Здесь показана минимально инвазивная хирургическая процедура, которая включает в себя размещение лазерного допплеровского зонда на черепе над дистальной областью средней мозговой артерии (МКА), периорбитальной областью, подходящей для крыс и мышей, для оценки кровотока во время транзиторной окклюзии МКА.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Периорбитальное размещение лазерного допплеровского зонда для мониторинга мозгового кровотока до окклюзии средней мозговой артерии на моделях грызунов
В этой статье
Уведомление об исправлении
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
Краткое содержание
Аннотация
Окклюзия средней мозговой артерии (ОКАО) является золотым стандартом для доклинического моделирования ишемического инсульта у грызунов. Однако успешная окклюзия не гарантируется даже самыми умелыми хирургическими руками. Ошибки в основном возникают, когда филамент расположен не на правильной глубине, и включают случаи либо отсутствия инфаркта, либо перфорации сосуда, что может привести к смерти. Лазерная допплеровская флоуметрия (ЛДФ) является надежным методом, который обеспечивает обратную связь в режиме реального времени по регионарному мозговому кровотоку (КБШ) во время процедуры MCAO. В данной работе мы демонстрируем быструю технику периорбитального размещения лазерного доплеровского зонда для измерения CBF как у мышей, так и у крыс. Наше обоснование заключалось в том, чтобы упростить внедрение LDF, поощряя широкое использование для повышения хирургической надежности. Этот метод устраняет необходимость в истончении черепа и специализированном оборудовании, с размещением в периорбитальной области, а не в дорсальном размещении, что способствует эффективности и простоте внедрения. Описанный здесь протокол включает в себя предоперационную подготовку, установку периорбитального допплеровского зонда и послеоперационный уход. Репрезентативные результаты включают в себя визуальные изображения процедурных элементов наряду с репрезентативными трассировками LDF, иллюстрирующими успешные операции MCAO, со случаями неудачной установки филамента, приводящей к осложнениям. Протокол иллюстрирует LDF в подтверждении правильного размещения филамента и предлагает упрощенную процедуру по сравнению с альтернативными методами.
Введение
Метод окклюзии средней мозговой артерии (MCAO) широко используется у грызунов с техпор, как он был представлен научному сообществу для применения к крысам в 1986году1 с адаптацией Лонга, описанной в 1990 году2, и адаптацией для мышейвскоре после 3. Хотя это не описано в публикации Лонга, использование сигнала лазерной доплеровской флоуметрии (ЛДФ) для подтверждения расположения нити вскоре было описано в литературе4. Использование LDF во время процедуры MCAO занимает видное место в литературе, но обозначено как необязательный шаг в текущих ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Для иллюстрации этого протокола использовались взрослые мыши и крысы (25 г, C57BL/6J, Jackson Laboratories; 250 г, Sprague Dawley, Envigo). Процедуры обращения с животными и эксперименты проводились с одобрения и в соответствии с Комитетом по уходу за животными и их использованию Университета Аризоны, национальными законами и в соответствии с принципами ухода за лабораторными животными11. Крысы и мыши были размещены по графику 12 часов в светлое и темное время суток (с 7 утра до 7 вечера), а еда и вода были доступны в неограниченном количестве.
1. Предоперационная подг....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Размещение лазерного допплеровского зонда в области MCA визуально изображено на рисунке 1, представляя собой пиктограмму сосудистой сети и служа визуальным ориентиром с сагиттальной и дорсальной перспектив. На рисунке 2 обобщены важнейшие этапы установки лазерного доплеровского зонда и результаты у мыши. На рисунке 2А представлено изображение обезболенной и подготовленной мыши с пунктирной маркировкой в месте вертикального разреза, .......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
MCAO является золотым стандартом процедуры моделирования окклюзии и реперфузии церебральных артерий у грызунов и является краеугольным камнем доклинических исследований инсульта, позволяя индуцировать фокальную ишемию у грызунов для имитации патофизиологии инсульта человека. Это сложная хирургическая процедура со значительной меж- и даже внутрихирургической вариабельностью. Хотя нет никаких доказательств того, что применение LDF снижает вариабельность, оно может улучшить научную строгост.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторам нечего раскрывать.
Благодарности
Это исследование финансировалось NINDS 1R41NS124450. Биорендер: KT26JWLYF6
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| изогнутые пружинные ножницы | Castroviejo | 1501710 | |
| щипцы #5 | Инструменты для тонкой науки | 11250-20 | |
| Щипцы #5/45 | Инструменты для тонкой науки | 1151-35 | |
| Инструменты для прижигания | Conmed | M18019-01 | |
| Лабораторная лента | Fisherbrand Маркировочная лента | 15-950 | |
| Лазерный доплеровский монитор | Moore Instruments | Программное обеспечение MOORVMS-LDF | |
| LDF Perisoft | для Windows или moorSOFT | NA | |
| Машинки для стрижки мышей | Philips Norelco | MG7910 | |
| Periflux System 4000, зонд 407 | Оборудование Perimed | больше не доступно | |
| Полиэтиленовая пленка | Glad | press n seal | |
| Машинки для стрижки крыс | oster | A5 или аналогичные | |
| Маленькая анестезия грызунов | JD Медицинский | индивидуальный заказ | |
| маленькие ножницы | excelta | 362 Sissors или аналогичная | |
| система контроля температуры с зондом | Physitemp | TCAT-2AC Controller |
Ссылки
- Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. Experimental studies of ischemic brain edema. I. A new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area. Japanese J Stroke. 20 (1), 84-91 (1986).
- Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
Исправление
Formal Correction: Erratum: Periorbital Placement of a Laser Doppler Probe for Cerebral Blood Flow Monitoring Prior to Middle Cerebral Artery Occlusion in Rodent Models
Posted by JoVE Editors on 3/18/2025. Citeable Link.
This corrects the article 10.3791/66839
