$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Виды тополей склонны производить AR или боковые корни (LR) из стеблевых черенков, что способствует их размножению и является моделью для изучения биологии корней у древесных растений 7,8. Более того, исследования показали, что инокуляция конкретных микроорганизмов, таких как полезные бактерии (Agrobacterium rhizogenes 9,10; Ризобактерии, способствующие росту растений [PGPR]11), эндофиты, бактерии12,13, арбускулярные микоризные грибы (AMF)14,15 или эктомикоризные грибы (EMF)16,17 могут способствовать росту или развитию корней растений. Тем не менее, не сообщалось о патогенах (ни бактериях, ни грибковых патогенах), которые индуцируют или способствуют развитию структуры ARs на растениях-хозяевах.
Проведенные здесь эксперименты показали, что различные патогены рака тополя (такие как V. sordida, B. dothidea) могут вызывать образование AR в стеблях/ветвях тополя (рис. 2A, панели 3-6). Кроме того, эксперименты показали, что AR могут быть индуцированы на различных видах/клонах тополей, например, на 1-2-летних саженцах P. alba var. pyramidalis, Populus × beijingensis, P. alba × P. tremula var. glandulosa clone 84K, P. euramericana cv. 'Bofeng 3' и даже на 6-летних ветвях тополя (рис. 2A, панель 7). Тем не менее, структура ARs не была получена на 1-летних саженцах/ветвях Malus spp., Prunus spp., Cedrus deodara и Pinus massoniana. Затем этот протокол обеспечил новый путь производства АР тополя: индуцирование АР путем опоясывающей инокуляции возбудителей грибкового рака деревьев (V. sordida и B. dothidea) на стеблях/ветвях тополя.
Эксперименты также показали, что оба метода опоясывания флоэмой и эпидермиса могут вызывать образование АР на стеблях тополя после инокуляции патогена; Тем не менее, стебли тополя после опоясывающей флоэмы прививки легко поддаются ветровой обработке в местах опоясывания, что приводит к значительному снижению ударной вязкости, вызванному манипуляциями с опоясыванием и удалением коры (флоэмы), а также инвазии патогенных микроорганизмов. Поэтому для индукции АР стебли/ветви тополя должны быть хорошо привязаны к палкам, чтобы предотвратить их поломку, особенно при использовании метода опоясывания флоэмой.
Сами растения в основном определяют образование АР. Однако на него также влияют некоторые факторы окружающей среды. Например, АР могут индуцироваться в условиях заболачивания или затопления у некоторых видов двудольных18,19. Сохранение влаги было решающим этапом индукции АР на надземных стеблях/ветвях. В этом протоколе для сохранения влаги использовались как парапленка, так и бытовая полиэтиленовая пленка. Тем не менее, обертка парапленки может быть пронизана вновь образовавшимися АР, что приводит к потере воды, задержке роста, потемнению и одревеснению АР тополя. Напротив, в стеблях тополя, обернутых полиэтиленом, были собраны обильные, нежные и богатые водой АР. Поэтому в данном протоколе была рекомендована бытовая полиэтиленовая пленка, а не пленка Parafilm.
Корни являются важнейшими органами растений, играющими важную роль в размножении, росте, питательных веществах и поглощении воды растениями. Затем эти методы должны быть использованы при изучении ризогенеза20, морфологии и развития, а также архитектуры корневой системы (RSA)21 у видов тополя. Кроме того, исследования показали, что связь между корневой системой и ризосферными бактериями может повысить устойчивость растений-хозяев к болезням22; Затем инокуляция патогенов опоясывающего рака должна вызвать некоторые молекулярные и эпигенетические изменения в АР тополя, которые могут найти применение при выращивании устойчивых к болезням саженцев.
Свет является важнейшим фактором окружающей среды, влияющим на рост, развитие и размножение растений. Эксперимент по затенению-воздействию (рис. 2В) показал, что индуцированные патогенами тополя ARs являются идеальной экспериментальной системой для биосинтеза сегментов растений (флавоноидов, антоцианов23 и т.д.). Предыдущие исследования также показали, что условия освещения (интенсивность, качество, продолжительность и количество, подвергаемое родительскому растению) влияют на формирование корней или ризогенез и развитие как придаточных, так и боковых корней 24,25,26. Таким образом, благодаря тонкой настройке условий освещения, патогенно-индуцированная система ARs тополя в этом протоколе может быть использована в исследовании биологии корней и других процессов, связанных со светореакцией растений тополя.