Мы описываем протокол ex vivo изолированного рабочего сердца крысы для тестирования стратегий сохранения сердца донора. В данной статье описан протокол использования в статическом холодильном хранении донорских сердец грызунов; Тем не менее, протокол также может быть использован для донорских сердец, полученных после донорства после смерти кровообращения и мозга.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Использование изолированной модели рабочего сердца крысы для тестирования стратегий сохранения донорского сердца
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Оптимизация решений по сохранению донорского сердца сыграла ключевую роль в снижении ишемии-реперфузионного повреждения в сердцах доноров во время извлечения, транспортировки и трансплантации органов. Предыдущая работа нашей лаборатории показала, что добавление глицерилтринитрата и эритропоэтина в решения для сохранения сердца донора может значительно улучшить функциональное восстановление сердца после длительного хранения в холоде и при донорстве после сердечно-сосудистой смерти. Этот протокол приема добавок был внедрен в клиническую практику в трансплантационных отделениях в Австралии, Бельгии и Великобритании. В этой статье мы описываем протокол тестирования стратегий приема добавок с использованием изолированного контура перфузии рабочего сердца крысы (IWRH) ex vivo . Используя эту методологию, стратегии приема добавок могут быть протестированы в контексте длительного хранения статического электричества на холоде, донорства после смерти мозга и донорского сердца после сердечной смерти. Функциональное восстановление сердца, измеряемое аортальным потоком, коронарным кровотоком, сердечным выбросом, пульсовым давлением и частотой сердечных сокращений, может быть использовано для определения того, может ли конкретная стратегия сохранения свести к минимуму ишемическое реперфузионное повреждение донорского сердца.
Введение
На успех пересадки сердца в значительной степени может повлиять метод консервации, используемый для донорского сердца. Донорские сердца подвергаются ишемическим повреждениям на протяжении всего процесса извлечения, транспортировки и трансплантации органов. Степень ишемического повреждения донорского органа может быть снижена путем выбора подходящей стратегии сохранения донорского сердца. Холодное статическое хранение (CSS) остается наиболее целесообразным и распространенным методом сохранения сердца донора; однако CSS не обязательно может быть лучшим вариантом для всех путей донорства сердца. Например, сердца, полученные по пути донорства после смерти от кровообращения (DCD), поддерживаются и оцениваются на жизнеспособность с помощью нормотермической машинной перфузии, в то время как сердца, полученные по пути донорства после смерти мозга (DBD), могут быть сохранены с помощью CSS или гипотермической машинной перфузии. Другим важным фактором, определяющим используемую стратегию сохранения, является количество теплой ишемии (при ДКБ) или холодной ишемии (при ДБД), которым подвергается сердце во время забора и транспортировки органов.
Многие центры используют дополнительные фармакологические добавки раствора для сохранения сердца для повышения толерантности к ишемии и улучшения функции сердца после трансплантации. Исследования на грызунах, проведенные в нашей лаборатории, показали, что добавки кардиоплегии эритропоэтином и глицерилтринитратом способны значительно улучшить функциональное восстановление сердца после длительного хранения донорского сердцав холоде 1,2. Эти исследования затем перешли в исследования сохранения донорского сердца на свиньях и обеспечили доклиническую основу, которая привела к включению эритропоэтина и глицерилтринитрата в раствор кардиоплегии сердца, полученный через DCD-путь с использованием нормотермической машинной перфузии 3,4,5. В настоящее время добавки эритропоэтина и глицерилтринитрата также используются в австралийских трансплантационных отделениях для клинического извлечения сердца DBD с использованием CSS. Общая цель протокола перфузии изолированного рабочего сердца крысы (IWRH), описанного ниже, заключается в том, чтобы проверить стратегии сохранения донорского сердца в лабораторных условиях и проверить их эффективность для сохранения функции донорского сердца после реперфузии. Описанный протокол изолированного рабочего сердца крысы использовался в течение более двух десятилетий в нашей лаборатории и оказался чрезвычайно полезным для скрининга потенциальных добавок и/или стратегий, которые могут улучшить сохранение донорского сердца 2,7,8,9.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Все животные получили гуманный уход в соответствии с рекомендациями Национального совета по здравоохранению и медицинским исследованиям (Австралия). Все процедуры на животных были одобрены Комитетом по этике животных Института медицинских исследований Гарвана (Сидней, Австралия).
1. Приготовление буфера Krebs-Henseleit (KH)
- Приготовьте 2 л 20-кратного стокового раствора буфера KH, содержащего 2,36 М NaCl, 0,094 М KCl, 0,024 М MgSO4, 0,024 М KH2PO4. Аликвот в пробирки объемом 50 мл и хранить при температуре -20 °C.
- Перед началом эксперимента приготовьте две колбы Эрленмайера объемом 2 л 1x KH буфера, содержащего 1900 мл деионизированной воды, 100 мл 20x стокового буфера KH, 4,20 г NaHCO3 (25 мМ) и 3,96 г глюкозы (11 мМ).
- Поместите буферные колбы в водяную баню при температуре 37 °C и отравите раствор карбогеном (95% кислорода, 5% углекислого газа, расход 2 л/мин) с помощью воздушных камней (входной фильтр) в течение 5 минут, затем добавьте 2,8 мл 1 М CaCl2 (1,4 мМ). Продолжайте барботирование раствора в течение как минимум 1 ч до начала эксперимента. Использование воздушного камня способствует равномерной аэрации буфера.
- Поместите небольшой объем (~50 мл) буфера в круглую металлическую посуду при температуре -20 °C, чтобы он охладился и образовал слой ледяного буфера.
2. Подготовка контура перфузии
- Убедитесь, что все трубки и стеклянная посуда чистые, без видимого роста / загрязнения.
- Установите высоту стеклянных камер в соответствии с требуемым перфузионным давлением из расчета 1 смН2О, что эквивалентно 1,36 мм рт.ст.: Лангендорф к сердцу 100 см (приблизительно 75 мм рт.ст.), рабочая сторона к сердцу с предварительной нагрузкой 15 см (приблизительно 11 мм рт.ст.), камера от сердца до вспомогательной нагрузки 100 см (приблизительно 75 мм рт.ст.).
- Начните циркуляцию горячей воды вокруг контура не менее чем за 10 минут до перфузии сердца.
- Поместите фильтры из микрофибры (1,2 мкм) в держатели фильтров и плотно зафиксируйте их.
- Загрунтуйте контур буфером KH, убедившись, что весь воздух удален, и используйте зажим для трубки с регулированием потока для регулировки потока для регулировки расхода со стороны Лангендорфа (рис. 1A, B) до ~50 мл/мин. Более медленный поток облегчает канюляцию аорты и предотвращает смещение сердца перед перевязкой. Поместите термометр в контур с помощью Т-образного трубочного соединителя, чтобы контролировать температуру буфера на уровне ~37 °C.
3. Настройка программного обеспечения Lab Chart (анализ данных)
- Перед открытием программного обеспечения для анализа данных убедитесь, что Powerlab (система сбора данных) и расходомер включены и подключены к компьютеру.
- Откройте новый файл.
- Настройте сбор данных, выбрав раскрывающееся меню Настройки и выбрав Настройки канала. Выберите давление в аорте, поток в аорте и частоту сердечных сокращений (рисунок 2A).
- Настройте каждый канал в соответствии с настройками, показанными на рисунке 2B.
4. Подготовка животного к изоляции сердца крысы
ПРИМЕЧАНИЕ: Методология изоляции и перфузии сердца крысы для сердец без DBD и без DCD для холодного статического хранения изложена ниже. Методы включения сердца в контур перфузии относительно схожи независимо от того, какой метод донорства используется. Различия в протоколе донорства сердца крыс с помощью DBD и DCD в первую очередь проявляются с момента начала действия анестезии на животном до момента удаления сердца у животного.
- Взвесьте животное, следя за тем, чтобы его вес составлял >330 г. Идеальный диапазон веса для самцов крыс составляет 330-420 г.
- Введите внутрибрюшинную инъекцию кетамина (80 мг/кг) и ксилазина (10 мг/кг). Обеспечить адекватную хирургическую плоскость анестезии на основе отсутствия педального рефлекса (рефлекса пальцев ног) и рефлекса моргания глаз.
- Расположите животное в лежачем положении, закрепив конечности скотчем. Подавайте кислород животному через носовой конус.
- Имейте буферный металлический контейнер для льда и слякоти KH и небольшой металлический контейнер со льдом на станции вскрытия. Смочите марлю размером 7,5 см х 7,5 см в буфере КН и положите ее на емкость со льдом.
- Как только будет подтверждена адекватная хирургическая плоскость анестезии, побрейте кожу в месте хирургического разреза и очистите кожу асептическими средствами, такими как бетадин или 70% спирт. Сделайте боковой разрез поперек брюшной полости (лапаротомия) и сдвиньте желудок и кишечник в сторону, чтобы обеспечить доступ к левой почечной вене. Введите 1500 МЕ гепарина и надавите на место инъекции до тех пор, пока кровотечение не остановится. Подождите 1-2 минуты для циркуляции гепарина, прежде чем продолжить забор сердца.
- Откройте грудную полость, разрезав грудную клетку с любой стороны и разрезав диафрагму. Осторожно удерживайте и поднимайте блок сердца-легких во время разрезания вдоль нисходящей аорты, следя за тем, чтобы дуга аорты оставалась неповрежденной. Это позволит сохранить достаточную длину аорты для канюляции.
- Крысу усыпляют путем удаления сердца и легких, пока она находится под наркозом. Погрузите блок сердца и легких в буферную ледяную жижу KH, чтобы позволить сердцу остановиться.
5. Канюлирование сердца на изолированный рабочий контур перфузии сердца
- Перенесите блок сердца и легких в марлю на льду. Рассеките лишний жир вокруг аорты, обрежьте аорту так, чтобы оставить длину 3-5 мм для канюляции, и сделайте небольшой разрез ~1-2 мм в легочной артерии. Это позволит проложить путь для коронарного стока.
- Поместите обрезанный блок сердца и легких (еще находясь на льду) прямо под канюли. Отрегулируйте поток со стороны Лангендорфа с помощью зажима для трубки с контролем потока, чтобы облегчить канюляцию аорты. Осторожно наденьте аорту на левую канюлю, удерживайте ее черным зажимом и завяжите шелковым швом 2-0.
- Увеличьте расход за счет перфузии Лангендорфа, полностью открыв зажим трубки для регулирования потока. Откройте зажим для последующей нагрузки. Обеспечьте непрерывный поток из камеры Лангендорфа. Начните следить за сердечной деятельностью с помощью программного обеспечения.
ПРИМЕЧАНИЕ: если значение аортального потока на дисплее флоуметра составляет <10 мл/мин, убедитесь, что легочная артериотомия имеет достаточный размер. Низкий след/значение аортального потока также может указывать на то, что аортальная канюля была вставлена слишком далеко. - Отрегулируйте блок сердца и легких так, чтобы передняя поверхность легких была обращена к оператору. Перевяжите левую долю легкого шелковым швом 2-0 и отрежьте лишнюю левую легочную ткань. Завяжите оставшиеся доли легких одним махом шелковым швом 2-0 и разрежьте ткань. Поверните сердце так, чтобы перевязанные легкие были направлены к задней части.
- С помощью маленьких ножниц Ваннас отрежьте край левого предсердного придатка на 2-3 мм, следя за тем, чтобы было достигнуто небольшое отверстие в предсердии. Осторожно канюлейте ушок левого предсердия к левой канюле, зажмите его черным зажимом и завяжите шелковым швом 2-0. На рисунке 3А показано расположение обеих канюль.
- Отрегулируйте водяную рубашку камеры сердца так, чтобы сердце находилось в центре камеры.
- Откройте датчик давления на воздух и обнулите датчик давления в программном обеспечении, выбрав раскрывающееся меню «Давление в аорте» > Bridge Amp > Zero. Нажмите OK.
- Перфузируйте сердце в режиме Лангендорфа в течение 10 минут. Убедитесь, что скорость потока в аорте по Лангендоффу измеряется в пределах 10-20 мл/мин (идеальный показатель 20 мл/мин).
- Перед переключением рабочего режима убедитесь, что воздушный камень (надвижной входной фильтр) из буферного резервуара Langendorff KH находится в рабочем буферном резервуаре KH.
- Переключите сердце в рабочий режим, закрыв большой зажим, ведущий к аортальной канюле, и открыв поток, ведущий к ушку левого предсердия. Откройте трехходовой кран, ведущий от рабочего перфузата. Перенесите общую возвратную трубку (отводящую буфер KH обратно в резервуар) из резервуара Лангендорфа в рабочий резервуар.
- Перфузируйте сердце в рабочем режиме в течение 15 мин. Значения потока в аорте в идеале должны составлять >30 мл/мин в конце 15-минутной перфузии. Как только состояние сердца стабилизируется, начните записывать данные в программное обеспечение для анализа данных.
- Измеряйте коронарный сток (коронарный поток) через 1 мин, 5 мин, 10 мин и 15 мин.
ПРИМЕЧАНИЕ: Значения коронарного кровотока должны быть в пределах 10-20 мл/мин. Коронарный кровоток более 22 мл/мин обычно указывает на утечку, происходящую из неперевязанного легочного сосуда. Частота сердечных сокращений должна быть в пределах 200-300 уд/мин. Коронарные стоки могут быть собраны для последующего анализа маркеров повреждения тканей (например, тропонина-I, высвобождения лактатдегидрогеназы).
6. Введение кардиоплегии для холодового статического хранения сердца
- Заполните камеру кардиоплегии (расположенную на высоте 60 см для обеспечения перфузионного давления около 40 мм рт.ст.) 50 мл специального раствора для сохранения сердца (с добавкой или без нее).
- Опустите водяную рубашку и закройте трехсторонний кран со стороны режима работы.
- Остановите поток в направлении левой предсердной канюли, закрыв зажим.
- Откройте поток к канюле аорты.
- Закройте хомут со стороны Лангендоффа и на концевой нагрузке.
- Откройте зажим от линии кардиоплегии и смойте 15 мл кардиоплегии из линии давления. Закройте кран на напорной линии.
- Дайте сердцу промыться с помощью кардиоплегии через аортальную канюлю и соберите коронарные стоки. Запустите кардиоплегию в течение 3 минут и запишите объем введенной кардиоплегии.
- Остановите запись данных в программном обеспечении и сохраните файл.
- Через 3 минуты закройте кардиоплегический зажим и маленький синий зажим, ведущий к аортальной канюле.
- Поместите бульдожий зажим на аортальную канюлю и второй бульдожий зажим на левую канюлю. Отсоедините блок сердечной канюли от цепи и поместите его в стакан с кардиоплегией в холодильнике (рис. 3B, C).
- Храните сердце в холодильнике в течение 6 часов (или желаемого времени хранения в холодильнике).
7. Реперфузия сердца после хранения холодного статического электричества
- Подготовьте буфер KH в соответствии с разделом 1.
- Подготовьте контур перфузии в соответствии с разделом 2.
- Откройте сохраненный файл из базовой перфузии.
- Осторожно извлеките блок сердечной канюли из холодильника и закрепите его на контуре перфузии. Перед повторным подключением аортальной канюли используйте шприц с тупым концом 18 G, наполненный буфером KH, чтобы удалить воздух из канюли. Сначала подсоедините канюлю аорты, откройте зажим трубки со стороны Лангендорфа и убедитесь, что зажим трубки после нагрузки открыт.
- Повторно подключите канюлю левого предсердия, убедившись, что воздух был удален из канюли перед подключением к контуру перфузии. Держите зажим рабочей стороны закрытым до тех пор, пока не придет время переключиться с Лангендорфа на рабочий режим.
- Перфузируйте сердце в режиме Лангендорфа в течение 15 мин. Обязательно начните запись данных в начале реперфузии Лангендорфа.
- Перед переходом в рабочий режим поместите оба пузырьковых камня в буфер KH, откройте 3-ходовой кран с рабочей стороны и перенесите общие возвратные трубки в рабочий резервуар.
- Закройте белый зажим Лангендорфа, откройте белый рабочий боковой зажим и перфузируйте сердце на 30 минут. Измеряйте и собирайте коронарные стоки в определенные моменты времени для последующего анализа (например, маркеры сердечного повреждения). Обязательно остановите или перезапустите запись программного обеспечения, чтобы начать новый сегмент (или добавьте комментарий).
- Примерно через 15 минут работы реперфузии закройте трехсторонний кран.
- По окончании реперфузии сохраните файл с данными, остановите поток по цепи и отсоедините сердечную блокаду. Соберите образцы левого желудочка для гистологической обработки и/или заморозьте их для будущих исследований (например, экстракция белка для исследований вестерн-блоттинга).
- Снимите фильтры с держателей фильтров, слейте воду из буфера из контура и дважды промойте 5 л дистиллированной воды.
ПРИМЕЧАНИЕ: Хотя это и не обязательно, полезно предварительно подогреть дистиллированную воду в большой емкости на водяной бане.
8. Анализ функционального восстановления
- Откройте файл LabChart.
- Выделите область записи продолжительностью не менее 30 с, затем нажмите «Команда» > «Добавить выбор данных» ИЛИ «Многократное добавление к данным». Это добавит желаемые параметры в файл DataPad в программном обеспечении.
- Выберите выпадающее меню «Окно » > DataPad.
- Выделите и скопируйте значения восстановления из DataPad в электронную таблицу для функционального анализа восстановления. Рассчитайте функциональное восстановление в процентах от соответствующего базового значения 1,6,7.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Результаты исходной перфузии определят, был ли первоначальный эксперимент (предварительное хранение) успешным. Отток в аорте, отображаемый в режиме Лангендорфа, должен составлять от 14 до 22 мл/мин. Поток Лангендорфа отображается на расходомере в виде отрицательного значения из-за ретроградной перфузии аорты. Пример приемлемой кривой Лангендорфа показан на рисунке 4A.
После перевода в рабочий режим поток в аорте должен составлять не менее 30 мл/мин после того, как...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Учитывая чувствительный характер базовой функции сердца, необходимо позаботиться о том, чтобы перфузионная установка содержалась в чистоте и с совместимыми компонентами. Например, необходимо использовать правильную трубку из ПВХ. Некоторые материалы трубок, такие как силикон, могут способствовать снижению кровотока в аорте и сократительной способности, что может быть связано с потерей кислорода через трубку. Несмотря на то, что коммерчески доступны изолированные рабочие схемы перфузии се...
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
У авторов нет конфликта интересов, который можно было бы раскрыть.
Благодарности
Описанные здесь исследования были профинансированы за счет грантов, предоставленных.С. Макдональду от Национального совета по здравоохранению и медицинским исследованиям Австралии, Фонда клиники Святого Винсента и гранта старшего исследователя NSW Health Health Cardiovascular Research Capacity.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 1,5 мл бесцветная трубка Eppendorff, 1000 в коробке | Bio Strategy Pty Ltd | 0030.125.150 | |
| 15 мл цент/трубки (S) Втулка/25 PP ctn/500 | Sigma-aldrich Pty Ltd | CLS430791-500ea | |
| BP Преобразователь/кабель Комплект | ADInstruments | MLT1199 | |
| Data Acquisition Bridge | Amp ADInstruments | FE221 | Data Acquisition |
| Carbogen 555G2 | BOC | BOC002 | |
| Термометр Checktemp1 | Hanna Instruments | HI98509 | Зажим для строительства буровой установки |
| Зажим 1/4-7/16 PK 12 | Thomas Scientific | 2848Y40 | Зажим для строительства буровой установки |
| с удлинителем стебля Med. | Thomas Scientific | 8847T08 | Зажим для строительства буровой установки |
| с удлинительным штоком см. | Thomas Scientific | 8847T02 | Монтажная установка |
| Строительные зажимы, сосуд, 60 г Давление | Coherent Scientific | 14121 | Хирургическое оборудование |
| Закрытый соединитель | Thomas Scientific | 8847E25 | Конструкция буровой установки |
| Covidien Sofsilk 2-0 черный предварительно разрезанный 45 см коробка из 24 | специализированных медицинских принадлежностей | S195 | Хирургические расходные материалы |
| Изготовленный на заказ Дегазатор с оболочкой 250 мл | Изготовленная на заказ выдувная стеклянная посуда Pty Ltd | N/A | Строительство буровой установки |
| на заказ Изготовленный на заказ резервуар объемом 750 мл | Изготовленная на заказ выдувная стеклянная посуда Pty Ltd | N/A | Конструкция буровой установки |
| D-(+)-глюкоза безводная SigmaUltra | Sigma-aldrich Pty Ltd | G7528-1Kg | Для изготовления двухканальной консоли Krebs Buffer |
| TS402 | Data Acquisition | ||
| Erlenmyer flasks 2 L | |||
| Фильтр Микрофибра тип GF/C стекловолокно 47 мм, 100 | Bio-strategy Pty Ltd | 1822047 | |
| Щипцы, 15 см, 0,3 мм, CRVD | Coherent Scientific | 14114 | Хирургическое оборудование |
| Четырехзубые зажимы с рукой длиной 9 мм x 115 мм для удержания предметов диаметром 2-70 мм. Циркуляционный циркуляционный насос с виниловым покрытием | Met-App Australia Pty Ltd | 1352 | Буровая установка для строительства |
| термостата. Цифровое твердотельное управление. (1020 Вт/240 Вольт) | Thermoline Scientific | TU3 | Rig Construction |
| Heparin 5000 U/5 мл бокс 50 Pfizer 02112115 | Clffird Hallam Healthcare Pty Ltd | 1258693 | препараты |
| Ilium Xylazil 20 inj 50 мл | Cenvet Australia Pty Ltd | X5010 | Анестетик |
| Johns Hopkins Bulldog Clamp | Coherent Scientific | CS-WPI-14117 | |
| Кетамин 100 мг/50 мл | Provet (NSW) Pty Ltd | KETAI1 | Анестетик |
| сульфата магния гептагидрат AR 500 г Chemsupply | Bio Strategy Pty Ltd | MA048-500g | Для изготовления буфера Krebs |
| Папа/Мама Шарнирный адаптер | Thomas Scientific | 8847V08 | Буровая установка |
| Masterflex L/S Легкая нагрузочная головка для прецизионных трубок, PPS, ротор | CRSJohn Morris | 1015164 | Rig Construction |
| Ножницы Метценбаума, 11,5 см изогнутые | Coherent Scientific | WPI-501748 | Хирургическое оборудование |
| Ножницы Метценбаума, 14,5 см прямые | Coherent Scientific | WPI-501252 | Крепежные приспособления для хирургического оборудования |
| F/2-HEADS SS | John Morris | 1014414 | Крепежные винты для головок насосов |
| Открытый соединитель | Thomas Scientific | 8847E05 | Буровая установка |
| Параформадегид | Sigma-Aldrich | P6148-500G | Обработка образцов |
| Хлорид калия (AnalaR NORMAPUR) 500 г | VWR Chemicals | 26764.26 | Для изготовления буфера Krebs |
| Фосфат калия одноосновный | Sigma-Aldrich Pty Ltd | P5379-500g | Для изготовления буфера Krebs |
| Powerlab 2/26, 2-канальный рекордер + программное обеспечение Labchart программное обеспечение | ADInstruments | ML826 | Компьютерное оборудование и программное обеспечение |
| Precision XN Встроенный датчик расхода, 3,2 мм (1/8")ID ME4PXN-KR37 XF | ADInstruments | ME4PXN | Rig Construction |
| Скальпель с ручкой одноразовый #11 pkt/10 | BSN Medical (Aust) Pty Ltd | 73252-36 | |
| Силиконовая прокладка для Swinnex 47 мм 5/PK | Merck Millipore | SX0004701 | Rig Construction |
| Силиконовое уплотнительное кольцо 5-329 10/PK | Merck Millipore | XX1104707 | Rig Construction |
| Single Buret Clamp | Thomas Scientific | 8847T32 | Rig Construction |
| Съемное входное отверстие Фильтр размер пор 10 &; m (bubbler) | Sigma-aldrich | 59277 | Rig Construction |
| Sm. 360 Вращательный соединитель | Thomas Scientific | 8847E35 | Rig Construction |
| Бикарбонат натрия | Sigma-Aldrich Pty | Ltd S6297 - 250g | Для изготовления буфера Krebs |
| Swinnex Filter Holder, 47 мм | Merck Millipore | SX0004700 | Rig Construction |
| шприцы 1 мл коробка/100 | Becton Dickinson Pty Ltd | 302100 | |
| Трехзубцовые зажимы с диаметром 9 мм x длиной 125 мм и двойным винтом для удержания 5-80 мм | Met-App Australia Pty Ltd | 1356 | Модуль |
| расходомера трубок TS410 | ADInstruments | TS410 | Трубка для сбора данных |
| ПВХ 6,35 мм ID x 9,52 мм Наружный диаметр 50 футов Рулон 15,24 м, прозрачный, без фталатов DEHP, пищевой соответствует REAC | Thermo Fisher | NAL 8701-0600 | Строительство буровой установки |
| Трубка ПВХ 7,94 мм ID x 11,1 мм Наружный диаметр 50 футов Рулон 15,24 м, прозрачный, DEHP без фталатов, пищевой сорт соответствует REAC | Thermo Fisher | NAL 8701-0900 | Буровая |
| конструкция Трубка ПВХ 9,52 мм ID x 12,7 мм Наружный диаметр 100 футов Рулон | Thermo Fisher | NAL 8701-4120 | Буровая установка Ванна |
| ножницы, 8,5 см, прямые, 7 мм лезвия | Coherent Scientific | WPI-500-086 | Хирургическое оборудование |
| Водяная баня 30 литров с подвесным поддоном | Thermoline Scientific | TLWB-30 | Rig Construction |
Ссылки
- Kwan, J. C., Gao, L., Macdonald, P. S., Hicks, M. Cardio-protective signalling by glyceryl trinitrate and cariporide in a model of donor heart preservation. Heart Lung Circ. 24 (3), 306-318 (2015).
- Watson, A. J., et al. Enhanced preservation of the rat heart after prolonged hypothermic ischemia with erythropoietin-supplemented Celsior solution. J Heart Lung Transplant. 32 (6), 633-640 (2013).
- Chew, H. C., et al. Outcomes of donation after circulatory death heart transplantation in Australia. J Am Coll Cardiol. 73 (12), 1447-1459 (2019).
- Dhital, K. K., et al. Adult heart transplantation with distant procurement and ex-vivo preservation of donor hearts after circulatory death: a case series. Lancet. 385 (9987), 2585-2591 (2015).
- Joshi, Y., et al. Heart transplantation from DCD donors in Australia: Lessons learned from the first 74 cases. Transplantation. 107 (2), 361-371 (2023).
- Villanueva, J. E., et al. Functional recovery after dantrolene-supplementation of cold stored hearts using an ex vivo isolated working rat heart model. PLoS One. 13 (10), e205850(2018).
- Villanueva, J. E., et al. The cardioprotective potential of the sodium-glucose cotransporter 2 inhibitor empagliflozin in donor heart preservation. J Heart Lung Transplant. 39 (10), 1151-1153 (2020).
- Gao, L., et al. Critical role of the STAT3 pathway in the cardioprotective efficacy of zoniporide in a model of myocardial preservation - the rat isolated working heart. Br J Pharmacol. 162 (3), 633-647 (2011).
- Cropper, J. R., Hicks, M., Ryan, J. B., Macdonald, P. S. Cardioprotection by cariporide after prolonged hypothermic storage of the isolated working rat heart. J Heart Lung Transplant. 22 (8), 929-936 (2003).
- Gao, L., et al. Enhanced functional recovery of the heart donated after circulatory death determination with antemortem heparin. J Heart Lung Transplant. 39 (6), 607-609 (2020).
- Villanueva, J. E., et al. The effect of increasing donor age on myocardial ischemic tolerance in a rodent model of donation after circulatory death. Transplant Direct. 7 (6), e699(2021).
- Kumarasinghe, G., et al. Improved heart function from older donors using pharmacologic conditioning strategies. J Heart Lung Transplant. 35 (5), 636-646 (2016).
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
