Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Модель двусторонней почечной ишемии-реперфузии при остром повреждении почек у мышей

3.1K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/65838

⸱

2 февраля 2024 г.

 ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Модель ишемии-реперфузионного повреждения (ИРИ) может быть использована на разных стадиях развития острого повреждения почек (ОПП), особенно при прогрессировании ОПП в хроническую болезнь почек (ХБП). В данной статье мы описываем процедуру разработки модели IRI у мышей с помощью трансабдоминального доступа, с зажимом ножек почек с помощью сосудистого зажима для индуцирования ишемического повреждения.

Аннотация

Острое повреждение почек (ОПП) определяется как быстрое снижение функции почек, при котором стойкая почечная дисфункция постепенно прогрессирует до хронической болезни почек (ХБП) из-за необратимой потери нефронов и их дезадаптивной репарации. В последние годы частота ОПП растет в связи с различными этиологиями, включая обезвоживание, сепсис, нефротоксичность, мышечные повреждения и большие травмы, при которых большинство эпизодов приходится на ишемийско-реперфузионное повреждение (ИРИ). Разработка модели IRI у мышей индуцируется хирургическим пережатием ножек почек, что обеспечивает мощные и контролируемые инструменты для доклинических моделей ОПП. Важно отметить, что модель IRI развертывается на разных этапах развития ОПП, особенно в процессах от ОПП к ХБП. Несмотря на то, что модель IRI широко практикуется во многих лабораториях, ряд переменных по-прежнему влияет на результаты этой модели. В данной статье мы описываем процедуру разработки модели IRI, чтобы предоставить исследователям воспроизводимый и надежный метод изучения основного патогенеза в развитии ОПП и прогрессирования ОПП в ХБП.

Введение

Острое повреждение почек (ОПП) – тяжелый клинический синдром со значительной заболеваемостью и смертностью, определяемый как повышение уровня креатинина сыворотки крови на ≥ 0,3 мг/дл (26,5 мкМ/л) в течение 48 ч или повышение уровня креатинина сыворотки крови до ≥ в 1,5 раза от исходного уровня в течение 7 дней, или объема мочи < 0,5 мл/кг/ч в течение 6 ч1, 2,3. Несмотря на десятилетия исследований, эффективная терапия ОПП для облегчения повреждения почек или ускорения их восстановления отсутствует, и у значительной части пациентов с ОПП прог....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Самцы мышей C57BL/6J в возрасте 8 недель и массой тела 25 г были использованы для установления модели ОПП методом двусторонней ишемии-реперфузии. Согласно предыдущим исследованиям, мы поддерживаем температуру тела на уровне около 36,5 °C-37 °C, а продолжительность ишемии почек составляет 30 минут в хирургии IRI12,13. Всего для каждой группы требовалось по 6 мышей, а в качестве контроля служили мыши, управляемые имитацией. Эксперименты на животных в этом исследовании были одобрены Институциональным комитетом по уходу за животными и их использованию (IACUC) Чжэцзянского универси....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Состояние почек во время операции

Характерной чертой успешной ишемии является то, что почка постепенно меняет цвет с красного на темно-фиолетовый в течение 1-2 минут, а успешная реперфузия характеризуется тем, что почка постепенно меняется с темно-фиолетовой на красную в течение 1-2 минут.

Гистология почки после операции

HE и периодическое окрашивание кислотой по Шиффу (PAS) являются прямыми способами под.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

В данной статье мы подробно описали модель почечной ИРИ, подчеркнув, что она является надежной моделью для прогрессирования ОПП и ОПП в ХБП. Кроме того, мы демонстрируем влияние двух основных критериев повреждения почек, включая гистологию и функцию почек.

Необходимо подчеркнуть несколько ключевых моментов в хирургических процедурах для создания воспроизводимой и надежной модели. При абдоминальной хирургии рекомендуется делать разрез по средней линии, чтобы об.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Благодарности

Мы выражаем признательность всем участникам за сотрудничество в настоящем исследовании. Это исследование было поддержано финансированием Фонда естественных наук провинции Чжэцзян Китая (LZ22H050001) и провинциальной программы провинции Чжэцзян по выращиванию инновационных талантов в области здравоохранения высокого уровня.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Машинка для стрижки шерстиживотных FEIYUBIO19-7002
Шприцы 1 млLongreenSR60061
ЭтанолMacklinE885996
МарляFEIYUBIO19-5022
Гомеотермическая система мониторингаWarmmate40 x 50
ИглодержательDKBTCZQ-00160
РазбрасывательRWDR22029-03
Стерильный физиологический растворBiosharpBL158A
Ножницы для салфетокDKBTDC-YKJ1002
Пинцет для тканейDKBTDK079904
Зажим для сосудовFine Science Tools18055-02
Викрил шовный материалShanghai Jinhuan4 -0 

Ссылки

  1. Al-Jaghbeer, M., Dealmeida, D., Bilderback, A., Ambrosino, R., Kellum, J. A. Clinical decision support for in-hospital AKI. J Am Soc Nephrol. 29 (2), 654-660 (2018).
  2. Kellum, J. A., Lameire, N. KDIGO AKI Guideline Work Group. Diagnosis, evaluat....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Болезнь почекмодель на мышахфункция почекхроническая болезнь почекпережатие почечного стебляпотеря нефроновдоклинические модели

Эта статья была опубликована

Видео скоро будет доступно