Здесь мы опишем методы нанесения татуировки взрослой особи Xenopus laevis (африканская когтистая лягушка) с помощью ротационной тату-машинки. Правильная татуировка приводит к темным, легко читаемым цифрам, которые сохраняются в течение нескольких месяцев и делают животных легко различимыми для исследований и ведения учета.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Методы нанесения татуировки Xenopus laevis с помощью ротационной тату-машинки
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Животные модели расширяют сферу биомедицинских исследований, углубляя наше понимание биологии развития, молекулярной и клеточной биологии и позволяя исследователям моделировать болезни человека. Регистрация и отслеживание отдельных животных позволяет исследователям сократить количество животных, необходимых для исследования, и усовершенствовать методы для улучшения благополучия животных. Существует несколько хорошо задокументированных методов маркировки и отслеживания млекопитающих, включая пробивание ушей и ушные бирки. Тем не менее, методы маркировки водных видов амфибий ограничены, а существующие ресурсы устарели, неэффективны или непомерно дороги. В этой рукописи мы описываем методы и лучшие практики маркировки Xenopus laevis с помощью ротационной тату-машинки. Правильная татуировка приводит к получению высококачественных татуировок, что делает людей легко различимыми для исследователей и представляет минимальный риск для здоровья животных. Мы также выделяем причины некачественных татуировок, результатом которых могут стать татуировки, которые быстро выцветают и причиняют ненужный вред животным. Такой подход позволяет исследователям и ветеринарам маркировать амфибий, что позволяет им отслеживать биологические репликации и трансгенные линии, а также вести точные записи о здоровье животных.
Введение
Животные модели являются полезными инструментами для исследования вопросов, относящихся к здоровью человека. На практике биомедицинские исследования на животных моделях требуют тщательной организации и содержания здоровой колонии животных. Передовые методы этичного обращения с животными и их содержания направлены на сокращение количества животных, необходимых для экспериментов, и совершенствование методов обеспечения благополучия животных1. Род когтистых лягушек, включая Xenopus laevis (X. laevis; Африканская когтистая лягушка) и Xenopus tropicalis (X. tropicalis; Западная когтистая лягушка) использовались в ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Все описанные процедуры для животных были одобрены Комитетом по институциональному уходу за животными и их использованию Дартмутского колледжа.
1. Настройка оборудования
ПРИМЕЧАНИЕ: В комплект входят рабочий процесс для процедуры и пример настройки стенда (Рисунок 1).
- Подключите тату-пистолет и ножную педаль к источнику питания. Расположите ножную педаль под рабочей поверхностью.
- Сборка тату-пистолета
- С помощью шестигранного ключа или шестигранной отвертки ослабьте винты в рукоятке (рисунок 2A, обведен красным ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Высококачественные татуировки будут иметь темные, разборчивые штрихи на груди лягушки и могут быть четко различимы с расстояния в несколько футов (Рисунок 5А). В целом, более крупные цифры и маркировки лучше для удобочитаемости, но более длинные имена и номера можно сделать меньше, чтобы они удобно помещались на груди лягушки. О долговечности татуировки судить сложнее, но качественные татуировки лягушки должны оставаться темными и разборчивыми не менее 3-6 месяцев (рисун.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Татуировка людей — это форма искусства, насчитывающая тысячи лет, и до тех пор, как люди татуируют себя, они также татуируют или клеймят животных. Оборудование и методы маркировки животных, особенно млекопитающих, хорошо зарекомендовали себя, хорошо задокументированы и широко доступны. В то время как маркировка животных первоначально предназначалась для различения домашнего скота и предотвращениякраж23, ее роль в биомедицинских исследованиях стала не менее важной.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.
Благодарности
Мы благодарим Центр сравнительной медицины и исследований Дартмутского колледжа за обеспечение ежедневного содержания животных, используемых в этом протоколе. Мы также благодарим Лию Джейкоб и Адвайту Бозе за помощь в тестировании протокола и фотографировании животных. Наконец, мы благодарим лабораторию Энн Миллер за обучение практике татуировки. Эта работа была поддержана грантом NIH R00 GM147826 J.L.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 3-игольчатые круглые вкладыши | Worldwide Tattoo Supply | 1203RLB | Упакованные стерильные |
| 5-игольчатые круглые одноразовые ULTRA | Worldwide Tattoo Supply | HTIPRS5-U | Упакованные стерильные |
| 5-игольчатые круглые вкладыши | Worldwide Tattoo Supply | 1205RLB | Упакованные стерильные |
| 7-игольчатые круглые вкладыши | Worldwide Tattoo Supply | 1207RLB | Упакованные стерильные |
| Зажимной шнур | Worldwide Tattoo Supply | N/A | |
| Ножная педаль | Worldwide Tattoo Supply | N/A | |
| Inkpots | Worldwide Tattoo Supply | N/A | |
| Kimwipes, салфетки для деликатных задач | Fisher Scientific | 06-666A | |
| RCA Connection | Worldwide Tattoo Supply | N/A | |
| Scream Ink Pitch Black, 1oz | Worldwide Tattoo Supply | SI101 | |
| Sodium bicarbonate (NaHCO3) | Sigma-Aldrich | S5761 | |
| Рукоятки из нержавеющей стали | Worldwide Tattoo Supply | N/A | |
| Stealth 2.0 Rotary Tattoo Machine | Worldwide Tattoo Supply | N/A | |
| Stealth 2.0 Rotary Tattoo Machine Box Set | Worldwide Tattoo Supply | STEALTH2-SET | |
| Остров пенополистирола | Н/Д | Н/Д | Это крышка контейнера для холодной транспортировки пенополистирола |
| Трикаин (этил3-аминобензонат метансульфат) | Sigma-Aldrich | E10521 | ВНИМАНИЕ: РАЗДРАЖАЮЩИЙ |
| Неотбеленные бумажные полотенца | Грейнджер | 2U229 | Бумажные полотенца ДОЛЖНЫ быть неотбеленными, отбеливатель токсичен для амфибий |
| Напряжение Источник питания | Worldwide Tattoo Supply | Н/Д | |
| Бутылка для мытья (с безопасной для лягушек водой) | Fisher Scientific | FB0340923T | Frog безопасная вода дехлорирована, pH 7,0-8,5, проводимость 1200-1800 мк |
| <эм> X. laevis взрослая самка | Xenopus1 | н/д | |
| Пластиковый пакет на молнии | н/д н | /д | Этот мешок должен быть достаточно большим, чтобы вместить остров из пенополистирола |
Ссылки
- Hubrecht, R. C., Carter, E. The 3Rs and humane experimental technique: Implementing change. Animals (Basel). 9 (10), 754(2019).
- Elkan, E. R. The Xenopus pregnancy test. British Med J. 2, 1253-1256 (1938).
- Vize, P. D., Zorn, A. M.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
