Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Оценка механизма применения традиционного травяного сиропа для лечения анемии с использованием метаболомики печени

669 просмотров

⸱

DOI:

10.3791/67225

⸱

30 августа 2024 г.

 ,  ,  , 
1School of Basic Medical Sciences, Hubei University of Chinese Medicine, 2School of Chinese Materia Medica, Guangdong Pharmaceutical University, 3Xinjiang Uygur Pharmaceutical Co., Ltd.

В этой статье

Краткое содержание

Это исследование в первую очередь знакомит с применением метаболомики печени в изучении эффективности сиропа Ши-Лю-Бу-Сюэ в лечении анемии.

Аннотация

Как известное уйгурское лекарство, сироп Ши-Лю-Бу-Сюэ (SLBXS) широко используется для лечения анемии в Китае уже более 20 лет. Тем не менее, основные механизмы его эффективности в лечении анемии остаются неясными. В этом исследовании метаболомика печени в первую очередь использовалась для определения потенциальных регуляторных механизмов SLBXS при лечении анемии. Было проведено профилирование метаболомики печени для характеристики механизма действия SLBXS в мышиной модели анемии, индуцированной ацетилфенилгидразином. Было показано, что SLBXS снижает индекс печени, количество лейкоцитов и количество тромбоцитов, одновременно увеличивая количество эритроцитов, гемоглобина и гематокрита. Основные мишени были выбраны для верификации с помощью вестерн-блоттинга. SLBXS продемонстрировал значительный терапевтический эффект при анемии, в первую очередь, за счет регуляции метаболизма галактозы и сигнального пути HIF-1, о чем свидетельствует подавление белков HIF-1α, NOS3, VEGFA и GLA в тканях печени анемичных мышей. Это исследование проясняет потенциальные регуляторные механизмы метаболизма печени при введении SLBXS при лечении анемии.

Введение

Анемия является насущной и распространенной глобальной проблемой здравоохранения, затрагивающей 25% населения мира и людей всех возрастов, особенно подростков и беременных женщин 1,2,3. Он связан с повышенным риском преждевременных родов и материнской смертности и может привести к нарушениям физического развития и нарушению сердечно-сосудистой деятельности4. Это состояние также может негативно сказаться на состоянии здоровья подростков, приводя к инфекциям и сердечной недостаточности5. Современные методы лечения в основном включают переливание крови, добавки железа и терапию эритропоэтином. Тем не менее, эти методы лечения имеют недостатки и неблагоприятные побочные эффекты, такие как анафилаксия, расстройство желудочно-кишечного тракта, перегрузка железом и крапивница. Поэтому определение эффективных препаратов с меньшим количеством побочных эффектов для лечения анемии имеет решающее значение.

Традиционная китайская медицина, в том числе уйгурская, предлагает ряд преимуществ, таких как многокомпонентные составы, многоцелевые эффекты, многозвенные взаимодействия и меньшее количество побочных эффектов в профилактике и лечении многофакторных заболеваний. Сироп Ши-Лю-Бу-Сюэ (SLBXS) является известным традиционным средством в уйгурской медицине, используемым для тонизирования крови и производства крови. Он признан препаратом, регулирующим кровь, который может снизить температуру печени и был включен в рекомендации по клиническому использованию препаратов меньшинств для лечения анемии. Он также лицензирован Китайским государственным управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (Z20026094)6,7,8. За последние два десятилетия SLBXS широко использовался в Китае для лечения заболеваний, связанных с анемией. Тем не менее, его потенциальные механизмы лечения анемии остаются неизвестными и требуют дальнейшего изучения. Метаболомика, изучающая динамические метаболические реакции биологических систем на болезни, лекарственные вмешательстваили условия окружающей среды, все чаще используется для выяснения механизмов действия традиционной китайской медицины путем оценки изменений метаболических биомаркеров в биологических образцах после внешних стимулов.

Соответственно, в этом исследовании был принят подход к метаболомике печени для определения основных терапевтических механизмов SLBXS при лечении анемии. Во-первых, была создана мышиная модель анемии, индуцированная ацетилфенилгидразином (APH). Затем были исследованы метаболические пути эндогенных метаболитов с использованием метаболомики печени с помощью газовой хромато-масс-спектрометрии (ГХ-МС) и методов многомерных данных после введения SLBXS. Наконец, ключевые мишени были проанализированы экспериментально, чтобы выяснить антианемические эффекты и молекулярные механизмы SLBXS.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все экспериментальные процедуры были одобрены Комитетом по этике лабораторных животных Хубэйского университета китайской медицины (HBUCMS201912015). Самцов мышей C57BL/6 (вес 20-22 г) содержали в специальном помещении, свободном от патогенов, с относительной влажностью 50%-60% и температурой 22 °C ± 2 °C, подвергали 12-часовому световому/12-часовому темному циклу и обеспечивали свободный доступ к пище и воде. Перед началом эксперимента всем мышам дали одну неделю на акклиматизацию к окружающей среде. Мыши были случайным образом распределены в одну из следующих четырех групп (n = 12): контрольная, модельная, сироп Fu-Fang-E-Jiao (FFEJS, положительный препарат, вводимый внутрижелудочно в дозе 7,8 мл/кг) и SLBXS (вводимый внутрижелудочно в дозе 11,7 мл/кг). Мыши в контрольной и модельной группах получали равные объемы физиологического раствора. Мышам во всех группах вводили соответствующие препараты внутрижелудочно один раз в сутки в течение 2 недель. Подробная информация о лекарственных препаратах, реактивах и оборудовании, использованных в этом исследовании, приведена в Таблице материалов.

1. Установление модели анемии у мышей

  1. Взвесьте 2 г ацетилфенилгидразина (АПГ) с помощью электронных весов и переложите его в стакан объемом 150 мл. Добавьте 100 мл физиологического раствора и перемешайте стеклянной палочкой до полного растворения APH.
  2. Устанавливают мышиную модель анемии путем подкожного введения 2% АПГ, приготовленного на шаге 1.1, на1-й,4-й и7-й дни в дозах 200 мг/кг, 100 мг/кг и 100 мг/кг соответственно11.
    Примечание: Начиная с первого дня, мышам в группах FFEJS (7,8 мл/кг) и SLBXS (11,7 мл/кг) вводили внутрижелудочное введение один раз в день в течение 2 недель. Мыши в контрольной и модельной группах получали равные объемы физиологического раствора один раз в день в течение 2 недель.

2. Определение печеночного индекса

  1. В конце эксперимента взвесьте каждую мышь с помощью электронных весов.
  2. Обезболите мышей, вдыхая 2% изофлуран. Сожмите глазное яблоко мыши, чтобы оно стало гиперемированным и выступающим. Быстро удалите глазное яблоко с помощью щипцов и соберите кровь в гепаринизированные пробирки для образцов.
  3. Закрепите мышей под наркозом из шага 2.2 на пластине для хирургических манипуляций.
  4. Сделайте скальпелем полный разрез по средней линии живота. Тщательно препарируйте и изолируйте неповрежденную ткань печени12, затем измерьте ее вес с помощью электронных весов.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Индекс печени каждой мыши рассчитывается по следующей формуле: Индекс печени = масса печени/масса тела.

3. Гематологический анализ

  1. Осторожно встряхните пробирку, содержащую образец гепаринизированной крови, начиная с шага 2.2, чтобы предотвратить свертывание крови.
  2. Поместите образец крови под иглу для инъекций, чтобы убедиться, что она полностью погружена в иглу.
  3. Нажмите кнопку «Автоматическое обнаружение », чтобы измерить количество эритроцитов (RBC), гематокрита (HCT), количество лейкоцитов (WBC), гемоглобина (HGB) и количество тромбоцитов (PLT) с помощью полностью автоматического анализатора гемоцитов.

4. Исследование метаболомики печени

  1. Подготовка образцов печени
    1. Гомогенизируйте образцы тканей печени (50 мг) на этапе 2.4 1 мл предварительно охлажденного метанола. Центрифугируйте при давлении 18 759 x g в течение 10 минут при 4 °C для удаления осадка.
    2. Перелейте 200 мкл надосадочной жидкости во флакон с образцом с помощью пипетки и вакуумируйте в сублимационной сушилке при температуре 35 °C в течение 2 часов.
    3. Провести реакцию на высушенных образцах с 40 мкл 40 мг/мл раствора метоксиамина гидрохлорида в пиридине в течение 90 мин при 30 °С. Затем добавьте 80 мкл N-метил-N-(триметилсилил)трифторацетамида (MSTFA) с 1% триметилхлорсиланом (TMCS) и инкубируйте в течение 60 минут при 37 °C.
    4. Добавьте в флакон 10 мкл н-гексана, чтобы завершить реакцию дериватизации.
  2. Метаболический анализ печени
    1. Анализируйте дериватизированные образцы (1 μл) с помощью системы ГХ-МС. Отделить производные с помощью капиллярной колонки DB-5MS (30 м × 0,25 мм × 0,25 мкм).
      ПРИМЕЧАНИЕ: Условия программы температуры печи были установлены следующим образом: 60 °C в течение 1 мин; увеличить до 325 °C со скоростью 10 °C/мин и выдержать в течение 10 мин. Температура инжектора, источника ионов и MS была установлена на 250 °C, 230 °C и 150 °C соответственно. В качестве газа-носителя использовался гелий (99,999%) с расходом 1,1 мл/мин, а коэффициент разделения был установлен на 10:1. Использовалась энергия электронного пучка 70 эВ и время задержки растворителя 5,9 мин.
  3. Обработка и анализ данных
    1. Получение и преобразование необработанных данных GC-MS с помощью совместимого программного обеспечения MassHunter.
    2. Проведение спектрального анализа с использованием инструмента Автоматизированная масс-спектральная система деконволюции и идентификации (AMDIS)12.
    3. Определите все метаболиты с помощью баз данных NIST и HMDB (см. Таблицу материалов).
    4. Импортируйте данные в инструмент MetaboAnalyst для частичного дискриминантного анализа по методу наименьших квадратов (PLS-DA), t-критериев, анализа путей и сетевого анализа12.

5. Вестерн-блоттинг

  1. Извлекайте общее количество белков из ткани печени мыши
    1. Добавьте 50 мг ткани печени с шага 2.4 и 250 мкл клеточного лизата в стеклянный гомогенизатор объемом 1 мл и измельчите на льду в течение 5 минут.
    2. Перенесите гомогенат ткани печени с этапа 5.1.1 в микроцентрифужную пробирку объемом 1,5 мл с помощью пипеттора и центрифугируйте при 18 759 x g в течение 10 мин при 4 °C. Затем перенесите надосадочную жидкость в новую пробирку объемом 1,5 мл с помощью пипеттора.
  2. Определение концентраций белка и предварительная обработка образцов белка
    1. Добавьте 2 мкл надосадочной жидкости из стадии 5.1.2, 18 мкл PBS и 180 мкл рабочего раствора BCA в 96-луночный микротитровальный планшет8.
    2. Покачайте пластину на осцилляторе в течение 30 с, оставьте на 30 мин при температуре 37 °C и определите поглощение на длине волны 562 нм с помощью считывателя микропланшетов.
  3. Отделите общее количество белков с помощью SDS-PAGE, перенесите на мембраны из поливинилиденфторида и заблокируйте 5% обезжиренного молока8.
  4. Инкубируйте мембраны с этапа 5.3 с первичными антителами против HIF-1α (1:1000), VEGFA (1:1000), GLA (1:1000), NOS3 (1:1000) и β-актина (1:5000) в течение ночи при 4 °C.
  5. Поместите мембраны из этапа 5.4 в инкубационный бокс для антител, добавьте 10 мл TBST и горизонтально встряхните при 111 x g при комнатной температуре, чтобы смыть несвязанные первичные антитела три раза в течение 5 мин каждый.
  6. Добавьте по 200 мкл козьего антикроличьего IgG (H + L)-HRP (1:1000) в каждую мембрану с шага 5,5 и инкубируйте в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем повторите шаг 5.5, чтобы смыть несвязанное вторичное антитело (козий антикроличий IgG (H + L)-HRP).
  7. Добавьте 200 мкл сверхвысокочувствительного хемилюминесцентного раствора ECL на поверхность каждой мембраны из шага 5.6 и немедленно визуализируйте белковые полосы с помощью автоматической системы анализа хемилюминесценции.

6. Статистический анализ

  1. Анализируйте данные с помощью статистического и графического программного обеспечения с односторонним ANOVA с последующим тестом Тьюки.
  2. Представьте результаты в виде среднего значения ± стандартного отклонения (SD) и примите значение P, < 0,05, как статистически значимое.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Для подтверждения успешного создания мышиной модели анемии и анализа влияния SLBXS на анемию сначала были исследованы индекс печени и гематологические показатели. На рисунке 1 показано, что в модельной группе наблюдалось значительное снижение (P < 0,01) количества эритроцитов (RBC), гемоглобина (HGB) и гематокрита (HCT) по сравнению с контрольной группой. И наоборот, индекс печени, количество лейкоцитов (WBC) и количество тромбоцитов (PLT) в модельной группе были заметно выше (

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Анемия является распространенным заболеванием, поражающим многих людей во всем мире, особенно в развивающихся странах1. В Китае пациенты часто используют традиционную китайскую медицину, в том числе уйгурскую, для облегчения признаков и симптомов анемии. SLBXS – уйгурская медицина, которая используется в клинической практике уже много лет; Тем не менее, точный механизм его действия против анемии остается плохо изученным13. В этом исследован...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Эта работа была поддержана Специальным планом обучения талантов в области науки и техники из числа меньшинств, Фондом естественных наук Синьцзян-Уйгурского автономного района (2020D03021), Фондами ключевой программы по традиционной китайской медицине Хубэйского университета китайской медицины (2022ZZXZ004) и Программой инновационной группы Тяньшаня (2020D14030).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
АцетилфенилгидразинShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.
Автоматическая система анализа хемилюминесцентной визуализацииShanghai Tanon Life Science Co., Ltd.Tanon-5200
Набор для анализа бицинхониновой кислотыThermoFisher ScientificQPBCA-1KT
Капиллярная колонкаAgilent J& W Scientific, Agilent Technologies, Inc.DB-5MS
Буфер для лизиса клеток для Western и IPBeyotime BiotechnologyP0013
ChlorotrimethylsilaneShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.
Электронные весыMettler-Toledo International Inc.ME203E
Электронные весыMettler-Toledo International Inc.LE104E
Сироп Fu-Fang-E-Jiao DongE E Jiao Co., Ltd.
Полностью автоматический анализатор гемоцитовShenzhen Mindray Animal Care Technology Co., Ltd.Система IDEXX ProCyte Dx
GC-MS AgilentTechnologies, Inc.7890B-5977B 
Первичное антитело GLABioworld TechnologyBS77041
Гомогенизатор стеклаShanghai Lei Gu Instruments Co., Ltd.B-013001
Стеклянный стержень Шанхай Лей Гу Инструментс Ко., Лтд.B-003904
Программное обеспечение GraphPad Prism  GraphPad, La JollaVersion 9.0
Гепаринизированные пробирки для образцовChangde BKMAM Biotechnology Co., Ltd.B-ACT1P5
HIF-1α первичное антителоBioworld TechnologyBS3514
HMDB база данных http://www.hmdb.ca/—
ИзофлуранHebei Jindafu Pharmaceutical Co., Ltd.
Самец C57BL/6 мышейLiaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd.Нет. SCXK [Ляо] 2015-0001
MassHunterAgilent Technologies, Inc.B.08.00
MetaboAnalyst 5.0https://www.metaboanalyst.ca/—
Метоксиамина гидрохлоридShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.
н-гексанаShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.
База данных C14878803 NISThttp://webbook.nist.gov/chemistry/—
Первичное антитело NOS3Bioworld TechnologyBS3625
PyridineShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd.
Солевой растворBIOSHARP LIFE SCIENCES
сироп Ши-Лю-Бу-СюэСиньцзян Уйгур Фармасьютикал Ко., Лтд.
Хирургическая манипуляционная пластинаDIXSGZK-JPB-A
VEGFA первичное антителоBioworld TechnologyAP0742
β-актинABclonal (Shanghai) Trading Co., Ltd.АС026
C13979660C10481421402003120231202E1818113C13026996 2308262009 211277

Ссылки

  1. Munoz, M., Gomez-Ramirez, S., Bhandari, S. The safety of available treatment options for iron-deficiency anemia. Expert Opin Drug Saf. 17 (2), 149-159 (2018).
  2. Soliman, A. T., De Sanctis, V., Yassin, M., Wagdy, M., Soliman, N. Chronic anemia and thyroid function. Acta Biomed. 88 (1), 119-127 (2017).
  3. Pivina, L., Semenova, Y., Dosa, M. D., Dauletyarova, M., Bjorklund, G. Iron deficiency, cognitive functions, and neurobehavioral disorders in children. J Mol Neurosci. 68 (1), 1-10 (2019).
  4. Lumbiganon, P., et al. Indirect causes of severe adverse maternal outcomes: a secondary analysis of the WHO Multicountry Survey on Maternal and Newborn Health. BJOG. 121 (Suppl 1), 32-39 (2014).
  5. Shaddy, R. E., et al. Systematic literature review on the incidence and prevalence of heart failure in children and adolescents. Pediatr Cardiol. 39 (3), 415-436 (2018).
  6. China Medical Association of Minorities. Guidelines for clinical use of minority drugs. , Chinese Press of Traditional Chinese Medicine. Beijing. (2018).
  7. Yu, W. Q. Clinical efficiency of Pomegranate blood-enriching syrup in the treatment of iron deficiency anemia. J Med Pharm Chin Minor. 26 (11), 11-12 (2020).
  8. Zhang, D. N., et al. Mechanism of Shiliu Buxue Syrup for anemia using integrated metabolomics and network pharmacology. Anal Biochem. 653, 114774(2022).
  9. Nielsen, J. Systems biology of metabolism. Annu Rev Biochem. 86, 245-275 (2017).
  10. Wang, M., et al. Metabolomics highlights pharmacological bioactivity and biochemical mechanism of traditional Chinese medicine. Chem Biol Interact. 273, 133-141 (2017).
  11. Ben, C. N. Establishment and experimental research of "Blood Deficiency" animal model. Lab Animal Sci. (03), 5-10 (1994).
  12. Cao, S., et al. Integrative transcriptomics and metabolomics analyses provide hepatotoxicity mechanisms of asarum. Exp Ther Med. 20 (2), 1359-1370 (2020).
  13. Yang, H. Y., Liu, M. L., Luo, P., Yao, X. S., Zhou, H. Network pharmacology and metabolomics in the study of traditional Chinese medicine for cardiovascular diseases. Phytomedicine. 104, 154268(2022).
  14. Croci, S., Pedrazzi, G., Passeri, G., Piccolo, P., Ortalli, I. Acetylphenylhydrazine induced haemoglobin oxidation in erythrocytes studied by Mossbauer spectroscopy. Biochim Biophys Acta. 1568 (1), 99-104 (2001).
  15. Liebowitz, J., Cohen, G. Increased hydrogen peroxide levels in glucose 6-phosphate dehydrogenase deficient erythrocytes expose to acetylphenylhydrazine. Biochem Pharmacol. 17 (6), 983-988 (1968).
  16. Tarasenko, T. N., McGuire, P. J. The liver is a metabolic and immunologic organ: A reconsideration of metabolic decompensation due to infection in inborn errors of metabolism (IEM). Mol Genet Metab. 121 (4), 283-288 (2017).
  17. Topalovic, A., Knezevic, M., Gacnik, S., Mikulic-Petkovsek, M. Detailed chemical composition of juice from autochthonous pomegranate genotypes (Punica granatum L.) grown in different locations in Montenegro. Food Chem. 330, 127261(2020).
  18. Legua, P., et al. Total phenols and antioxidant capacity in 10 Moroccan pomegranate varieties. J Food Sci. 77 (1), C115-C120 (2012).
  19. Rodrigo, R., Miranda, A., Vergara, L. Modulation of endogenous antioxidant system by wine polyphenols in human disease. Clin Chim Acta. 412 (5-6), 410-424 (2011).
  20. Hussain, T., et al. Oxidative stress and inflammation: What polyphenols can do for us. Oxid Med Cell Longev. 2016, 7432797(2016).
  21. Sudheesh, S., Vijayalakshmi, N. R. Flavonoids from Punica granatum--potential antiperoxidative agents. Fitoterapia. 76 (2), 181-186 (2005).
  22. Riaz, A., Khan, R. A. Anticoagulant, antiplatelet and antianemic effects of Punica granatum (pomegranate) juice in rabbits. Blood Coagul Fibrinolysis. 27 (3), 287-293 (2016).
  23. Balasubramani, S. P., Varghese, R. K., Vishnuprasad, C. N., Venkatasubramanian, P. Pomegranate juice enhances iron dialysability and assimilation in in-vitro cell-free and cell-based models. Plant Foods Hum Nutr. 75 (2), 272-278 (2020).
  24. Jilani, T., Iqbal, M. P. Does vitamin E have a role in treatment and prevention of anemia. Pak J Pharm Sci. 24 (2), 237-242 (2011).
  25. Farrell, P. M., Bieri, J. G., Fratantoni, J. F., Wood, R. E., di Sant'Agnese, P. A. The occurrence and effects of human vitamin E deficiency. A study in patients with cystic fibrosis. J Clin Invest. 60 (1), 233-241 (1977).
  26. Ukab, W. A., Sato, J., Wang, Y. M., van Eys, J. Xylitol mediated amelioration of acetylphenylhydrazine-induced hemolysis in rabbits. Metabolism. 30 (11), 1053-1059 (1981).
  27. Ahuja, V., et al. Biological and pharmacological potential of xylitol: A molecular insight of unique metabolism. Foods. 9 (11), 1592(2020).
  28. Nikas, I. P., Paschou, S. A., Ryu, H. S. The role of nicotinamide in cancer chemoprevention and therapy. Biomolecules. 10 (3), 477(2020).
  29. Katayoshi, T., Yamaura, N., Nakajo, T., Kitajima, N., Tsuji-Naito, K. Porcine placental extract increases the cellular NAD levels in human epidermal keratinocytes. Sci Rep. 12 (1), 19040(2022).
  30. Bartoszewski, R., et al. Primary endothelial cell-specific regulation of hypoxia-inducible factor (HIF)-1 and HIF-2 and their target gene expression profiles during hypoxia. Faseb J. 33 (7), 7929-7941 (2019).
  31. Lee, S. H., Golinska, M., Griffiths, J. R. HIF-1-independent mechanisms regulating metabolic adaptation in hypoxic cancer cells. Cells. 10 (9), 2371(2021).
  32. Sato, T., Takeda, N. The roles of HIF-1α signaling in cardiovascular diseases. J Cardiol. 81 (2), 202-208 (2023).
  33. Ratcliffe, P. J. Oxygen sensing and hypoxia signalling pathways in animals: The implications of physiology for cancer. J Physiol. 591 (8), 2027-2042 (2013).
  34. Li, L. J., Huang, Q., Zhang, N., Wang, G. B., Liu, Y. H. miR-376b-5p regulates angiogenesis in cerebral ischemia. Mol Med Rep. 10 (1), 527-535 (2014).
  35. Tejero, J., Shiva, S., Gladwin, M. T. Sources of vascular nitric oxide and reactive oxygen species and their regulation. Physiol Rev. 99 (1), 311-379 (2019).
  36. Fujii, J., et al. Erythrocytes as a preferential target of oxidative stress in blood. Free Radic Res. 55 (5), 562-580 (2021).
  37. Huang, J. W., et al. High expression of HIF-1α alleviates benzene-induced hematopoietic toxicity and immunosuppression in mice. Environ Pollut. 311, 119928(2022).
  38. Zhang, Z., Yao, L., Yang, J., Wang, Z., Du, G. PI3K/Akt and HIF-1 signaling pathway in hypoxia-ischemia (Review). Mol Med Rep. 18 (4), 3547-3554 (2018).
  39. Del Balzo, U., et al. Nonclinical characterization of the hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase inhibitor roxadustat, a novel treatment of anemia of chronic kidney disease. J Pharmacol Exp Ther. 374 (2), 342-353 (2020).
  40. Bhatia, S., Singh, A., Batra, N., Singh, J. Microbial production and biotechnological applications of α-galactosidase. Int J Biol Macromol. 150, 1294-1313 (2020).
  41. Conte, F., van Buuringen, N., Voermans, N. C., Lefeber, D. J. Galactose in human metabolism, glycosylation and congenital metabolic diseases: Time for a closer look. Biochim Biophys Acta Gen Subj. 1865 (8), 129898(2021).
  42. Wang, Y. Y. Investigate the effect of galacto-oligosaccharide supplementation on intestinal absorption of iron in rats. [Master's Thesis]. , Southern Medical University. (2019).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Ши-Лю-Бу-Сюэсигнализация HIF-1метаболизм галактозывестерн-блоттингмышиная модельметаболизм в печениснижение экспрессии белка

Эта статья была опубликована

Видео скоро будет доступно

Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.