Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Хирургический подход при раздавливании зрительного нерва на модели кролика

1.9K просмотров

DOI:

10.3791/67415

8 июля 2025 г.

В этой статье

Краткое содержание

В данной работе представлена подробная инструкция по выполнению сдавливания зрительного нерва на модели кролика с использованием стандартных офтальмологических хирургических методик.

Аннотация

Дробление зрительного нерва (ОНЦ) — это экспериментальный метод, используемый для моделирования и изучения механизмов невропатий зрительного нерва и потенциальных терапевтических вмешательств. В исследованиях ONC в основном использовались модели грызунов; Тем не менее, эти модели демонстрируют заметные анатомические и физиологические отличия от людей, что потенциально ограничивает переводимость. В этой статье мы опишем хирургическую технику для достижения модели ONC у кроликов, видов с размерами земного шара, более похожими на человеческие глаза. Разработанная хирургическая методика использует офтальмологические хирургические техники, применяемые при косоглазии и окулопластических операциях, и не требует создания костных окон или кантотомий. Модель была валидирована путем оценки зрачковой реакции при различных условиях освещения и визуальных вызванных потенциалов (VEP) до и после ОНЦ. Результаты продемонстрировали значительное снижение как зрачкового ответа, так и амплитуды VEP в глазах с ONC по сравнению с необработанными контралатеральными глазами, что указывает на потерю зрительной функции после травмы, как и ожидалось. Этот хирургический метод может предоставить модели для изучения повреждений зрительного нерва и тестирования потенциальных терапевтических стратегий с более широкими последствиями для понимания и лечения нейродегенеративных заболеваний глаза.

Введение

Метод сдавливания зрительного нерва (ONC) является экспериментальным подходом к созданию контролируемых моделей повреждения зрительного нерва, необходимых для исследования оптических невропатий 1,2,3. Вызывая локализованное повреждение зрительного нерва, приводящее к повреждению аксонов и дегенерации ганглиозных клеток сетчатки, модель ONC моделирует некоторые патологические характеристики различных оптических невропатий, таких как травматическая оптическая нейропатия и глаукома 4,5,6,7.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

В этом исследовании использовались новозеландские белые кролики (4,4 - 4,8 кг). Дизайн экспериментов на животных соответствовал рекомендациям ARVO по использованию животных в офтальмологических исследованиях и исследованиях зрения. Комитет по уходу за животными и их использованию Стэнфордского университета рассмотрел и одобрил эти эксперименты (номер протокола: APLAC-33781).

1. ОНК

  1. Обезболите кролика (n = 4) в соответствии с рекомендациями Центра ветеринарной службы (VSC), чтобы обеспечить адекватное успокоение кролика и отсутствие боли на протяжении всей процедуры. Кратковремен....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Для оценки зрительной функции реакцию зрачков количественно оценивали путем нахождения отношения диаметра зрачка (сплошная желтая линия на рисунке 4А) к диаметру белого к белому (пунктирная желтая линия на рисунке 4А) в условиях мезопического и вспышечного освещения, как показано на рисунке 4. До процедуры ONC наблюдалось значительное сужение зрачка в ответ на свет. Тем не менее, через 1-3 дня после ОНК диаметр зрач.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

В этом исследовании представлен подробный протокол выполнения процедуры ONC у кроликов, в котором особое внимание уделяется менее инвазивному подходу к доступу к зрительному нерву. В предыдущих отчетах отсутствовали исчерпывающие описания, визуальные рекомендации или они полагались на более инвазивные методы, требующие имплантатов, латеральной кантотомии и/или резекции кости 19,20,21,22,23,24,25.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

У авторов нет конфликта или конкурирующих финансовых интересов.

Благодарности

Эта работа была поддержана Национальным институтом глаза в рамках грантов K08-EY033407 и P30-EY026877, а также Исследования по предотвращению слепоты.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
8-0 Покрытый викрил фиолетовый шовный материал TG140-8 ДвустороннийEthiconJ547GИспользуется для процедуры сдавливания зрительного нерва
Антиседан (атипамезола гидрохлорид 5,0 мг/мл растворZoetisNDC:54771-6293Используется для оперативного применения
Боннский связывающий щипцы Угловой наконечник 0,2 мм, титановыйтитан MedicalTMF502Используется для процедуры
сдавливания зрительного нерваИглодержатель Castroviejo изогнутый, титановыйTitan MedicalTMH105Используется для процедуры сдавливания зрительного нерва
Castroviejo Шовные щипцы 1x2 0,12мм прямые, титановыеTitan MedicalTMF411Используются для процедуры сдавливания зрительного нерва
Cerenia (раствор маропитанта цитрата 10 мг/мл)ZoetisNDC:54771-8179Используется для оперативного применения
Одноразовая подкожная игла из нержавеющей стали ЭлектродыNatus019-476600Используются для визуального тестирования вызванных потенциалов
Эутазол (390 мг/мл пентобарбитал натрия и 50 мг/мл фенитоина натрия)VirbacNDC: 51311-050Используется для эвтаназии
Graefe Muscle Hook, титанTitan MedicalTME133Используется для процедуры сдавливания зрительного нерва
Инсулиновый шприц 1/2 мл, 29 г, 1/2 "Monoject8881600350Используется для интравитреального введения
Jameson Muscle HookTitan MedicalTME122Используется для процедуры дробления зрительного нерва
McPherson Tiing Щипцы с прямым наконечником 0,2 мм, титанTitan MedicalTMF501Используется для процедуры дробления зрительного нерва
Normosol-R (изотонический раствор сбалансированных электролитов; кристаллоидная жидкость)ICU Medical Inc.NDC:0990-7670Используется для оперативного применения
Офлоксацин Офтальмологический раствор 0,3%Bausch & Lomb60505-0560-0Используется для послеоперационного применения
Olympus FLUOVIEW FV3000OlympusFLUOVIEW FV3000Конфокальный лазерный сканирующий микроскоп
Фенилэфрин HCl 2,5% Офтальмологический растворBausch & Ломб82260-102-10Используется для предоперационного применения
ProLong Gold Antifade MountantInvitrogen P36934Монтажная среда
Пропаракаин гидрохлорид 0,5% Офтальмологический растворBausch & Lomb24208-730-06Используется для предоперационного применения
RETeval Visual Electrodiagnostic DeviceLKC Technologies, Inc.RETevalИспользуется для тестирования визуального вызванного потенциала
Тропикамид 1,0% Офтальмологический растворBausch & Lomb24208-585-64Используется для предоперационного применения
Ножницы Westcott CurvedTitan MedicalTMS401Используется для процедуры сдавливания зрительного нерва
)

Ссылки

  1. Chierzi, S., Strettoi, E., Cenni, M. C., Maffei, L. Optic nerve crush: Axonal responses in wild-type and bcl-2 transgenic mice. J Neurosci. 19 (19), 8367-8376 (1999).
  2. Tang, Z., et al. An optic nerve crush injury murine model to study retinal ganglion cell s....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги