В данном исследовании представлен простой беспроводной метод регистрации ЭМГ. Несмотря на необходимость хирургического вмешательства, надрез делается только в области введения электродов и фиксации коннектора, что значительно снижает нагрузку на животное. В данной демонстрации электроды были введены в нижние конечности, однако с помощью того же метода можно проводить аналогичные электрофизиологические исследования и в других областях. Этот подход дает преимущество в виде непрерывного измерения электрофизиологического сигнала без использования соединительных кабелей и без наложения поведенческих ограничений. Печатная плата схемы имеет диаметр 9 mm, высоту 3 mm и общий вес 3 g. Замена батареи осуществляется простым способом, а предлагаемая система позволяет осуществлять непрерывный мониторинг двигательного поведения. Фотография, демонстрирующая крепление коннектора и устройства, а также форма сигнала ЭМГ представлены на Рисунке 7.
В данном исследовании для анализа паттернов движения крыс использовалась беговая дорожка. Беговая дорожка является эффективным инструментом для анализа движений животных17, позволяющим оценить мышечные или неврологические нарушения. Несмотря на то, что ее можно использовать и для изучения свободного передвижения крыс, данный эксперимент направлен именно на анализ аномалий движения, вызванных различными состояниями. Для этого требуется непрерывное и повторяющееся движение, что делает беговую дорожку подходящим выбором для наших целей.
Для анализа локомоции животных с помощью ЭМГ можно использовать различные методы. Среди этих методов при поведенческом анализе применялся индекс симметрии21,22. Индекс симметрии измеряет баланс активности между двумя мышцами по обе стороны тела; мы использовали его для оценки восстановления после инсульта.

Рисунок 1: Процесс подготовки проволочного электрода. (A) Иллюстрация структуры проволоки и места удаления изоляции. При введении проволок в мышцы необходимо завязать три узла, чтобы предотвратить чрезмерное погружение. (B) Изоляция полностью удалена на краю проволоки. (C) Изоляция удалена частично для облегчения контакта с мышцей. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 2: Процесс сборки проволочного электрода и коннектора. (A) Подготовка материалов для сборки. (B) Вставка проволоки в металлический компонент. (C) Пайка проволоки к металлическим компонентам. (D) Протягивание проволоки через отверстие пластикового корпуса. (E) Вставка проволоки и металлических компонентов в пластиковый корпус. (F) Завершение сборки для всех проводов и использование цианоакрилатного клея для прикрепления пластикового корпуса к направляющей шва (серая часть). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 3: Хирургические инструменты, необходимые для процедуры. Набор хирургических инструментов, необходимых для проведения процедуры, включая (1) шовную иглу, (2) пинцет, (3) пинцет, (4) хирургические ножницы, (5) тонкие ножницы, (6-7) гемостаты, (8) иглодержатель и (9) подготовленный электрод. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 4: Процедура крепления электродов. (A) Места разрезов на спине и ноге. (B) Введение иглодержателя через разрез для захвата провода. (C) Вытягивание провода из разреза. (D) Техника наложения швов в целевой мышце, размещение электродов вокруг самой толстой части мышцы с интервалом 5 mm. (E) Конечный этап завершения операции. Нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 5Размещение коннектора. (A) Наложение швов под коннектором. (B) Фиксация коннектора шовным материалом. (С) Нанесение адгезива поверх коннектора и установка металлического экрана для защиты. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 6: Демонстрация регистрации ЭМГ. (A) Фотография системы регистрации ЭМГ, установленной на крысе. (B) Проведение теста на беговой дорожке при скорости 25 m/min. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 7: Измеренная форма сигнала ЭМГ и ее огибающая. (A) Исходная форма измеренного сигнала ЭМГ. (B) Отфильтрованный сигнал ЭМГ, используемый для получения огибающей. (C) Огибающая форма сигнала с пороговой линией для анализа индекса симметрии. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Дополнительный рисунок 1: Схема разводки печатной платы. Схематическое представление разводки печатной платы (PCB), иллюстрирующее расположение компонентов и соединений. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы скачать этот рисунок.
Дополнительный Рисунок 2: Схема разводки обратного слоя печатной платы. Схема обратного слоя печатной платы (PCB) с подробным указанием размещения компонентов и трассировки цепей. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы скачать этот рисунок.
Дополнительный Рисунок 3: Схема верхнего слоя печатной платы. Дизайн верхнего слоя печатной платы (PCB), демонстрирующий расположение компонентов и электрических соединений. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы скачать этот рисунок.
Дополнительный файл с кодом 1: Подготовка прошивки для конфигурации АЦП. Инструкции по подготовке прошивки для настройки 2-канального аналого-цифрового преобразователя (АЦП) с 8-битным разрешением и частотой дискретизации 2 отсчета в секунду (kSPs). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы скачать этот файл.
Дополнительный файл с кодом 2: Приложение для построения графиков на языке Python. Описание приложения для построения графиков на языке Python, использованного в данном исследовании для визуализации и анализа данных. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы скачать этот файл.