Методическая статья

Периорбитальное размещение лазерного допплеровского зонда для мониторинга мозгового кровотока до окклюзии средней мозговой артерии на моделях грызунов

1.7K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/66839

⸱

22 ноября 2024 г.

 ,  ,  , 
1College of Nursing, University of Arizona, 2Department of Surgery, College of Medicine, University of Arizona

В этой статье

Уведомление об исправлении

Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice

Краткое содержание

Здесь показана минимально инвазивная хирургическая процедура, которая включает в себя размещение лазерного допплеровского зонда на черепе над дистальной областью средней мозговой артерии (МКА), периорбитальной областью, подходящей для крыс и мышей, для оценки кровотока во время транзиторной окклюзии МКА.

Аннотация

Окклюзия средней мозговой артерии (ОКАО) является золотым стандартом для доклинического моделирования ишемического инсульта у грызунов. Однако успешная окклюзия не гарантируется даже самыми умелыми хирургическими руками. Ошибки в основном возникают, когда филамент расположен не на правильной глубине, и включают случаи либо отсутствия инфаркта, либо перфорации сосуда, что может привести к смерти. Лазерная допплеровская флоуметрия (ЛДФ) является надежным методом, который обеспечивает обратную связь в режиме реального времени по регионарному мозговому кровотоку (КБШ) во время процедуры MCAO. В данной работе мы демонстрируем быструю технику периорбитального размещения лазерного доплеровского зонда для измерения CBF как у мышей, так и у крыс. Наше обоснование заключалось в том, чтобы упростить внедрение LDF, поощряя широкое использование для повышения хирургической надежности. Этот метод устраняет необходимость в истончении черепа и специализированном оборудовании, с размещением в периорбитальной области, а не в дорсальном размещении, что способствует эффективности и простоте внедрения. Описанный здесь протокол включает в себя предоперационную подготовку, установку периорбитального допплеровского зонда и послеоперационный уход. Репрезентативные результаты включают в себя визуальные изображения процедурных элементов наряду с репрезентативными трассировками LDF, иллюстрирующими успешные операции MCAO, со случаями неудачной установки филамента, приводящей к осложнениям. Протокол иллюстрирует LDF в подтверждении правильного размещения филамента и предлагает упрощенную процедуру по сравнению с альтернативными методами.

Введение

Метод окклюзии средней мозговой артерии (MCAO) широко используется у грызунов с техпор, как он был представлен научному сообществу для применения к крысам в 1986году1 с адаптацией Лонга, описанной в 1990 году2, и адаптацией для мышейвскоре после 3. Хотя это не описано в публикации Лонга, использование сигнала лазерной доплеровской флоуметрии (ЛДФ) для подтверждения расположения нити вскоре было описано в литературе4. Использование LDF во время процедуры MCAO занимает видное место в литературе, но обозначено как необязательный шаг в текущих стандартных оперативных процедурах (СОП) Сети доклинической оценки инсульта (SPAN)5.

Использование LDF подтверждает правильное размещение филамента во время процедуры MCAO и, следовательно, способствует строгости дизайна исследования и последующим результатам, особенно в экспериментах, направленных на изучение эффективности препарата. Использование LDF снижает количество хирургических ошибок, возникающих из-за неправильного размещения нити, что приводит к дихотомической ситуации либо отсутствия травм, когда нить размещена недостаточно далеко, либо к гибели животных из-за перфорации сосуда, возникающей при слишком глубоком введении нити. С другой стороны, применение ЛДФ не связано с вариабельностью размеров инфаркта, обычно наблюдаемой после процедуры MCAO6. Использование LDF в процедуре MCAO может восприниматься как сложное и обременительное, особенно у крыс, потому что череп толще, чем у мышей, и может потребовать истончения черепа перед установкой LDF 7,8. Кроме того, установка дорсального зонда часто описывается некоторыми протоколами, требующими специализированного оборудования или подготовки 7,8,9. При наличии любого из этих барьеров внедрение LDF для подтверждения установки нити накала может быть невыполнено.

В этом протоколе мы описываем размещение лазерного допплеровского зонда на черепе и над дистальной областью средней мозговой артерии (периорбитальное размещение) для оценки кровотока во время процедуры MCAO как у мышей, так и у крыс. Наше обоснование состояло в том, чтобы разработать процедуру, которая имеет множество преимуществ по сравнению с некоторыми методами, описанными в литературе 7,8,9,10, в том, что она является минимально инвазивной, быстрой и не требует истончения черепа или специализированного оборудования, выходящего за рамки лазерного допплеровского зонда.

Протокол

Для иллюстрации этого протокола использовались взрослые мыши и крысы (25 г, C57BL/6J, Jackson Laboratories; 250 г, Sprague Dawley, Envigo). Процедуры обращения с животными и эксперименты проводились с одобрения и в соответствии с Комитетом по уходу за животными и их использованию Университета Аризоны, национальными законами и в соответствии с принципами ухода за лабораторными животными11. Крысы и мыши были размещены по графику 12 часов в светлое и темное время суток (с 7 утра до 7 вечера), а еда и вода были доступны в неограниченном количестве.

1. Предоперационная подготовка

ПРИМЕЧАНИЕ: Как правило, хирургическое вмешательство MCAO у грызунов проводится в качестве операции по выживанию, что требует использования либо асептической, либо хирургической техники только с наконечниками, как указано в протоколе IACUC для конкретного учреждения. В этом случае хирург использует технику «только наконечники» со стерилизованными инструментами и расходными материалами.

  1. Продезинфицируйте хирургическую рабочую поверхность коммерческим дезинфицирующим средством и подготовьте стерильные хирургические пакеты из инструментов, простыней, марли, тампонов, швов и лезвий скальпеля путем автоклавирования. Поддерживайте стерильные условия во время операции по выживанию в соответствии с методами, одобренными IACUC, такими как накрытие ручек микроскопа и драпировка пищевой полиэтиленовой пленкой.
  2. Используйте стерилизатор для сухих шариков для повторной стерилизации хирургических инструментов между процедурами, если в течение одного сеанса проводится несколько операций на грызунах.
  3. Поместите крысу или мышь в индукционную камеру и введите анестезию с помощью 3%-5% изофлурана (1 л/мин при комбинированной смеси 80% воздуха и 20% кислорода).
  4. Переместите животное из камеры на скамью и носовой конус для анестезии (мышь: 0,5 л/мин 80%/20% кислородно-воздушная смесь; крыса: 1,5 л/мин 80%/20% кислородно-воздушная смесь). Нанесите офтальмологическую мазь на оба глаза и осторожно побрейте пространство между ухом и глазницей со стороны хирургического кабинета MCAO (обычно справа), чтобы не порезать кожу с помощью машинок для стрижки. У крысы после бритья ямочка на усах будет видна примерно посередине между глазницей и ухом. Продолжайте брить участки по мере необходимости для процедуры MCAO9 (не входит в рамки данной статьи).
  5. Возвращайте животное в камеру по мере необходимости или перемещайте его к носовому конусу на подготовленном хирургическом столе, нагретом до 37 °С. Вставьте ректальный термометр. Животное должно содержаться при температуре около 36 °C ± 1 °C на протяжении всей процедуры и в соответствии с утвержденным протоколом IACUC.
  6. Нанесите бетадин на ватный тампон и продезинфицируйте кожу, закручиваясь по спирали наружу от центра хирургической области. Протрите спиртовой салфеткой. Повторите оба шага в общей сложности три цикла. Подтверждайте надлежащую анестезию и оценивайте каждые 15 минут во время процедуры с помощью рефлюкса для щипки пальца ноги.

2. Установка периорбитального допплеровского зонда

  1. С помощью маленьких ножниц сделайте вертикальный разрез (мышь: ~0,5 см; крыса: ~0,7 см) между уголком глаза и складкой уха, как показано на рисунке 2А (мышь) и рисунке 3А (крыса), чтобы обнажить верхнюю фасию и нижележащую мышцу.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Лечите боль перед операцией в соответствии с одобренным протоколом IACUC.
  2. С помощью острых щипцов и изогнутых ножниц аккуратно разрежьте мышечный слой до тех пор, пока не будет достигнут череп. Череп будет плоским и его будет трудно коснуться кончиком щипцов. Это окно, в котором будет находиться лазерный доплеровский зонд, как показано на рисунке 2B.
  3. Используйте щипцы для прижигания кровью, расширяйте окно и обеспечьте путь к черепу.
  4. Как только окно откроется, промокните ватными тампонами, чтобы удалить излишки крови по мере необходимости.
    Поместите мышь или крысу в положение лежа на спине.
  5. Используйте щипцы для втягивания кожи или тканей и поместите допплеровский зонд в периорбитальное окно так, чтобы он примыкал к черепу перпендикулярно, без кожи или мышц, препятствующих лазерному сигналу. Эта область находится над дистальным отделом МКА, как показано на рисунках 1A, B. Закрепите место расположения зонда лабораторной лентой. В этом протоколе описано использование прямого зонда.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Мы признаем, что протоколы хирургического вмешательства могут различаться в зависимости от лаборатории. В литературе (когда сообщается) одни тонко шлифуют череп, а другие нет9. Это может быть связано с тем, что череп тоньше в периорбитальной области, но это всего лишь предположение. По нашему опыту, прямое размещение без измельчения может быть достигнуто у мышей и крыс, что и продемонстрировано в этом протоколе.
  6. Контролируйте показания относительного кровотока на мониторе с помощью соответствующего программного обеспечения (Рисунок 2D, Рисунок 3C, D). Показания LDF будут отличаться. Однако оптимальным диапазоном для обнаружения капель кровотока является >200 перфузионных единиц (ПУ).
  7. Перейдите к операции MCAO9 (не входит в рамки данной статьи). Во время операции MCAO установите тестовый зонд путем кратковременного перевязывания общей сонной артерии, что должно вызвать резкое падение кровотока (~50%).

3. Удаление допплеровского зонда и послеоперационный уход

  1. По завершении MCAO или по завершении измерения кровотока извлеките лазерный допплеровский зонд из операционного окна. Допплеровский зонд обычно остается на месте в течение всей операции MCAO у мыши, потому что время ишемии часто составляет менее 90 минут. С другой стороны, при процедуре MCAO на крысах допплеровский зонд может быть удален после установки нити и во время ишемии (обычно > 90 минут), а затем снова помещен в периорбитальное окно для подтверждения реперфузии путем повторения шагов 2.6 и 2.7.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Типичная непрерывная трассировка LDF от MCAO мыши может наблюдаться на рисунке 4A. Типичная трассировка LDF из процедуры MCAO крысы проиллюстрирована на рисунке 4B.
  2. Введите одобренный IACUC местный анестетик подкожно вдоль предполагаемого места разреза.
  3. Закройте кожу 1-2 швами с помощью стандартного хирургического узла с рассасывающейся шовной нитью или хирургическим клеем, согласно утвержденному протоколу IACUC. Лечите послеоперационную боль в соответствии с одобренным протоколом IACUC (например, бупивакаин гидрохлорид 0,5% и лидокаин 2%, однократное введение в разрез у мышей и крыс). Животных нельзя оставлять без присмотра до тех пор, пока они не смогут сохранять лежачее положение на грудине, и ни одно животное не должно возвращаться в компанию других животных до тех пор, пока они полностью не выздоровеют.

Результаты

Размещение лазерного допплеровского зонда в области MCA визуально изображено на рисунке 1, представляя собой пиктограмму сосудистой сети и служа визуальным ориентиром с сагиттальной и дорсальной перспектив. На рисунке 2 обобщены важнейшие этапы установки лазерного доплеровского зонда и результаты у мыши. На рисунке 2А представлено изображение обезболенной и подготовленной мыши с пунктирной маркировкой в месте вертикального разреза, необходимого для последующей установки лазерного допплеровского зонда. Периорбитальное окно черепа показано на рисунке 2B.

На рисунке 3 показана установка лазерного доплеровского зонда у крысы. Изображение крысы, находящейся под наркозом и подготовленной под давлением, с пунктирной маркировкой в месте вертикального разреза, необходимого для последующей установки лазерного допплеровского зонда, представлено на рисунке 3А. Периорбитальное окно не видно, потому что оно находится глубже, чем мышь. В этом случае череп можно прощупать, о чем говорилось в пункте 2.3. Лазерный допплеровский зонд, размещенный в периорбитальной области у лежащей на спине крысы, показан на рисунке 3B.

Типичная трассировка LDF во время процедуры MCAO на мышах показана на рисунке 4A. Это иллюстрирует успешную индукцию ишемии, о чем свидетельствует отчетливое и немедленное снижение относительного мозгового кровотока (ОЦБ) при перевязывании сонной артерии и при продвижении нити к устью МКА. Начало реперфузии показано в конце трассировки, о чем свидетельствует отчетливое и немедленное увеличение относительной КБФ при развязывании сонной артерии и снова при изъятии нити из МКА. Типичное показание ишемии LDF во время операции MCAO на крысах показано на рисунке 4B, где показана успешная индукция ишемии с последующим удалением зонда и повторной его установкой для измерения LDF во время реперфузии. При хирургии крыс время ишемии может превышать 60 минут, и животные могут восстановиться в период ишемии и должны быть повторно обезболены для реперфузии. В этом случае зонд повторно помещается в периорбитальное окно, и трассировка LDF продолжается. Ишемия проявляется в отчетливом и немедленном снижении относительного КБК при перевязывании сонной артерии и продвижении нити к устью МКА. Реперфузия проявляется при повторном отслеживании ЛДФ отчетливым и немедленным увеличением относительного КБФ, после чего сонная артерия развязывается и, опять-таки, когда филамент удаляется из устья МКА. Периорбитальная допплерография расположена над дистальной ветвью МКА и, следовательно, в пределах распределения крови МКА с наблюдаемым снижением КБФ, о чем свидетельствует снижение кровотока во время процедуры МКАО, показанной на рисунке 4.

На рисунке 5 мы показываем трассировки LDF, которые иллюстрируют неудачные операции MCAO. На рисунке 5А обобщена трассировка LDF после операции на крысе с успешной окклюзией сонной артерии, которая позже расшаталась, и неудачной установкой филамента, отмеченной медленным снижением относительного CBF. Этот паттерн LDF обычно связан с перфорацией MCA, которая может быть подтверждена при вскрытии. Другая трассировка после операции MCAO у мышей (рис. 5B) проливает свет на неубедительную окклюзию сонной артерии, которая, вероятно, способствовала невозможности обнаружения расположения нити в устье MCA. Подозревалась перфорация MCA, потому что при незначительном изъятии нити относительный CBF демонстрировал медленное восстановление. Эти примеры подчеркивают решающую роль отслеживания LDF в выявлении успешных и неудачных операций MCAO и подчеркивают важность тщательных хирургических процедур и мер для надежных экспериментальных результатов.

figure-results-1
Рисунок 1: Пиктограмма примерного размещения лазерного доплеровского зонда по отношению к MCA. Схема размещения лазерного доплеровского зонда с (А) сагиттальной и (В) дорсальной проекции. Создано с помощью Biorender.com; KT26JWLYF6. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

figure-results-2
Рисунок 2: Иллюстрация этапов операции по размещению лазерного допплеровского зонда у мыши. (A) Изображение расположения вертикального разреза, необходимого для установки лазерного допплеровского зонда, когда мышь находится в положении лежа на спине. (B) Изображение периорбитального окна и черепа, полученное с помощью щипцов и/или ножниц у мыши. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

figure-results-3
Рисунок 3: Иллюстрация этапов операции по установке лазерного допплеровского зонда у крысы. (А) Изображение расположения вертикального разреза, необходимого для установки лазерного допплеровского зонда, когда крыса находится в положении лежа на спине. (B) Размещение лазерного допплеровского зонда в периорбитальной области у лежащей на спине крысы. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

figure-results-4
Рисунок 4: Примеры трассировки LDF, подтверждающие успешную процедуру MCAO у мышей и крыс. (A) Чтение LDF области MCA во время процедуры MCAO у мыши. Эта трассировка иллюстрирует подтверждение 1. окклюзия сонной артерии с завязкой; 2. Размещение нитей накала в MCA; 3. Удаление нити после 60 мин непрерывной ишемии; и 4. реперфузия при развязывании сонной артерии. Элементы а. и б. иллюстрируют, как выглядит доплеровская трассировка, когда сонная артерия развязывается и снова завязывается во время чтения. Этот метод может быть использован для подтверждения размещения датчика. (B) Показания ЛДФ области MCA во время процедуры MCAO крыс. Как и мышь, эта трассировка иллюстрирует подтверждение 1. окклюзия сонной артерии с завязкой и 2. размещение филамента в MCA. При процедуре MCAO крысы допплеровский зонд часто удаляется, и животное проводит все время ишемии в бодрствующем состоянии и двигается. Для реперфузии ЛДФ восстанавливается до начала реперфузии: 3. подтверждает удаление нити и 4. подтверждает, что сонная артерия развязана до полной реперфузии. При процедурах MCAO на мышах и крысах успешная установка зонда используется для визуализации правильного размещения филамента и показана, когда трассировка показывает два отчетливых и внезапных снижения LDF (при ишемии), за которыми следуют два отчетливых и внезапных увеличения LDF (реперфузия). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

figure-results-5
Рисунок 5: Примеры лазерной допплеровской флоуметрии, указывающие на неудачные процедуры MCAO у мышей и крыс . (A) Пример трассировки LDF, которая указывает на неубедительное размещение филамента у крысы. В то время как сонная артерия была перевязана (1), ослабла (2.), а затем снова завязана (3.), наблюдается нечеткое и медленное падение, а не внезапное падение LDF, когда нить находилась в MCA Ostia. Эта трассировка может указывать на перфорацию MCA, и животное может не выжить в течение первых 24 часов после реперфузии; Перфорация нити может быть подтверждена при вскрытии. (B) Пример трассировки LDF, которая указывает на неточное размещение нити накала в мыши. В этой трассировке признаки уздечки сонной артерии неубедительны (1.), за которым следует нечеткое снижение LDF с размещением нитей в устье MCA (2.). Кроме того, когда филамент был немного изъят, относительный мозговой кровоток увеличивался вяло (3.). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этой цифры.

Обсуждение

MCAO является золотым стандартом процедуры моделирования окклюзии и реперфузии церебральных артерий у грызунов и является краеугольным камнем доклинических исследований инсульта, позволяя индуцировать фокальную ишемию у грызунов для имитации патофизиологии инсульта человека. Это сложная хирургическая процедура со значительной меж- и даже внутрихирургической вариабельностью. Хотя нет никаких доказательств того, что применение LDF снижает вариабельность, оно может улучшить научную строгость и результаты исследований в некоторых дизайнах. Это достигается благодаря тому, что LDF проверяет размещение нити и предоставляет информацию о CBF в режиме реального времени во время операции, подтверждая, произошла ли окклюзия MCA. Примерно в 75% исследований на мышах описывается использование лазерного допплеровского зонда12,13, в то время как в метаанализе исследований на крысах этот параметр не был указан14. Часто используемой альтернативой ЛДФ является измерение вставки филамента (например, на расстоянии 18-20 мм от бифуркации общей сонной артерии у крыс) с использованием маркированных филаментов или для измерения оставшейся нити, выступающей из точки введения (например, на 10 мм)10. Тем не менее, эта альтернатива уступает LDF, потому что точная глубина введения нити может незначительно варьироваться в зависимости от таких факторов, как размер и вес крысы, а также от конкретного протокола, используемого в эксперименте. Такие различия являются существенными факторами для воспроизводимости операции MCAO, учитывая риск перфорации сосуда или неполной окклюзии - оба негативных исхода операции.

Несмотря на то, что LDF является методом валидации размещения нитей накала и поддерживается SPAN, он не является обязательным этапом в опубликованной SPAN-SOP5. Описанный протокол позволяет преодолеть такие барьеры, как использование специального оборудования и затрудненное размещение зонда на дорсальных срезах черепа, когда основная процедура проводится на животном, лежащем на спине; Эти факторы часто увеличивают время хирургического вмешательства. В отличие от этого, в этом протоколе используется один прямой лазерный допплеровский зонд и монитор, периорбитальное расположение и отсутствие истончения черепа. В сочетании эти шаги приводят к значительно упрощенной и сокращенной (часто менее 5 минут) процедуре, что является значительным улучшением по сравнению с аналогичными, но альтернативными методами, описанными в литературе 7,8,9,10. Этот протокол также может быть адаптирован хирургами по мере необходимости. Устранение неполадок описанных методов может потребовать изменения положения зонда, особенно если на шаге 2.8 не наблюдается снижения кровотока.

Использование LDF ограничено подтверждением размещения филамента и не связано с вариабельностью размеров инфаркта, которая может составлять >20% в методах на мышах икрысах 12,14. Вариабельность инфаркта является давней проблемой в доклинических исследованиях инсульта. В то время как эта повышенная вариабельность может имитировать разнообразие размеров инфаркта, наблюдаемое в человеческомсостоянии13, при отсутствии должного учета наблюдаемая вариабельность может привести к исследованиям, которые не подкреплены должным образом. Несмотря на то, что не существует единого фактора, предсказывающего вариабельность метода, подтверждение размещения является важным фактором для исследований эффективности препарата. Описанный здесь протокол, хотя, возможно, уже используется в процедурах MCAO у мышей, может быть недостаточно использован на крысах, учитывая более частые описания дорсального размещения в литературе9. Мы считаем, что данное описание упрощенного размещения лазерного доплеровского зонда способствует совершенствованию методологий доклинических исследований инсульта, направленных на повышение экспериментальной точности и трансляционной актуальности.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Это исследование финансировалось NINDS 1R41NS124450. Биорендер: KT26JWLYF6

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
изогнутые пружинные ножницыCastroviejo1501710
щипцы #5Инструменты для тонкой науки11250-20
Щипцы #5/45Инструменты для тонкой науки1151-35
Инструменты для прижиганияConmedM18019-01
Лабораторная лентаFisherbrand Маркировочная лента15-950
Лазерный доплеровский мониторMoore Instruments Программное обеспечение MOORVMS-LDF
LDF Perisoftдля Windows или moorSOFTNA
Машинки для стрижки мышейPhilips NorelcoMG7910
Periflux System 4000, зонд 407Оборудование Perimedбольше не доступно
Полиэтиленовая пленкаGladpress n seal
Машинки для стрижки крысosterA5 или аналогичные
Маленькая анестезия грызуновJD Медицинскийиндивидуальный заказ
маленькие ножницыexcelta362 Sissors или аналогичная
система контроля температуры с зондомPhysitempTCAT-2AC Controller

Ссылки

  1. Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. Experimental studies of ischemic brain edema. I. A new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area. Japanese J Stroke. 20 (1), 84-91 (1986).
  2. Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Stroke. 20 (1), 84(1989).
  3. Hata, R., et al. A reproducible model of middle cerebral artery occlusion in mice: hemodynamic, biochemical, and magnetic resonance imaging. J Cereb Blood Flow Metab. 18 (4), 367-375 (1998).
  4. Dirnagl, U., Kaplan, B., Jacewicz, M., Pulsinelli, W. Continuous measurement of cerebral cortical blood flow by laser-Doppler flowmetry in a rat stroke model. J Cereb Blood Flow Metab. 9 (5), 589-596 (1989).
  5. Lyden, P. D., et al. The stroke preclinical assessment network: Rationale, design, feasibility, and stage 1 results. Stroke. 53 (5), 1802-1812 (2022).
  6. Ingberg, E., Dock, H., Theodorsson, E., Theodorsson, A., Ström, J. O. Effect of laser Doppler flowmetry and occlusion time on outcome variability and mortality in rat middle cerebral artery occlusion: inconclusive results. BMC Neurosci. 19 (1), 24(2018).
  7. Spratt, N. J., et al. Modification of the method of thread manufacture improves stroke induction rate and reduces mortality after thread-occlusion of the middle cerebral artery in young or aged rats. J Neurosci Methods. 155 (2), 285-290 (2006).
  8. Watcharotayangul, J., et al. Post-ischemic vascular adhesion protein-1 inhibition provides neuroprotection in a rat temporary middle cerebral artery occlusion model. J Neurochem. 123 Suppl 2 (Suppl 2), 116-124 (2012).
  9. Beretta, S., et al. Optimized system for cerebral perfusion monitoring in the rat stroke model of intraluminal middle cerebral artery occlusion. J Vis Exp. (72), e50214(2013).
  10. Ritter, L. S., Stempel, K. M., Coull, B. M., McDonagh, P. F. Leukocyte-platelet aggregates in rat peripheral blood after ischemic stroke and reperfusion. Biol Res Nursing. 6 (4), 281(2005).
  11. National Research Council. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals.. , 8th ed., The National Academies Press. Washington, DC, USA. (2011).
  12. Ingberg, E., Dock, H., Theodorsson, E., Theodorsson, A., Ström, J. O. Method parameters' impact on mortality and variability in mouse stroke experiments: a meta-analysis. Sci Rep. 6, (2016).
  13. Morais, A., et al. Embracing heterogeneity in the multicenter stroke preclinical assessment network (SPAN) trial. Stroke. 54 (2), 620-631 (2023).
  14. Ström, J. O., Ingberg, E., Theodorsson, A., Theodorsson, E. Method parameters' impact on mortality and variability in rat stroke experiments: a meta-analysis. BMC Neurosci. 14, 41(2013).

Перепечатки и разрешения

Исправление


Formal Correction: Erratum: Periorbital Placement of a Laser Doppler Probe for Cerebral Blood Flow Monitoring Prior to Middle Cerebral Artery Occlusion in Rodent Models
Posted by JoVE Editors on 3/18/2025. Citeable Link.

This corrects the article 10.3791/66839

Теги

Лазерная допплеровская флоуметрияустановка периорбитального датчикамодель ишемического инсультамодель инсульта у грызуноввведение филаментаколичественное определение микроглииреперфузионное повреждениепротокол хирургического вмешательства при инсульте
Периорбитальное размещение лазерного допплеровского зонда для мониторинга мозгового кровотока до окклюзии средней мозговой артерии на моделях грызунов
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.