Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Куркуминоид-опосредованная антимикробная фотодинамическая терапия на мышиной модели кандидоза полости рта

1.8K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/65903

⸱

27 октября 2023 г.

 ,  ,  ,  , 
1Department of Dental Materials and Prosthodontics, School of Dentistry, Araraquara, São Paulo State University (UNESP), 2Department of Social Dentistry, School of Dentistry, Araraquara, São Paulo State University (UNESP)

В этой статье

Краткое содержание

Этот протокол описывает применение антимикробной фотодинамической терапии (ФДТ) на мышиной модели кандидоза полости рта. ФДТ проводили с использованием водорастворимой смеси куркуминоидов и синего светодиодного света.

Аннотация

Антимикробная фотодинамическая терапия (ФДТ) была широко исследована in vitro, а доклинические модели инфекций на животных подходят для оценки альтернативных методов лечения до клинических испытаний. В этом исследовании описывается эффективность аФДТ на мышиной модели кандидоза полости рта. Сорок мышей были иммуносупрессивно введены с помощью подкожных инъекций преднизолона, а их языки были инокулированы с помощью мазка из ротовой полости, предварительно смоченного в клеточной суспензии C. albicans . В ходе эксперимента тетрациклин вводили с питьевой водой. Через пять дней после инокуляции грибка мыши были случайным образом распределены на восемь групп; Девятая группа необработанных неинфицированных мышей была включена в качестве отрицательного контроля (n = 5). Три концентрации (20 мкМ, 40 мкМ и 80 мкМ) смеси куркуминоидов были протестированы с синим светодиодным светом (89,2 мВт/см2; ~455 нм) и без света (группы C+L+ и C+L- соответственно). В качестве контрольной группы оценивали только свет (C-L+), отсутствие лечения (C-L-) и животных без инфекции. Данные анализировали с помощью тестов Уэлча ANOVA и Геймса-Хауэлла (α = 0,05). Кандидоз полости рта был установлен у всех инфицированных животных и визуализировался макроскопически по наличию характерных белых пятен или псевдомембран на тыльной стороне языка. Гистопатологические срезы подтвердили большое присутствие дрожжей и филаментов, ограниченных ороговевшим слоем эпителия в группе C-L-, а присутствие грибковых клеток было визуально снижено на изображениях, полученных от мышей, подвергшихся ФДТ куркуминоидами 40 мкМ или 80 мкМ. ФДТ, опосредованная 80 мкМ куркуминоидами, способствовала снижению количества колоний на 2,47 log10 по сравнению с таковыми в группе C-L- (p = 0,008). Во всех остальных группах не было выявлено статистически значимого снижения количества колоний, включая группы фотосенсибилизаторов (C+L-) или только света (C-L+). Куркуминоид-опосредованная аФДТ снижала грибковую нагрузку от языков мышей.

Введение

Кандидоз полости рта (ОК) – основная грибковая инфекция ротовой полости; это вызвано чрезмерным ростом Candida spp. Предрасполагающие факторы к ОК включают эндокринную дисфункцию, применение антибиотиков широкого спектра действия, радио- и химиотерапию, дефицит питательных веществ, ксеростомию (низкий поток слюны), ношение зубных протезов, плохую гигиену и, особенно, иммуносупрессию1. Среди видов Candida Candida albicans является наиболее распространенным и вирулентным; Он обнаруживается в организме человека как комменсальный вид и как условно-патогенный микроорганизм. C. albicans обладает способностью изменять свою морфологию от комменсальных дрожжей (бластопоров) до патогенных филаментов (гиф и псевдогиф)2. Нитевидные формы, особенно гифы, могут проникать в эпителий хозяина путем эндоцитоза или активного проникновения, вызывая инфекцию3. Другие факторы вирулентности C. albicans включают адгезию, образование биопленки и секрецию липолитических и гидролитических ферментов и токсинов, таких как липазы, фосфолипазы, протеиназы и кандидализин4.

Лечение ОК включает использование противогрибковых средств, особенно топических полиенов и азолов (нистатин и миконазол)5. Тем не менее, они показывают только краткосрочную эффективность, и часто рецидивируют. Кроме того, чрезмерное использование противогрибковых препаратов породило проблему развития и распространения устойчивости к противогрибковымпрепаратам6. Поэтому необходимы альтернативные методы лечения, такие как антимикробная фотодинамическая терапия (ФДТ), которая сочетает в себе фотосенсибилизатор (ФС) и свет с соответствующей длиной волны (такой же, как и у поглощения ФС) в присутствии кислорода. ФС связываются с клетками или поглощаются ими и при активации светом продуцируют активные формы кислорода (АФК), которые токсичны для сенсибилизированных клеток7.

В ФДТ одним из фотосенсибилизаторов (ФС) является куркумин (CUR), природное соединение, извлеченное из корневищ растения куркумы (Curcuma longa L.). Куркумин обладает многочисленными терапевтическими свойствами, включая противовоспалительные, антиоксидантные, противораковые и противомикробные свойства 8,9. Предыдущее исследование показало, что ФДТ с использованием CUR эффективно уменьшает C. albicans в мышиной модели кандидоза полости рта, не причиняя никакого вреда тканям хозяина10. CUR является основным куркуминоидом, извлекаемым из куркумы, но в этом растении также содержатся другие полифенолы, такие как деметоксикуркумин и бис-деметоксикуркумин. Куркуминоид-опосредованная аФДТ продемонстрировала антибактериальную активность в отношении биопленок золотистого стафилококка, выращенных в катетерах11. Однако, насколько нам известно, его противогрибковая активность в отношении C. albicans остается неясной. Таким образом, в этом исследовании мы оценили аФДТ, опосредованную куркуминоидной солью, против C. albicans в мышиной модели ОК.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Протокол исследования по использованию мышей был одобрен Комитетом по этике использования животных (номера дел 05/2008 и 09/2020) в Школе стоматологии, Араракура, UNESP. В качестве референтного штамма использовали C. albicans (ATCC 90028). Для настоящего исследования были использованы шестинедельные самки швейцарских мышей (n = 45) с массой тела 20-30 г. Животные были предоставлены Государственным университетом Сан-Паулу, UNESP, Ботукату.

1. Подготовка ПС и выбор источника света для ФДТ

  1. Подготовьте ПС в соответствии с техническими характеристиками тестируемого вещества.
    ПРИМЕЧАНИЕ: В этом исследовании в качестве ФС использовалась водорастворимая смесь куркуминоидов (водорастворимая солевая смесь12 на основе CUR) (см. таблицу материалов и рисунок 1). Разведения на 20 мкМ, 40 мкМ и 80 мкМ (15,6, 29,2 и 58,4 мг/л соответственно) готовили в сверхчистой воде непосредственно перед использованием и выдерживали при температуре 5 °C.
  2. Выберите световое оборудование с соответствующей длиной волны (такой же, как у поглощения ФС), способное равномерно и одновременно освещать всю фотосенсибилизируемую мишень без нагрева ткани.
    ПРИМЕЧАНИЕ: В данном исследовании использовался наконечник, содержащий светодиод (светодиод, см. таблицу материалов), который был разработан в Институте физики Сан-Карлоса (Университет Сан-Паулу, Сан-Карлос, Испания, Бразилия). Выходная мощность света составляла 89,2 мВт/см2 при длине волны синего цвета около 455 нм.

2. Приготовление инокулята C. albicans

  1. Референсный штамм C. albicans (ATCC 90028) хранить в дрожжах-пептон-глюкозе (YEPD, см. таблицу материалов) с 50% глицерином при -80 °C до использования.
  2. Замороженный штамм разморозить при комнатной температуре, распределить 100 мкл аликвоты на чашке Петри с декстрозным агаром Сабуро (SDA) с хлорамфениколом (см. таблицу материалов) и инкубировать при 37 °C в течение 48 ч.
  3. Перенесите пять колоний в 10 мл дрожжевого азотного бульона со средой 2% глюкозы (YNBg) и выращивайте аэробно при 37 °C в течение 16 ч.
  4. Разбавляют дрожжевую культуру в свежем YNBg (1:10) и проводят аэробную инкубацию при 37 °C до тех пор, пока оптическая плотность не достигнет средней логарифмической фазы роста.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Предварительно стандартизируйте кривую роста микроорганизмов для каждой лаборатории. В текущем исследовании культурам давали инкубироваться в течение примерно 8 ч, пока они не достигали средней логарифмической фазы роста, на что указывает оптическая плотность на длине волны 540 нм (OD540), со средним значением 0,536 ± 0,062 условных единиц (среднее ± стандартное отклонение [SD]).
  5. Центрифугируют культуру при 5 000 х г при комнатной температуре в течение 5 мин, выбрасывают надосадочную жидкость и дважды промывают гранулы тем же объемом стерильного фосфатно-солевого буфера (PBS; 0,136 М NaCl, 2 мМ KCl, 1 мМ KH2PO4, 10 мМ Na2HPO4, рН 7,4).
  6. Используйте аликвоты объемом 100 мкл для выполнения четырех последовательных 10-кратных разведений в PBS, распределите разведения по планшетам SDA и инкубируйте при 37 °C в течение 48 ч для подсчета колоний. Как правило, грибковые суспензии используются в концентрациях примерно 4,5 × 107 колониеобразующих единиц на миллилитр (КОЕ/мл).

3. Индукция ОК у мышей

ПРИМЕЧАНИЕ: Следующая методика была ранее описана Takakura et al.13 и воспроизведена нашей группой10,14 с некоторыми изменениями.

  1. Случайным образом распределите мышей по девяти группам (n = 5), что соответствует одинаковому количеству обработок (Дополнительный файл 1).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Ротовая полость мышей должна быть отрицательной на рост Candida . Это необходимо проверить, взяв мазок из ротовой полости и нанеся образец на SDA.
  2. Содержать животных в пропиленовых ящиках по10 штук (макс. 5 мышей в коробке), с древесной стружкой для напольного покрытия, в виварии с регулируемой температурой при температуре 23 ± 2 °C при цикле 12/12 ч свет/темнота. Никакого специального обогащения не требуется.
  3. Содержать мышей на экструдированной мышиной диете и фильтрованной воде ad libitum.
  4. Подкожно вводят иммуносупрессивный препарат преднизолон (100 мг/кг массы тела, см. таблицу материалов) в первый раз в первый день всем членам групп C+L+ 20, C+L+ 40, C+L+ 80, C+L- 20 мкМ, C+L- 40, C+L- 80, C-L+ и C-L- (Дополнительный файл 1).
    ПРИМЕЧАНИЕ: Держите мышей из одной группы в одной коробке и ежедневно наблюдайте за ними на предмет любых признаков стресса и потери веса. Обратитесь к ветеринарному врачу за обезболивающим или измененным кормом/водой, если вы заметили стресс или потерю веса.
  5. Начиная с первого дня и до конца эксперимента, добавляйте тетрациклина гидрохлорид в питьевую воду в концентрации 0,83 мг/мл13.
  6. Инокулировать языки мышей на второй день, включая группы C+L+ 20, C+L+ 40, C+L+ 80, C+L- 20, C+L- 40, C+L- 80, C-L+ и C-L- (Дополнительный файл 1), инокулюмом C. albicans . Не прививайте мышей из отрицательной контрольной группы (NCtrl).
    1. Усыпляйте животных внутримышечным введением 10 мг/кг хлорпромазина хлорида (см. таблицу материалов) на каждую мышцу бедра перед проведением посева.
    2. Проводят внутриротовую инокуляцию мышей путем замачивания стерильного тампона (по одному на животное) в свежеприготовленную (т.е. приготовленную непосредственно перед инокуляцией) стандартизированную суспензию C. albicans.
    3. Поместите мышей под седативные препараты в положение лежа на спине. Осторожно вытащите язык изо рта с помощью стерильных щипцов. Протирайте язык каждой мышки смоченным тампоном в течение 30 с. Наблюдайте за мышами до тех пор, пока они не оправятся от седации.
  7. На пятый день вводят дополнительную подкожную инъекцию преднизолона (100 мг/кг массы тела) для поддержания иммуносупрессии.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Этот протокол достаточен для сохранения инфекции в течение 7 дней после внутриротовой инокуляции. Временная шкала протокола показана на рисунке 2.

4. Антимикробная фотодинамическая терапия и восстановление C. albicans из поражений полости рта

  1. На седьмой день, перед началом лечения, обезболивают животных с помощью внутрибрюшинной инъекции кетамина гидрохлорида (100 мг/кг массы тела) в сочетании с ксилазином (10 мг/кг массы тела) (см. таблицу материалов).
  2. Поместите каждое животное в положение лежа на спине на подушечку 14,15, оснащенную проволокой из нержавеющей стали, которую можно обмотать вокруг резцов, чтобы рот оставался открытым.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Изотермические прокладки рекомендуются для согревания мышей во время их седативных препаратов, предотвращения гипотермии при комнатной температуре и предотвращения смертности, связанной с анестезией15. Каждое животное, находящееся под наркозом, должно находиться под наблюдением по отсутствию рефлекса отмены при защемлении пальцев ног для подтверждения глубины анестезии. При необходимости можно ввести одну поддерживающую дозу кетамина в размере 1/3 первоначальной дозы (без ксилазина).
  3. Отведя нижнюю челюсть и щеки, осторожно поместите язык за пределы рта.
  4. Для мышей из группы С+L+ пипетку 70 мкл ФС на спинку языка (в одной из тестируемых концентраций). Держите мышей в темном помещении в течение 20 минут в качестве периода предварительного облучения. Следите за тем, чтобы в течение этого времени язык каждого животного оставался в ротовой полости, чтобы предотвратить проглатывание фотосенсибилизатора (ФС).
  5. После периода фотосенсибилизации вытащите язык изо рта для освещения. Поместите светодиодное устройство на спинку язычка и зажгите при 37,5 Дж/см2 (7 мин с данным устройством) (Рисунок 3).
  6. Животным из группы С+L- пипетку 70 мкл ПС в одной из испытуемых концентраций на спинку языка и держать этих мышей в темноте в течение 27 мин.
  7. Для животных из группы C-L+ (обработанных светом без предварительной фотосенсибилизации) пипетку 70 мкл стерильного физиологического раствора на спинку языка. Держите мышей в темноте в течение 20 минут, а затем освещайте их языки при давлении 37,5 Дж/см2 (7 минут с данным устройством).
  8. Для мышей из группы С-L (не обработанных ФС и светом) пипетку 70 мкл стерильного физиологического раствора на спинку языка и держать в темноте в течение 27 мин.
  9. Извлечение C. albicans из языков всех мышей сразу после лечения. Промокните спинку языка в течение 1 мин стерильным ватным тампоном.
  10. Поместите каждый образец тампона в пробирку, содержащую 1 мл стерильного физиологического раствора, и встряхните его на 1 минуту, чтобы ресуспендировать микробные клетки.
  11. Немедленно выполняйте 10-кратное последовательное разведение в PBS и 25 мкл аликвот на планшетах SDA в двух экземплярах. Инкубируйте планшеты аэробно при 37 °C в течение 48 ч.
  12. Через 48 ч используйте цифровой счетчик колоний (см. Таблицу материалов) для определения количества дрожжевых колоний. Рассчитайте нагрузку C. albicans (КОЕ/мл) для каждого животного.
  13. Преобразуйте значения КОЕ/мл в log10 и выполните надлежащий анализ в соответствии с планом эксперимента и предположениями о данных.
    ПРИМЕЧАНИЕ: В настоящем исследовании использовались односторонний ANOVA Уэлча и post-hoc критерий Геймса-Хауэлла (α = 0,05)16 .

5. Гистопатологические анализы

  1. На восьмой день обезболивают мышей кетамином в дозе 100 мг/кг в сочетании с ксилазином в дозе 10 мг/кг путем внутрибрюшинной инъекции и усыпляют их при передозировке кетамина (200 мг/кг, вводимого внутрибрюшниально). Подтвердите смерть, проверив отсутствие дыхательных движений (апноэ) и сердцебиения (асистолия).
  2. Осторожно зажмите язык и вытащите его изо рта животного. С помощью ручного скальпеля сделайте разрез перед циркумваллярными сосочками, чтобы хирургическим путем удалить весь язык, не причиняя никаких травм передней и центральной областям.
  3. Зафиксируйте язык в 10% буферном формалине (рН 7,2-7,4) на 24 ч и промойте в проточной воде в течение 2 ч.
  4. Приступают к включению в процесс парафина: обезвоживанию, осветлению и пропитке10,14.
  5. Вырежьте серийные срезы (толщиной 5 мкм) с помощью микротома, затем прикрепите их к предметным стеклам. Приступают к окрашиванию этих срезов с помощью периодической кислоты-Шиффа и гематоксилина (PAS-H) для гистопатологического исследования и выявления грибов путем наблюдения под световым микроскопом.
  6. Попросите патологоанатома, желательно слепого к изучаемым группам, изучить реакцию тканей на инфекцию C. albicans .
  7. Описывают гистологические характеристики ткани (эпителия и соединительной ткани), особенности местных воспалительных реакций различной интенсивности.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Мышиная модель ОК показала типичные белые пятна и псевдомембраны на языке всех инфицированных мышей (рис. 4А). У C. albicans, полученных от C-L- животных, подтверждена колонизация тканей этим микроорганизмом (значения варьировали от 1,62 x 104 до 4,80 x 10,5 КОЕ/мл). Как и ожидалось, у животных из группы NCtr не было выявлено каких-либо изменений в тканях или роста колоний после отбора проб (рис. 4B).

ФД...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

C. albicans ассоциировался с инфекциями полости рта и пищевода у лиц с ослабленным иммунитетом, сахарным диабетом, длительным приемом антибиотиков и плохой гигиеной полости рта 1,3. Изучение инфекционных заболеваний человека требует исследований как in vitro, так и in vivo, прежде чем можно будет безопасно и точно спланировать клинические испытания. В настоящем исследовании описан метод создания мышиной модели ОК, который может быть исп...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Благодарности

Авторы благодарят за финансовую поддержку FAPESP (Исследовательский фонд Сан-Паулу, номер процесса FAPESP #2013/07276-1 (CePID CePOF) и 2008/00601-6. Мы также благодарим доктора Ану Паулу Сильва за предоставленную информацию о водорастворимой соли на основе CUR.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
C. albicansATCC (Роквилл, штат Мэриленд, США)90028для посева Candida
 Eppendorf  Центрифуга 5804/5804R,B. Braun, Мельзунген, Гессен, Германия022628146 (NA)Candida inoculum
2 мг/млCompounding pharmacy, Araraquara, SP, Бразилия -   Используется для успокоения животных во время инокуляции от кандидоза
Водорастворимая соль на основе куркуминаPDTPharma, Cravinhos, Бразилия - Состоит на 53,4% из натурального куркумина, и на 46,6% из других куркуминоидов (деметоксикуркумин и бис-деметоксикуркумин). Приготовлен в воде и N-метилD-глюкамине (конечная средняя молекулярная масса 730,32 г.моль&минус; 1)
Цифровой счетчик колонийCP 600 Plus, Phoenix Ind Com Equipamentos Cient; ficos Ltda, Araraquara, SP, Бразилия - Используется для подсчета колоний на агаровых пластинах
Экструдированный мышиный кормBenelab food, Industry Qualy Animal Nutrition and Commerce Ltda., Lindó ia, Sã o Штат Паулу, Бразилия. -Используется для кормления мышей
Кетамина гидрохлорид 10%Ketamina Agener, Uniã o Quí слюда Farmacê utica Nacional S/A, Embu-Guaç u, SP, Бразилия - Используется для обезболивания животных перед процедурами и для эвтаназии
Светодиодный наконечник (прототип)Instituto de Fí sica de Sã o Карлос, Университет Sã o Paulo, Sã o Карлос, СП, Бразилия - Изготовлено с использованием LXHL-PR09, излучателя Luxeon III, Lumileds Lighting, Сан-Хосе, Калифорния, США
Метилпреднизолона ацетат 40 мгДЕПО-МЕДРОЛ, Pfizer, Нью-Йорк - Используется в качестве иммунодепрессанта
МикротомLeica  Microsystems, Бэннокберн, Иллинойс, СШАSM2500Используется для резки серийных секций язычков
Ящики из пропилена (корпус каркаса) H13 x L20 x D30 смBonther Equipaments, Ribeirã o Preto, SP, Бразилия - Используется для содержания животных на протяжении всего экспериментального периода
Сабуро Декстроза Агар с хлорамфениколомHiMedia, Мумбаи, ИндияMM1067-500GКультуральная среда для роста дрожжей (агар)
СпектрофотометрСпектрофотометр Спектрофотометр Kasvi K37-VIS, Sã o José dos Pinhais, PR, БразилияK37-VIS Используется для нормализации концентрации инокулята
Тетрациклина гидрохлорид Аптека по производству рецептурных препаратов, Araraquara, SP, Бразилия - Антибиотик, назначаемый для стимуляции дисбактериоза полости рта
Древесная стружкаJ.R. Древесная стружка, Comerce of Sawdust Ltda., Conchal, Sã o Штат Паулу, Бразилия-Используется для напольного покрытия внутри жилых коробок
Xylazine 2%Calmiun, Uniã o Quí слюда Farmacê utica Nacional S/A, Embu-Guaç u, SP, Бразилия - Используется в сочетании с кетамином для анестезии
Дрожжевой азотный бульон Difco, InterLab, Детройт, Мичиган, СШАDF0919-07-3 Питательная среда для роста дрожжей (бульон)
Отвар пептона декстрозы дрожжейNutriSelect Basic, Sigma AldrichY1375Питательная среда для поддержания штаммов при -80°С; C и расти
Используется для приготовления центрифуги Используется для приготовления хлорпромазина хлорида

Ссылки

  1. Vila, T., Sultan, A. S., Montelongo-Jauregui, D., Jabra-Rizk, M. A. Oral candidiasis: a disease of opportunity. Journal of fungi (Basel, Switzerland). 6 (1), 15(2020).
  2. Sudbery, P. E. Growth of Candida albicans hyphae. Nature Reviews Microbiology. 9 (10), 737-748 (2011).
  3. Moyes, D. L., Richardson, J. P., Naglik, J. R. Candida albicans-epithelial interactions and pathogenicity mechanisms: scratching the surface. Virulence. 6 (4), 338-346 (2015).
  4. Lopes, J. P., Lionakis, M. S. Pathogenesis and virulence of Candida albicans. Virulence. 13 (1), 89-121 (2022).
  5. Quindós, G., et al. Therapeutic tools for oral candidiasis: Current and new antifungal drugs. Medicina oral, patologia oral y cirugia buccal. 24 (2), e172-e180 (2019).
  6. Nishimoto, A. T., Sharma, C., Rogers, P. D. Molecular and genetic basis of azole antifungal resistance in the opportunistic pathogenic fungus Candida albicans. Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 75 (2), 257-270 (2020).
  7. Gholami, L., Shahabi, S., Jazaeri, M., Hadilou, M., Fekrazad, R. Clinical applications of antimicrobial photodynamic therapy in dentistry. Frontiers in Microbiology. 13, 1020995(2013).
  8. Trigo-Gutierrez, J. K., Vega-Chacón, Y., Soares, A. B., Mima, E. G. O. Antimicrobial activity of curcumin in nanoformulations: a comprehensive review. International Journal of Molecular Sciences. 22 (13), 7130(2021).
  9. Santezi, C., Reina, B. D., Dovigo, L. N. Curcumin-mediated Photodynamic Therapy for the treatment of oral infections-A review. Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. 21, 409-415 (2018).
  10. Dovigo, L. N., et al. Curcumin-mediated photodynamic inactivation of Candida albicans in a murine model of oral candidiasis. Medical Mycology. 51 (3), 243-251 (2013).
  11. Zangirolami, A. C., Carbinatto, F., Filho, J. D. V., Bagnato, V. S., Blanco, K. C. Impact of light-activated curcumin and curcuminoids films for catheters decontamination. Colloids and SurfacesB: Biointerfaces. 213, 112386(2022).
  12. Santezi, C., Tanomaru, J. M., Bagnato, V. S., Júnior, O. B., Dovigo, L. N. Potential of curcumin-mediated photodynamic inactivation to reduce oral colonization. Photodiagnosis Photodynamic Therapy. 15, 46-52 (2016).
  13. Takakura, N., et al. A novel murine model of oral candidiasis with local symptoms characteristic of oral thrush. Microbiology and immunology. 47 (5), 321-326 (2003).
  14. Mima, E. G., et al. Susceptibility of Candida albicans to photodynamic therapy in a murine model of oral candidosis. OralSurgery, Oral Medicine, Oral Pathology, Oral Radiology and Endodontology. 109, 392-401 (2010).
  15. Solis, N. V., Filler, S. G. Mouse model of oropharyngeal candidiasis. Nature Protocol. 7 (4), 637-642 (2012).
  16. Marôco, J. Análise Estatística com o SPSS Statistics 25. , ReportNumber 7th ed, Lisboa, Portugal. (2018).
  17. Naglik, J. R., Fidel, P. L. Jr, Odds, F. C. Animal models of mucosal Candida infection. FEMS Microbiology Letters. 283 (2), 129-139 (2008).
  18. Samaranayake, Y. H., Samaranayake, L. P. Experimental oral candidiasis in animal models. Clinical Microbiology Reviews. 14, 398-429 (2001).
  19. Chamilos, G., Lionakis, M. S., Lewis, R. E., Kontoyiannis, D. P. Role of mini-host models in the study of medically important fungi. The Lancet Infectious Diseases. 7, 42-55 (2007).
  20. Carmello, J. C., et al. Treatment of oral candidiasis using Photodithazine- mediated photodynamic therapy in vivo. PLoS One. 11 (6), e0156947(2016).
  21. Sakima, V. T., et al. Antimicrobial photodynamic therapy mediated by curcumin-loaded polymeric nanoparticles in a murine model of oral candidiasis. Molecules. 23 (8), 2075(2018).
  22. Abe, S., et al. A glucocorticoid antagonist, mifepristone affects anti-Candida activity of murine neutrophils in the presence of prednisolone in vitro and experimental candidiasis of prednisolone-treated mice in vivo. FEMS Immunology and Medical Microbiology. 13 (4), 311-316 (1996).
  23. Jones, J. H., Russell, C., Young, C., Owen, D. Tetracycline and the colonization and infection of the mouths of germ-free and conventionalized rats with Candida albicans. Journal Antimicrobial Chemotherapy. 2 (3), 247-253 (1976).
  24. Russell, C., Jones, J. H. Effects of oral inoculation of Candida albicans in tetracycline-treated rats. Journal of Medical Microbiology. 6 (3), 275-279 (1973).
  25. Teichert, M. C., Jones, J. W., Usacheva, M. N., Biel, M. A. Treatment of oral candidiasis with methylene blue- mediated photodynamic therapy in an immunodeficient murine model. OralSurgery, Medicine, Pathology, Radiology and Endodontology. 93, 155-160 (2002).
  26. Totti, M. G. A., Santos, E. B., Almeida, O. P., Koga-Ito, C. Y., Jorge, A. O. C. Oral candidosis by Candida albicans in normal and xerostomic mice. Brazilian Oral Research. 18, 202-207 (2004).
  27. Hidalgo, K. J. R., et al. Antimicrobial photodynamic therapy in combination with nystatin in the treatment of experimental oral candidiasis induced by Candida albicans resistant to fluconazole. Pharmaceuticals (Basel). 12 (3), E140(2019).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Candida albicans
Куркуминоид-опосредованная антимикробная фотодинамическая терапия на мышиной модели кандидоза полости рта
Свяжитесь с нами
Рекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

Авторские права © 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.