Этот протокол предоставляет техническую информацию о реконструкции сосудов с использованием метода манжеты при ортотопической трансплантации печени мышей.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Сосудистая реконструкция с помощью манжеты при ортотопической трансплантации печени мышей
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Ортотопическая трансплантация печени мышей является эффективной методологией исследования основных механизмов ишемии печени и реперфузионного повреждения. Однако технические проблемы создают препятствие для использования этой ценной экспериментальной модели и передачи этих навыков следующему поколению. Наиболее сложным аспектом этой процедуры является реконструкция сосудов, включая воротную вену (ЛВ), подпеченочную нижнюю полую вену (IHIVC) и надпеченочную нижнюю полую вену. Использование пластиковых манжет, а не швов, позволяет проводить более гладкую реконструкцию PV и IHIVC. Сосуды реконструируются путем прикрепления манжеты, изготовленной из внутривенного катетера, к кончику сосуда трансплантата и введения манжеты в сосуд-реципиент. Два наиболее важных аспекта - это правильная визуализация внутреннего просвета сосуда и избегание чрезмерного применения силы. Наша цель - предоставить технический обзор сосудистых реконструкций с использованием техники манжеты в хирургии реципиента. Ожидается, что эти технические советы по технике манжеты помогут микрохирургам облегчить реконструкцию сосудов и продвинуть свои исследования.
Введение
Ортотопическая трансплантация печени мышей (МОЛТ) является эффективным экспериментальным методом, впервые описанным в 1991году. Эта экспериментальная модель, в которой используются генетически модифицированные мыши и различные исследовательские реагенты, сыграла ключевую роль в исследовании теплой и холодной ишемии и реперфузионных повреждений. Однако высокая техническая сложность модели препятствовала развитию фундаментальной медицины для трансплантации печени2. MOLT включает в себя три основных этапа: (1) извлечение печени у мыши-донора, (2) операция на спинном столе и (3) имплантация печени реципиенту. Среди этих реци....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Протокол эксперимента был одобрен Комитетом по экспериментам на животных в Киотском университете. В исследовании использовались мыши C57BL/6 в возрасте более 10 недель и массой от 25 г до 30 г, полученные из коммерческого источника (см. Таблицу материалов). Все животные были обезболены 2,5% изофлураном (в соответствии с институционально утвержденными протоколами), содержались в определенных условиях, свободных от патогенов, и все экспериментальные процедуры проводились в соответствии с Правилами экспериментов на животных Киотского университета. Соответствующие инструменты, использованные для исследования, перечислены в таблице материалов
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Реконструкция ЛВ успешна, когда при разжатии воротной вены нет извитости, а печень равномерно перфузируется. Внутрипеченочное время должно быть менее 20 минут, так как печеночное время, превышающее 25 минут, увеличивает риск смертности мышей. Реконструкция IHIVC считается успешной, если нет регургитации крови из трансплантата.
Хранение трансплантата при низких температурах в течение 1 ч с использованием органосохраняющего раствора приводит к тому, что уровень аланинаминотрансферазы в сыворотке.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Изучение сосудистой реконструкции является наиболее сложным аспектом достижения успешного MOLT. Качество манжеты существенно влияет на сложность реконструкции, учитывая небольшой размер мышей5. В этой статье представлен подробный протокол подготовки, прикрепления и реконструкции манжеты.
Хотя нет существенных отличий от предыдущих отчетов в отношении подготовки манжеты и соединения 2,5, следует учитывать некотор.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Ни у одного автора нет конфликта интересов, который можно было бы раскрыть.
Благодарности
Эта работа была поддержана фундаментальным исследованием JST 2022 года (Японское общество трансплантологии).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 16 г внутривенный катетер | TERUMO | SR-FF2032 | манжета IHIVC |
| 20 г внутривенный катетер | TERUMO | SR-FF1651 | PV манжета |
| 8-0 тесьма шелк | Natsume Seisakusho | CR9-80B2 | 8-0 шелк |
| Belzer UW Cold Storage Solution | Astellas | Жидкость для сохранения органов | |
| Бульдог зажим | B BRAUN | FB329R | Бульдог зажим |
| C57BL/6 мышей | Oriental Bio Service | ||
| Isoflurane ингаляционный раствор | Viatris | Anesthesic | |
| Micro Blunted Tips 0,1 мм x 0,06 мм | F.S.T | 11253-20 | Прямой микрощипцы |
| Аппликатор с зажимом Micro Serrefine с замком | F.S.T | 18056-14 | Аппликатор зажимов для сосудов |
| Micro Serrefines | F.S.T | 18055-4 | Зажим |
| для сосудов No11 Запасные лезвия | FEATHER Безопасная бритва | 11 | Лезвия |
| Ножницы офтальмологические, круглая ручка | B BRAUN | FD103R | Микроножницы |
| Пластиковый контейнер прямоугольной формы | Daiso | 10 см в длину, 15 см в ширину и 6 см в высоту | |
| SuperGrip Tips | F.S.T | 00649-11 | Изогнутые микрощипцы |
| SZX7 | Olympus | SZX7 | Тиски |
| Niigataseiki | 00505351 | Механический инструмент для крепления щипцов Pean на столе |
Ссылки
- Qian, S. G., Fung, J. J., Demetris, A. V., Ildstad, S. T., Starzl, T. E. Orthotopic liver transplantation in the mouse. Transplantation. 52 (3), 562-564 (1991).
- Yokota, S., et al. Orthotopic mouse liver transplantation to study liver biology and allograft tolerance. Na....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
Теги
