Методическая статья

Микробиологическая экспресс-оценка легочных инфекционных заболеваний на месте

DOI:

10.3791/66059

⸱

1 марта 2024 г.

 ,  ,  ,  , 
1Department of Emergency and the Intensive Care Unit, Chongqing Hospital of Traditional Chinese Medicine, 2Department of Critical Care Medicine, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 3Respiratory and critical care, Chongqing Hospital of Traditional Chinese Medicine

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Приведенный здесь протокол демонстрирует быстрый и стандартизированный рабочий процесс микробиологической экспресс-оценки на месте (M-ROSE), включающий три этапа: изготовление предметного стекла, окрашивание и интерпретация. Этот протокол поможет врачам быстро принимать клинические решения.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Своевременное начало эмпирической противоинфекционной терапии имеет решающее значение у пациентов с необъяснимой легочной инфекцией. Несмотря на то, что получение визуальных изображений в клинической практике является относительно простым процессом, его недостаточная специфичность часто требует проведения дополнительных трудоемких тестов, таких как бактериологическое исследование мокроты, культура бронхоальвеолярной жидкости или генетическое секвенирование для точного определения основной этиологии заболевания. Кроме того, ограниченная эффективность эмпирического противоинфекционного лечения может способствовать неправильному использованию антибиотиков. Последние достижения в интерпретации микробного фона на предметных стеклах с помощью экспресс-оценки на месте (ROSE) позволили клиницистам быстро получать образцы с помощью бронхоскопии (например, альвеолярного лаважа, чистки слизистой оболочки, зажима тканей), облегчая окрашивание у постели больного и интерпретацию, которая предоставляет важную информацию о микробиологическом фоне. Таким образом, это создает основу для разработки таргетного противоинфекционного лечения и индивидуальных планов лекарственной терапии. Благодаря лучшему пониманию того, какие патогены вызывают инфекции в режиме реального времени, врачи могут избежать ненужных антибиотиков широкого спектра действия, способствующих устойчивости к антибиотикам. Создание быстрого и стандартизированного рабочего процесса M-ROSE в отделениях респираторной медицины или отделениях интенсивной терапии значительно поможет врачам в формулировании точных стратегий лечения пациентов, что имеет значительные клинические последствия.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Метод экспресс-оценки на месте (ROSE) является высокоэффективным методом, используемым в области лечения легочных заболеваний. Он позволяет проводить отбор проб и диагностическое вмешательство в режиме реального времени, облегчая немедленный цитологический анализ1. Этот инновационный подход заключается в нанесении части образца ткани на предметное стекло с сохранением его целостности. Одно из ключевых преимуществ ROSE заключается в его способности способствовать оперативной интерпретации клинической информации с помощью специализированных методов микроскопии. Это включает в себя анализ морфологии клеток, классификацию, количественную оценку, определение соотношений компонентов, оценку расположения, корреляционный анализ, оценку фона и идентификацию инородных объектов. Интегрируя все эти данные с клинической информацией пациента, ROSE играет ключевую роль в оценке адекватности выборки и руководстве интервенционными процедурами и методами в режиме реального времени2.

Являясь дочерней компанией технологии ROSE, технология M-ROSE в первую очередь фокусируется на получении микробиологического фона поражений-мишеней, а не на различении доброкачественных и злокачественных клеток 3,4. С одной стороны, M-ROSE позволяет микроскопически идентифицировать патогены, такие как Aspergillus, Cryptococcus, Pneumocystis и Candida5. С другой стороны, он имеет существенное руководящее значение для оценки качества респираторных образцов, проведения различия между инфекционными и неинфекционными заболеваниями, проведения различия между инфекцией и загрязнением, а также оценки тяжести инфекции и прогноза 6,7. Например, в респираторном образце сосуществование бактерий, демонстрирующих идентичную морфологию, наряду с инфильтрирующими воспалительными клетками, указывает на инфекцию; И наоборот, присутствие множественных морфологически разнообразных бактерий, сопровождающихся эпителиальными клетками, предполагает заражение. Способность всесторонне анализировать клиническую информацию и прогнозировать исходы делает M-ROSE бесценным инструментом в лечении легочных заболеваний.

В заключение следует отметить, что РОЗА является важнейшим цитологическим носителем, который значительно повышает эффективность и точность диагностики заболеваний легких. Его многогранные возможности способствуют улучшению результатов лечения пациентов, обеспечивая своевременное вмешательство и облегчая точную диагностику с помощью методов отбора проб в режиме реального времени и диагностического вмешательства. Однако важно отметить, что эти достижения зависят от получения квалифицированных образцов. В данной работе мы представляем стандартизированный протокол M-ROSE, охватывающий подготовку предметного стекла, методы окрашивания и рекомендации по интерпретации. Этот протокол служит бесценным справочным материалом для врачей при составлении точных планов оценки и лечения, а также облегчает принятие решений относительно последующей работы с целевыми образцами.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Клиническое исследование было одобрено Комитетом по утверждению Чунцинской больницы традиционной китайской медицины (No 2022-ky-31). В типичном случае речь шла о пациенте с диагнозом пневмоцистная пневмония, и от пациента было получено информированное согласие.

1. Требования к оборудованию и материалам для ROSE

  1. Оборудование: Обратитесь к файлу Table of Materials для сведения об оборудовании, используемом в этом протоколе.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Использование специализированного цитологического микроскопа и системы графической визуализации является обязательным условием (Рисунок 1A).
  2. Подготовка материала (см. Таблицу материалов).
    1. Приготовьте стерильные предметные стекла для клеточных культур (с сильной клеточной адгезией), абсорбирующую бумагу, неопудренные латексные перчатки, одноразовые иглы для шприцев объемом 2,5-5 мл и поместите полный набор растворов для окрашивания Diff Quik (DQ) в стеклянные банки для окрашивания с герметичными крышками для удобства работы (рис. 1).

2. Рабочий процесс M-ROSE

  1. Подготовка цитологических стекол
    ПРИМЕЧАНИЕ: Существует множество способов подготовки слайдов, и ниже приведены несколько наиболее часто используемых методов подготовки.
    1. Роликовые горки
      ПРИМЕЧАНИЕ: Обеспечьте минимальную потерю образца ткани во время этого процесса.
      1. Извлеките частички ткани с помощью одноразовой иглы для шприца емкостью 2,5-5 мл (рисунок 2А).
      2. Распределите круглую область, приблизительно 1 см в диаметре и умеренной толщины, от внутреннего до внешнего участка в одну треть окрашенного конца (конец с сильным прикреплением клеток) на стерильном цитологическом предметном стекле.
    2. Слайды для кистей
      ПРИМЕЧАНИЕ: Этот метод применим к образцам, полученным с использованием обычных клеточных щеток, клеточных щеток для защиты от загрязнения или ультратонких клеточных щеток, а также к полужидким образцам, таким как мокрота и вязкие жидкости организма.
      1. Выдвиньте головку кисти и нанесите ее на дистальную треть стерильного цитологического предметного стекла (предметное стекло обладает сильными свойствами клеточной адгезии) для получения прямоугольной области размером около 2 см х 1 см с умеренной толщиной.
    3. Горки для распыления
      1. Расположите пункционную иглу на одной трети окрашенного конца стерильного цитологического предметного стекла с надежной клеточной адгезией.
      2. Надавите воздухом на кончик иглы для пирсинга и введите его с внутренней стороны наружу, образуя круглую область средней толщины диаметром примерно 1 см.
  2. Окрашивание цитологическим стеклом
    ПРИМЕЧАНИЕ: Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) рекомендует быстрое окрашивание цитологического стекла ROSE с использованием красителя Diff5. Дифференциальный краситель можно использовать повторно, но не повторять много раз. Если есть осадок, его следует процедить после использования. Слишком глубокое окрашивание может быть должным образом обесцвечено метанолом или спиртом, желательно уже не окрашенным. Если крашение слишком глубокое или слишком мелкое, время окрашивания или концентрацию рабочей жидкости следует отрегулировать; значение pH оказывает определенное влияние на окрашивание, а предметное стекло должно быть чистым и не загрязненным кислотами и щелочами. Оба раствора Diff A и Diff B являются летучими и должны быть запечатаны и храниться после использования.
    1. Погрузите предметное стекло в раствор Diff A на 10-30 с (Рисунок 2B), затем промойте его в ванне с красителем PBS, чтобы удалить излишки раствора Diff A, и аккуратно стряхните остатки буфера (Рисунок 2C).
    2. Далее погрузите предметное стекло в раствор Diff B на 20-40 с (рисунок 2E).
    3. Наконец, очистите предметное стекло в резервуаре для окрашивания водой (Рисунок 2F), промокните и протрите остатки жидкости предметного стекла впитывающей бумагой (Рисунок 2D) и завершите окрашивание.
      Примечание: M-ROSE обеспечивает прямую визуализацию патогенных микроорганизмов и облегчает оценку качества образца из дыхательных путей, позволяя различать инфекцию и неинфекцию, а также инфекцию и заражение, что имеет решающее значение для оценки тяжести инфекции и прогноза. Этот аспект будет рассмотрен в разделе обсуждения, так как он не включает в себя никаких экспериментальных процедур.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В типичном случае 63-летний мужчина обратился в больницу с кашлем, лихорадкой и болью в груди. Ранее у пациента был диагностирован нефротический синдром, характеризующийся протеинурией и отеком, и в течение длительного времени он получал лечение преднизолоном и такролимусом. Первоначальные лабораторные данные показали количество лейкоцитов 10,49 x 109/л, количество нейтрофилов 8,87 x 109/л, концентрации С-реактивного белка в цельной крови и (1-3)-β-D-глюкана 155,81 мг/л и 249,7 пг/мл. Компьютерная томография (КТ) грудной клетки показала помутнение по типу матового стекла с диффузным, двусторонним и центральным расположением (рис. 3A). Первоначальное противоинфекционное лечение цефоперазона тазобактамом оказалось неэффективным, и его симптомы усугублялись сердечной усталостью, одышкой и одышкой после физической нагрузки; повторная компьютерная томография не показала значительного улучшения (Рисунок 3B). Затем пациента перевели в отделение интенсивной терапии (ОИТ) для проведения искусственной вентиляции легких и провели бронхоскопию. Доступ к фокусному отбору проб осуществлялся под руководством виртуальной навигации, и были собраны три образца биопсии щипцов (рис. 4). Для немедленной микроскопической оценки ткани был доступен метод ROSE, и диагноз Pneumocystis jiroveci был подтвержден (Рисунок 5A). Пациент немедленно получил противогрибковое лечение сульфаметоксазолом (1,92 г, каждые 6 часов); последующее окрашивание (Рисунок 5B-E) подтвердило этот диагноз. Тем не менее, повторная компьютерная томография по-прежнему не показала значительного улучшения (Рисунок 3C). Пациент получал карбофунгин (в первый день 70 мг, затем 50 мг в день), метилпреднизолон (80 мг в день) и иммуноглобулин (10 г в день) для лечения грибковой инфекции. Симптомы были быстро облегчены, и пациентка продолжила последующее лечение.

figure-results-1
Рисунок 1: Оборудование и материалы. (А) Цитологический микроскоп и система графической визуализации. (B) Раствор для окрашивания Diff Quik (DQ) A. (C) Раствор для окрашивания Diff Quik (DQ) B. (D) Неопудренные латексные перчатки. (E) Стерильные предметные стекла для клеточных культур. (F) Одноразовые иглы для шприцев объемом 2,5-5 мл. (G) Абсорбирующая бумага. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

figure-results-2
Рисунок 2: Рабочий процесс M-ROSE. (А) Печать слайда. (B) Погрузите предметное стекло в раствор Diff A на 10-30 с. (C) Промойте предметное стекло в ванне с красителем PBS, чтобы удалить излишки раствора Diff A. (D) Промокните и сотрите остатки жидкости со предметного стекла впитывающей бумагой. (E) Погрузите предметное стекло в раствор Diff B на 20-40 с. (F) Очистите предметное стекло в баке для окрашивания водой. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

figure-results-3
Рисунок 3: Снимки компьютерной томографии грудной клетки. (A) При поступлении. (B) В день перевода в отделение интенсивной терапии. (C) После лечения сульфаметоксазолом Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

figure-results-4
Рисунок 4: Локализация заднего базального сегмента нижней доли правого легкого с помощью VBN. (A) Правый главный бронх. (В) Правый средний бронх. (В) Задний базальный сегмент бронха нижней доли правого легкого. (D) 3D-карта VBN. (E) Корональная карта КТ грудной клетки. (F) Аксиальная карта КТ грудной клетки. (G) Сагиттальная карта КТ грудной клетки Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

figure-results-5
Рисунок 5: Фотографии, документирующие появление пневмоциста при различных методах окрашивания. (A) ROSE 100 x 10; Белая стрелка: цисты, содержащие аскоспоры. (В) Гематоксилин и эозин (Н-Е), 60 х 10. (C) Алькийский синий, 60 x 10. (D) GIEMSA, 40 x 10. (Д) Гексамин, серебро, 20 х 10. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Интервенционная пульмонология является ценным направлением современных респираторных заболеваний; В частности, он нашел широкое применение в диагностике заболеваний легких 8,9. В последние годы диагностическая интервенционная пульмонология процветает в связи с увеличением распространенности злокачественных опухолей легких, увеличением числа лекарственно-устойчивых патогенных инфекций, возникающих в нижних дыхательных путях, и запросами на диагностику сложных и критических респираторных заболеваний 10,11,12. Эффективность интервенционной диагностики зависит от таких факторов, как размер и анатомическое расположение очаговых областей, частота осложнений и количество мест биопсии, а также основные заболевания, что способствует клиническому использованию многочисленных передовых технологий и средств13. ROSE привлек к себе значительное внимание и быстро превратился в «метод сопровождения в реальном времени» для диагностики в интервенционной пульмонологии.

ROSE предназначен для быстрой оценки, предварительной диагностики и определения приоритетности удовлетворенности образца во время таких процедур, как пункция, биопсия и чистка зубов. Он обеспечивает обратную связь для руководства последующим технологическим прогрессом 14,15,16,17. M-ROSE, подразделение ROSE, в первую очередь фокусируется на оценке микробного фона, а не на оценке злокачественности клеток тканей5. Метод M-ROSE является скорее методом быстрой оценки, чем диагностическим инструментом, поэтому его диагностическую эффективность не следует преувеличивать. Его клиническое применение в первую очередь охватывает следующие аспекты: визуальная идентификация определенных патогенных микроорганизмов, дифференциация инфекции и заражения, а также различение инфекции и неинфекции7.

После быстрого окрашивания клеточное ядро ткани имело пурпурно-красный оттенок, в то время как цитоплазма имела голубовато-фиолетовый цвет. Бактерии и грибы выглядели голубыми, что приводило к отчетливому контрасту между клетками тканей и патогенами7. M-ROSE может продемонстрировать определенный уровень возможностей в идентификации бактерий и грибков. В частности, он демонстрирует высокий уровень положительных результатов в отношении Aspergillus, cryptococcus, Pneumocystis jiroveci и других грибов 3,18. Тем не менее, он имеет ограничения, когда дело доходит до распознавания патогенов с малым объемом и диаметром или внутриклеточных патогенных агентов. Важно подчеркнуть, что диагноз любого заболевания должен основываться на комплексной оценке, охватывающей основное состояние пациента, клинические проявления, визуализирующие обследования и другие факторы, а не только на микроскопическую идентификацию патогенных микроорганизмов.

M-ROSE также предлагает преимущества в идентификации инфекции и загрязнения, например, при оценке качества образцов жидкости альвеолярного лаважа. В отделениях, где позволяют условия, оценка жидкости для промывания у постели больного может быть проведена с помощью центрифугирования и окрашивания. Квалифицированные образцы жидкости альвеолярного лаважа показывают, что доля плоскоклеточных клеток среди всех клеток (за исключением эритроцитов) при микроскопии низкой мощности составляет менее 1%, столбчатых эпителиальных клеток — менее 5%, а эритроцитов — менее 10% (без учета факторов, связанных с травмой или кровотечением)19. Микроскопическое исследование цитологического фона поможет нам своевременно провести оценку.

Кроме того, M-ROSE может помочь в различении инфицированных и неинфицированных поражений5. При инфицированных поражениях часто происходит инфильтрация нейтрофилов, макрофагов и лимфоцитов воспалительными клетками, с редким наблюдением фагоцитоза нейтрофилов. И наоборот, у неинфицированных поражений обычно отсутствует воспалительная клеточная инфильтрация.

Представленный здесь протокол демонстрирует процесс работы M-ROSE; С помощью интерпретации микробиологического фона можно поставить предварительный диагноз или сузить дифференциальный диагноз. Как показывают наши результаты, для постановки диагноза ПП необходимы подтвержденные доказательства Pneumocystis jiroveci, которые не должны основываться на клинических проявлениях и визуализации, даже у симптоматических пациентов с высоким риском. Микроскопическая идентификация аскус и трофических форм является наиболее интуитивным доказательством. Эффективность диагностики во многом определяется методом окрашивания образца. Исторически сложилось так, что обычные красители, такие как красители Райта-Гимзы, гексааминовое серебро и толуидиновый синий, доступны для PCP, но требуют много времени и имеют меньшую чувствительность. В этом случае непосредственный диагноз ПЦП был подтвержден в первые сутки перевода пациента в отделение интенсивной терапии с применением РОЗА. Diff-quick показал свое преимущество в выявлении пневмоцистиса, характеризующегося четкой структурой, резким контрастом и легкой идентификацией аскуса (рис. 5А).

В применении этнической медицины РОЗА также имеет значительное значение. Например, при гнойных заболеваниях клиницисты могут идентифицировать разнообразный спектр воспалительных клеток, преимущественно с преобладанием нейтрофилов в микробиологическомфоне. Следовательно, в качестве потенциальных средств для лечения этих состояний могут быть выбраны препараты с очищающими от тепла и детоксикационными свойствами, такие как жимолость, одуванчик и патриния.

Поскольку ROSE является дополнительной программой, которую не обязательно выбирать в интервенционной пульмонологии, проведение ROSE неизбежно приведет к увеличению трудовых и экономических затрат. Можно поспорить с тем, что ROSE следует использовать на регулярной основе. С точки зрения экономических выгод, нас беспокоят временные и трудовые затраты. Основная дополнительная потребность в рабочей силе – это оценщик. Оценка ROSE может быть выполнена цитотехнологом, патологоанатомом или клиницистом. Цитотехнологи являются наиболее вероятным персоналом для проведения процедуры ROSE. Однако в клинической практике клиницисты заменяют эту роль, но для этого может потребоваться определенная учебнаябаза15. Предыдущее исследование показало, что программа обучения может помочь повысить точность оценки адекватности, выполняемой клиницистами, и устранить искажающие переменные. Кроме того, M-ROSE, как метод морфологической диагностики, имеет субъективные факторы в отчете о результатах. Клиницисты должны провести всестороннюю оценку на основе дополнительной клинической информации.

Мы рекомендуем больницам с соответствующим оборудованием и обученными специалистами рассмотреть возможность внедрения процедуры ROSE в своих респираторных отделениях или отделениях интенсивной терапии, поскольку это может способствовать ранней оценке сложных респираторных критических заболеваний и эффективному руководству клиническим лечением.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы не сообщают о конфликте интересов.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Мы благодарны Чунцинскому научно-исследовательскому институту за финансовую поддержку в рамках проекта по стимулированию и ориентации результатов деятельности (jxyn-2021-1-15 и jxyn-2021-2-6).

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Цитологический микроскопOlympus CorporationCX43
Diff Quik (DQ) окрашивающие растворыBesso Biotechnology Co. LTDG1541
Одноразовые иглы для шприцев 2,5-5 млShandong Zhu Pharmaceutical Group20183150304
Неопудренные латексные перчаткиHenan Yadu Industrial Co., LTD20182140728
Sterile cell культура горкиJinan Preret промышленность и торговля Co., LTD7101

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Zhang, S., et al. Diagnostic value of endoscopic ultrasound-guided fine needle aspiration with rapid on-site evaluation performed by endoscopists in solid pancreatic lesions: A prospective, randomized controlled trial. J Gastroenterol Hepatol. 37 (10), 1975-1982 (2022).
  2. Bruno, P., et al. Efficacy and cost effectiveness of rapid on site examination (ROSE) in management of patients with mediastinal lymphadenopathies. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 17 (11), 1517-1522 (2013).
  3. Li, T., et al. Microbiology rapid on-site evaluation: a better method for Mucoid Pseudomonas Aeruginosa diagnosis in bronchiectasic patients. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 26 (5), 1738-1742 (2022).
  4. Tao, Y., et al. Application of microbiological rapid on-site evaluation in respiratory intensive care units: a retrospective study. Ann Transl Med. 10 (1), 7(2022).
  5. Yan, P., et al. The value of microbiology rapid on-site evaluation of sepsis caused by pulmonary infection. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 27 (12), 5862-5868 (2023).
  6. Muri, R., Trippel, M., Borner, U., Weidner, S., Trepp, R. The impact of rapid on-site evaluation on the quality and diagnostic value of thyroid nodule fine-needle aspirations. Thyroid. 32 (6), 667-674 (2022).
  7. Wang, Z., Shi, Y. Application of rapid on-site evaluation in contemporary pediatric interventional respiratory diseases. Chinese Journal of Practical Pediatrics. 12, 470-475 (2019).
  8. Shah, P. L., Herth, F. J. F. Progress in interventional pulmonology. Respiration. 95 (5), 287-288 (2018).
  9. Hsia, D., Musani, A. I. Interventional pulmonology. Med Clin North Am. 95 (6), 1095-1114 (2011).
  10. Moore, A. J., Mercer, R. M., Musani, A. I. Advances in interventional pulmonology. Clin Chest Med. 39 (1), 271-280 (2018).
  11. Majid, A., Fernandez-Bussy, S., Folch, E. Interventional pulmonology and solitary pulmonary nodule. Arch Bronconeumol. 54 (10), 497-498 (2018).
  12. Ali, M. S., Sorathia, L. Palliative care and interventional pulmonology. Clin Chest Med. 39 (1), 57-64 (2018).
  13. Czarnecka, K., Yasufuku, K. Interventional pulmonology: focus on pulmonary diagnostics. Respirology. 18 (1), 47-60 (2013).
  14. Schacht, M. J., et al. Endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration: performance of biomedical scientists on rapid on-site evaluation and preliminary diagnosis. Cytopathology. 27 (5), 344-350 (2016).
  15. Pearson, L., et al. Rapid on-site evaluation of fine-needle aspiration by non-cytopathologists: A systematic review and meta-analysis of diagnostic accuracy studies for adequacy assessment. Acta Cytol. 62 (4), 244-252 (2018).
  16. Arimura, K., et al. Cryobiopsy with endobronchial ultrasonography using a guide sheath for peripheral pulmonary lesions and DNA analysis by next generation sequencing and rapid on-site evaluation. Respir Investig. 57 (2), 150-156 (2019).
  17. Gianella, P., et al. Utility of rapid on-site cytologic evaluation during endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration in malignant and nonmalignant disease. Acta Cytol. 62 (5-6), 380-385 (2018).
  18. Natella, V., Cozzolino, I., Sosa Fernandez, L. V., Vigliar, E. Lymph nodes fine needle cytology in the diagnosis of infectious diseases: clinical settings. Infez Med. 20, 12-15 (2012).
  19. Baughman, R. P., Spencer, R. E., Kleykamp, B. O., Rashkin, M. C., Douthit, M. M. Ventilator associated pneumonia: quality of nonbronchoscopic bronchoalveolar lavage sample affects diagnostic yield. Eur Respir J. 16 (6), 1152-1157 (2000).
  20. Petrone, M. C., et al. Does cytotechnician training influence the accuracy of EUS-guided fine-needle aspiration of pancreatic masses. Dig Liver Dis. 44 (4), 311-314 (2012).

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

ROSEDiff Quik

Похожие статьи