Изучение вариантов жизненного цикла: использование температуры и типа субстрата в качестве взаимодействующих факторов для предпочтений личинок и самок мух

Summary

В данной работе подробно описаны два протокола оценки предпочтений в отношении источников пищи и яйцекладок у личинок и самок мух. Они включают в себя четыре варианта с двумя взаимодействующими факторами: типом субстрата и температурой. Анализы позволяют определить предпочтительный источник пищи для личинок и предпочтительное место для яйцекладки для самок.

Abstract

Мухи (Diptera: Calliphoridae) представляют широкий спектр образа жизни личинок, обычно классифицируемых как облигатный паразитизм, факультативный паразитизм и полная сапронекрофагия. Некоторые виды паразитов, как облигатные, так и факультативные, считаются имеющими санитарное и хозяйственное значение, так как их личинки могут вызывать миаз (заражение живых тканей личинками). Однако примечательно, что решающую роль при выборе места яйцекладки играет взрослая самка, а, следовательно, во многом определяет характер питания и условия развития личинок. В данном исследовании предложены два протокола для проверки предпочтений кормления личинок и предпочтений самки по месту откладки яиц с учетом двух взаимодействующих факторов: типа мясного субстрата и температуры. Представленные здесь установки позволили протестировать личинок Lucilia cuprina и самок гравида в четырехвариантном анализе с двумя температурами (33 ± 2 °C и 25 ± 2 °C) и двумя типами мясных субстратов (свежее мясо с добавлением крови и 5-дневное тухлое мясо). Личинки или гравидные самки могут закапывать или откладывать яйца, соответственно, в одном из следующих способов: тухлое мясо при 25 °C (имитация состояния некрофагов), свежее мясо с добавлением крови при 33 °C (имитация состояния паразитических видов) и две контрольные группы, тухлое мясо при 33 °C или свежее мясо с кровью при 25 °C. Предпочтение оценивается путем подсчета количества личинок или яиц, отложенных в каждом варианте для каждого репликанта. Сравнение наблюдаемых результатов со случайным распределением позволило оценить статистическую значимость предпочтения. Результаты показали, что личинки L. cuprina отдают предпочтение перепревшему субстрату при температуре 25 °C. И наоборот, предпочтения самок к месту откладки яиц были более разнообразными в зависимости от типа мяса. Эта методика может быть адаптирована для проверки предпочтений других видов насекомых аналогичного размера. Другие вопросы также могут быть исследованы с помощью альтернативных условий.

Introduction

Мухи, особенно мускоидные калиптраты (в том числе светлячки, домашние мухи, мухи-боты и мясные мухи), демонстрируют широкий спектр образа жизни, включая паразитическое и некро-сапрофагическое^{поведение.} Паразитические виды, как правило, вызывают миаз — заражение живых тканей личинками2^. В семействе Calliphoridae как облигатные, так и факультативные паразитические виды являются основными вредителями домашнего скота, ответственными за экономические потери и плохое самочувствие животных из-за заражения личинками 2,3,4,5,6,7.

Protocol

Образцы мух были получены с помощью ловушек, а не на зараженных животных. Выдана лицензия SISBIO (67867-1) на сбор и содержание мух семейства Calliphoridae в неволе в лабораторных условиях. Образцы насекомых не подлежат этической оценке в исследованиях в Бразилии. Говядина и кровь были получены коммерческим путем, и никакого этического разрешения не требовалось.

1. Предпочтения личинок в питании

1. Приготовление чашек Петри, содержащих 2% агара
   1. Приготовьте четыре чашки Петри с 2% агаром. Для этого добавьте 6 г бактериологического агара в 300 мл воды и растопите эту смесь в микроволновой печи. Затем равномерно ....

Results

Для демонстрации эффективности представленных методов эксперименты были проведены с использованием лабораторной популяции Lucilia cuprina (семейство: Calliphoridae), факультативной паразитической мухи². Полный набор исходных данных, полученных для этого вида, можно найти в дополнительном файле S3 с результатами тестов на предпочтения личинок и самок субстрата. Чтобы оценить, проявляют ли личинки и самки предпочтение к какому-либо субстрату, наблюдаемые данные сравнивались.......

Discussion

Понимание эволюции пищевых привычек, особенно в контексте паразитизма у мух, требует изучения предпочтений субстрата на разных этапах жизни для питания или яйцекладки. Поэтому в данном исследовании были предложены надежные и простые методы изучения субстратных предпочтений у личинок и самок мух. Эти методы были опробованы на Lucilia cuprina, факультативной паразитической мухе². Интересно, что эксперименты выявили явную склонность к гнилому мясу при температуре 25 °C среди личинок L. c.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Агар	Сигма-Олдрич	05038-500Г	Для микробиологии
Черные картоны	-	-	70х50 см
Кровь крупного рогатого скота с антикоагулятом	-	-	50% чистой бычьей крови с антикоагулянтом (3,8% цитрата натрия) + 50% фильтрованной воды
Мясо крупного рогатого скота -		-	Около 7-8% жира
Щетка	-	-	Изготовлено из пластиковой
конической трубки	Сокол или Дженерик-50		мл
Крестообразные стеклянные контейнеры	ручной работы	NA	48x48 см, 8 см в высоту и 8 см в ширину
Erlenmeyer	Vidrolabor	NA	500 мл
70% этанол	Synth	A1084.01.BL	70% этилэтанола абсолют + 30% фильтрованная вода
Мерный цилиндр	Nalgon or Generic-500		мл и 50 мл
Грелка			см размеры, 40 Вт, 127
В Инфракрасный термометр	HeTaiDa	HTD8808	Бесконтактный термометр для тела (Частота дискретизации: 0,5 с, < бр/> Точность: ± 0,2 ° C, Размер: 5-15 см)
Чашка Петри (Стекло)	Precision	NA	150x20 мм Размеры
			(Примечание: чашки Петри могут быть пластиковыми, если использовать их только один раз)
Чашка Петри PS	Cralplast	18130	60x15 мм размеры
Пластиковая пипетка Пастера	-	-	3 мл (общий объем)
Цитрат натрия	Синтез	C11033.01.AG	3,8% Цитрат натрия (38 г разведенный в 1 л фильтрованной воды)
Ложки	-	-	Необходимо более одной ложки. Используйте по одному для каждого типа мясного субстрата. Желательно из нержавеющей стали.
Шпатель из нержавеющей стали	Общий-Плоский		конец и ложка
Стереомикроскоп			/22 объективы
Пинцетр	-		-Металл и тонкая точка
Белые светодиодные световые ленты	NA	NA	4.8 Вт, 2x0.05 мм², 320 люмен, Цветовая температура: 6500 K (белый)