая может создавать модели ушибов спинного мозга с точностью, воспроизводимостью и удобством. Система точно создает модели различной степени повреждения спинного мозга с помощью лазерных датчиков расстояния в сочетании с автоматизированной мобильной платформой и передовым программным обеспечением. Мы использовали эту систему для создания трехуровневых моделей мышей с травмами спинного мозга, определили их баллы по шкале Бассо (BMS) и провели поведенческие анализы, а также тесты на окрашивание, чтобы продемонстрировать их точность и воспроизводимость. Показан каждый шаг разработки моделей травм с использованием этого устройства, формируя стандартизированную процедуру. Этот метод позволяет создавать воспроизводимые модели мышей с ушибом спинного мозга и снижает факторы манипулирования человеком за счет удобных процедур обращения. Разработанная животная модель является достоверной для изучения механизмов повреждения спинного мозга и связанных с ними подходов к лечению.

Введение

Травма спинного мозга обычно приводит к постоянной дисфункции спинного мозга ниже поврежденного сегмента. В основном это вызвано предметами, ударяющимися о позвоночник, и гиперэкстензией позвоночника, такими как дорожно-транспортные происшествияи падения1. В связи с ограниченной доступностью эффективных вариантов лечения травмы спинного мозга, выяснение патогенеза повреждений спинного мозга на животных моделях будет информативным для разработки соответствующих подходов к лечению. Модель ушиба спинного мозга, вызванной воздействием на спинной мозг, приводит к разработке животных моделей с аналогичной патологией к большинству клинических случаев ....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Исследования с участием животных были рассмотрены и одобрены Комитетом по этике Цзинаньского университета.

1. Обезболивание животных и спинальная ламинэктомия Т10

  1. Для этого исследования использовали 8-недельных самок молодых взрослых мышей C57/6J. Обезболивайте мышей внутрибрюшинными инъекциями кетамина (100 мг/кг) и диазепама (5 мг/кг). Проверьте успешность анестезии, на что указывает потеря болевого рефлекса. Нанесите ветеринарную мазь на глаза, чтобы предотвратить сухость под наркозом.
  2. Сбрейте волосы на спине мышей с помощью бритвы, чтобы обнажить кожу. Продезинфицируйте кожу тремя чередующимися дозам....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Ламинэктомия была выполнена 24 самкам мышей (в возрасте 8 недель), как описано выше. Мыши в фиктивной группе (n=6) не подвергались повреждению спинного мозга, в то время как остальные мыши, включая группу 0,5 мм (n=6), группу 0,8 мм (n=6) и группу 1,1 мм (n=6), подвергались удару спинного мозга разной глубины. Показатели BMS регулярно регистрировались в течение 1 месяца после операции (рис. 4). Выявлены достоверные различия в послеоперационных показателях BMS мышей в разных группах. Через 1 .......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Травма спинного мозга может привести к сенсорному и двигательному дефициту, что может привести к серьезным физическим и умственным нарушениям. В Китае частота травм спинного мозга в разных провинциях колеблется от 14,6 до 60,6 на миллион18. Рост распространенности ТСМ окажет большее давление на систему здравоохранения. В настоящее время существует ограниченный эффективный вариант лечения повреждений спинного мозга, травм, поскольку его патомеханизмы и процессы восстановления еще не полностью изуче.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих финансовых интересов.

Благодарности

Эта работа была поддержана Национальным фондом естественных наук Китая, No 82102314 (для ZSJ) и 32170977 (для HSL) и Фондом естественных наук провинции Гуандун, No 2022A1515010438 (для ZSJ) и 2022A1515012306 (для HSL). Это исследование было поддержано Программой клинических передовых технологий Первой аффилированной больницы Цзинаньского университета, Китай, No JNU1AF- CFTP- 2022- a01206 (HSL). Это исследование было поддержано Проектом научно-технического плана Гуанчжоу, No 202201020018 (для HSL), 2023A04J1284 (для ZSJ) и 2023A03J1024 (для HSL).

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
0,01M PBS (порошок, pH7,2-7,4)Solarbio Life SciencesP1010
2,2,2-трибромэтанолMacklin75-80-9
4% параформальдегид фиксатор тканейBiosharp life scienceBL539A
БиомикроскопLeicaLCC50 HD
CatWalk Noldus Информационные технологииCatWalk XT 9.1
Защитное стеклоCITOTEST Scientific10212432C
Встраиваемая машинаChangzhou Zhongwei Электронный инструментBMJ-A Этанол
абсолютныйDAMAO64-17-5
FootFaultScanClever Sys Inc.-
Предметное стеклоCITOTEST Scientific80302-2104
Набор для окрашивания гематоксилином и эозиномBeyotime BiotechnologyC0105S
микрошлифовальный сверло FEIYUBIO19-7010
Фиксатор позвоночника мышиRWD Life Science68094
Парафиновый микротомThermoshandon finesse 325
RotaRod для мышейUgo Basile47600
СтереомикроскопKUY NICESZM-7045
Трет-амиловый спиртMacklin75-85-4
КсилолКитай Национальная Фармацевтическая Компания10023418
#

Ссылки

  1. Venkatesh, K., Ghosh, S. K., Mullick, M., Manivasagam, G., Sen, D. Spinal cord injury: pathophysiology, treatment strategies, associated challenges, and future implications. Cell and Tissue Research. 377 (2), 125-151 (2019).
  2. Chiu, C. W., Cheng, H., Hsieh, S. L.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Модель контузионной травмыспинной мозг мышишкала Бассо для мышейповеденческие тестыокрашивание гематоксилином и эозиномлазерный датчик расстояниятест Rotarodтест CatWalk