Здесь мы представляем пошаговый протокол исследования терапевтических и сосудистых ингибирующих эффектов формулы Sanleng Jiashen на мышах BALB/c-nu с ортотопической гепатоцеллюлярной карциномой.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Здесь мы представляем пошаговый протокол исследования терапевтических и сосудистых ингибирующих эффектов формулы Sanleng Jiashen на мышах BALB/c-nu с ортотопической гепатоцеллюлярной карциномой.
Летальность рака печени и устойчивость к химическим препаратам заставили искать эффективные рецепты традиционных трав при раке печени. Животные модели, которые являются повторяемыми, простыми в манипулировании и в высокой степени имитируют патофизиологические процессы рака печени, являются предпосылкой для успешного скрининга эффективных кандидатов в лекарства. Между тем, надежные показатели и средства оценки эффективности лекарств также являются гарантией исследований и разработок лекарств против рака печени.
Формула Sanleng Jiashen, репрезентативный рецепт традиционной китайской медицины, содержащий Sparganium stoloni erum, Buch. -Ветчина. (Sanleng), Panax ginseng C. A. Mey. (женьшень), Rheum officinale Baill. (ревень) и Ligusticum chuanxiong Hort. (Chuanxiong) назначают для питания печени и очистки тепла, выведения токсинов и улучшения кровообращения для лечения рака печени. В этом экспериментальном протоколе описывается приготовление лиофилизированной формулы Sanleng Jiashen и процесс развития рака печени in situ у мышей BALB/c-nu. Гистопатологическое окрашивание, иммуногистохимическое обнаружение онкомаркеров, визуализация in vivo мышей и хориоаллантоисный мембранный тест куриного эмбриона были использованы для изучения ингибирующего и антиангиогенезного эффекта формулы Sanleng Jiashen на злокачественную пролиферацию ткани рака печени. Данные показывают, что формула Sanleng Jiashen может эффективно противостоять злокачественной пролиферации раковой ткани печени, которая проявляется уменьшением объема опухолевой массы, улучшением патологического повреждения и снижением уровня маркера рака ki67.
Превосходное ингибирование ангиогенеза также предполагает, что формула Sanleng Jiashen может иметь потенциал для лечения и предотвращения прогрессирования и ухудшения состояния рака печени. Вся экспериментальная схема показывает комплексный процесс использования компонентов традиционной китайской медицины в лечении рака печени у мышей, что служит основой для создания и оптимизации модели рака печени, а также для исследования и разработки лекарств для профилактики и лечения рака печени.
Рак печени — это смертельно опасный рак, который возникает в печени и является второй по распространенности причиной смерти от рака во всем мире1. Показатели заболеваемости печени в Соединенных Штатах и некоторых развивающихся странах демонстрируют высокий уровень, и к 2030 году во всем мире может быть зарегистрировано более 1 миллиона случаев заболевания раком печени2. Из-за нездоровых привычек, таких как курение, ожирение и употребление алкоголя, а также разрушительного воздействия гепатита В, гепатита С и других вирусов, заболеваемость и смертность от рака печени значительно увеличива....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Голых мышей-самцов BALB/c-nu, не содержащих специфических патогенов, в возрасте 5 недель и весом 18-22 г, кормили в Центре экспериментальных исследований животных Медицинского колледжа трансформации Цзилиньского университета; условия кормления составляли 22-24 °C при относительной влажности 40%-60%. Номер лицензии на экспериментальное животное - SYXK(Ji) 2018-0006, а экспериментальный процесс соответствует правилам и положениям Комитета по этике Цзилиньского университета, а номер утверждения этики животных - 20221228-01.
1. Приготовление сублимированного Sanleng Jiashen formula15
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Как показано на рисунке 2A, мы создали модель рака печени in-situ у мышей BALB/c-nu и оценили противоопухолевый эффект формулы Sanleng Jiashen. На рисунке 2B показано, что формула Sanleng Jiashen может значительно подавлять рост опухолей печени. Результаты патологоанатомического исследования показали, что по сравнению с контрольной группой опухолевые очаги в модельной группе имели четкие границы с окружающими тканями, более крупные опухолевые очаги, узл.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Большое количество доказательств подтвердило, что Sanleng, женьшень, ревень и чуаньсюн в формуле Sanleng Jiashen оказывают фармакологическое воздействие на лечение рака печени. Исследования показали, что Sanleng может значительно ингибировать пролиферацию и рост опухолевых клеток, предотвращая инвазию и метастазирование опухолевых клеток, индуцируя апоптоз клеток и регулируя клеточный цикл и микроокружение опухоли20. Было доказано, что кемпферол, активный ингредие.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Авторам нечего раскрывать.
Эта работа была поддержана Фондом философии и социальных наук Китая (20VYJ070), проектом Департамента образования провинции Цзилинь (JJKH20230963KJ) и вторым пакетом инженерного проекта ученых Синлинь в Чанчуньском университете китайской медицины (QNKXJ2-2021+ZR25).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 0,25% раствор трипсина | HyClone, Америка | SH30042.01B | |
| 1 мл одноразовый шприц | Mingankang Medical Equipment Co., Ltd., Китай | RWSB | |
| 1% раствор пенициллина и стрептомицина | Hyclone, Америка | SV30010 | |
| 1,5 мл центрифужная пробирка | Corning, Америка | MCT-150-C-S | |
| 12 см щипцы | для иглыHesdick, Китай | HKQS-211 | |
| 6-0 хирургические шовные нити | Shanghai Jinhuan Medical Equipment Co., Ltd., Шанхай, Китай | CR631 | |
| 75% спирт | Sichuan Youbang Enterprise Co., Ltd., Сычуань, Китай | 1.00009E+11 | |
| 96-луночные планшеты | NEST, Китай | 701001 | |
| Ацетон | Тяньцзинь Динфу Химический завод общего назначения, Тяньцзинь, Китай | GB686-89 | |
| BALB/c-nu самцы обнаженных мышей | Beijing Weitonglihua Experimental Animal Technology Co., Ltd., Пекин, Китай | SYXK(Ji) 2018-0006 | |
| Машина для выпечки биологических тканей | Leica, Германия | Leica HI1220 | |
| Чашка для клеточных культур | NEST, Китай | NEST.706001 | |
| Раствор лимонной кислоты | Wuhan Canos Technology Co., Ltd., Ухань, Китай | sj1074 | |
| D-люциферин | Голд Биотехнология®, Inc., Китай | LUCK-100 | |
| DMEM | Hyclone, Америка | SH30243.01 | |
| Осветитель яиц | Shandong Weizhen Incubation Equipment Company, Шаньдун, Китай | WZSDT | |
| Раствор для окрашивания эозина | Hunan BKMAM Biotechnology Co., Ltd., Хунань, Китай | 110703061 | |
| Эритромициновая глазная мазь | Cisen Pharmaceutical Co., Ltd., Шанхай, Китай | H37022025 | |
| Фетальная бычья сыворотка | Clark, Америка | FB25015 | |
| Полностью автоматический интеллектуальный инкубатор для цыплят | Shandong Weizhen Incubation Equipment Company, Шаньдун, Китай | 29538 | |
| GFP решение для лентивируса | Suzhou GenePharma Co., Ltd., Сучжоу, Китай | F22AZ | |
| Сыворотка для коз | Shenyang Wanlei Biotechnology Co., Ltd., Шэнъян, Китай | WLA067 | |
| Ручная дрель для черепа мыши | STRONGWT, Китай | 190 | |
| HCCLM3 клеточная линия | WheLab, Шанхай, Китай | C1010 | |
| Грелка | Zhongke Life Technology Co., Ltd., Ханчжоу, Китай | GEJRD-10W | |
| Гематоксилин | Hunan BKMAM Biotechnology Co., Ltd., Хунань, Китай | B-YH250-1 | |
| Интеллектуальный горшок для отвара | Hangzhou Jiuyang living Appliance Co., Ltd., Ханчжоу, Китай | 3003BQ | |
| Инвертированный флуоресцентный микроскоп | Olympus, Япония | IX73 | |
| ki67 первичное антитело | Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd., Ухань, Китай | GB121141-100 | |
| Дезинфицирующее средство Lodophor | Cofoe Medical Technology Co., Ltd., Хунань, Китай | 202110073 | |
| Luciferase | Suzhou GenePharma Co., Ltd., Сучжоу, Китай | E26JZ | |
| Матричный | клейCorning, Америка | 356234 | |
| Медицинская марля | Yunnan Chenye Biotechnology Co., Ltd., Юньнань, Китай | 71712049971 | |
| метанол | Guangdong Guanghua Sci-Tech Co., Ltd., Гуандун, Китай | 1.17001.023 | |
| Офтальмологические ножницы | Hesdick, Китай | HKQS-209 | |
| Офтальмологический пинцет | Hesdick, Китай | HKCL-20 | |
| Машина для заделки парафина | Leica, Германия | ||
| Машина для нарезки парафина | Leica, Германия | Leica CM1950 | |
| Параформальдегид | Biosharp, Китай | BL539A | |
| PBS буфер | Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd., Ухань, Китай | G2156-1L | |
| Пуромицин | Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd., Пекин, Китай | P8230 | |
| Холодильник | Thermo Scientific, Америка | TDE40086FV-ULTS | |
| Скальпель | Hesdick, Китай | HKCL-93 | |
| Вторичное антитело | Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd., Ухань, Китай | GB23301 | |
| Система визуализации мелких животных в реальном времени | Caliper Life Sciences, Америка | IVIS Lumina XR | |
| Sorafenib | Shanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd., Шанхай, Китай | 284461-73-0 | |
| Прозрачная повязка | 3M, Америка | 9534HP | |
| Triton X-100 | Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd., Пекин, Китай | T8200 | |
| Вакуумная сублимационная сушилка | Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., Ltd., Нинбо, Китай | sz-10N | |
| Яйца курицы с белым пером | Shandong Haotai Experimental Animal Breeding Co., Ltd., Шаньдун, Китай | SCXK(Lu) 20180004 | |
| Xylene | Sigma-Aldrich, , Америка | 534056 |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Эта статья была опубликована
Видео скоро будет доступно